實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)HBVDNA與ELISA檢測(cè)HBV M結(jié)果分析

張?jiān)伱?張智博

(漯河市疾病預(yù)防控制中心 河南漯河 462000)

乙型肝炎是一種全球性傳染性疾病,我國(guó)是乙型肝炎病毒感染高發(fā)地區(qū),HBsAg陽(yáng)性率曾平均為10.1%[1],雖然近年來(lái)隨著疾病預(yù)防控制的加強(qiáng),我國(guó)乙肝病毒感染率有明顯下降,但情況仍不容樂(lè)觀。ELISA檢測(cè)乙肝在臨床上已應(yīng)用多年,HBsAg和/或者HBeAg陽(yáng)性,已成為判定HBV感染的標(biāo)志。實(shí)時(shí)熒光PCR法檢測(cè)HBV DNA,則可使HBV-DNA檢測(cè)值相對(duì)量化,從數(shù)據(jù)上直接觀察到感染者是否復(fù)制,從而為觀察乙肝的療效及制訂預(yù)防措施提供依據(jù),逐步降低我國(guó)乙肝病毒感染者人數(shù)。本文對(duì)我中心2010年至2011年的322例ELISA檢測(cè)判定HBV感染者的實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)結(jié)果之間的關(guān)系進(jìn)行了分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2010年至2011年,來(lái)我中心進(jìn)行ELISA檢測(cè)HBV M,判定為HBV感染者及其實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)結(jié)果,共323例,其中男性209例,女性114例,年齡從15～74歲,HBV感染者判定符合《全國(guó)病毒性肝炎防治方案》[2](2000版)診斷標(biāo)準(zhǔn)要求。

1.2 方法

1.2.1 HBV M測(cè)定 采用ELISA法檢測(cè)HBV M,試劑采用廣東省珠海市麗珠試劑股份有限公司生產(chǎn)的酶聯(lián)免疫試劑盒,按試劑盒操作說(shuō)明書(shū)進(jìn)行檢測(cè)。

1.2.2 HBV DNA測(cè)定 采用實(shí)時(shí)熒光PCR法檢測(cè)HBV DNA,儀器:美國(guó)伯樂(lè)公司生產(chǎn)的IQ5全自動(dòng)實(shí)時(shí)熒光PCR儀,試劑:上海科華生物工程股份有限公司生產(chǎn)的乙型肝炎病毒核酸定量檢測(cè)試劑盒,按試劑盒使用說(shuō)明書(shū)進(jìn)行檢測(cè),檢測(cè)值≥500為陽(yáng)性,檢測(cè)值0.00則為陰性。

2 結(jié)果

322 例乙肝病毒感染者HBV DNA檢測(cè)結(jié)果與HBV M之間的關(guān)系見(jiàn)表1。

表1 乙肝HBV M檢測(cè)結(jié)果與HBV DNA檢測(cè)值之間關(guān)系

323 例乙肝病毒感染者,其HBV DNA陽(yáng)性者為175例,陽(yáng)性率為54.18%,其中,HBsAg、HBeAg、HBcAb或HBsAg、HBeAg陽(yáng)性者,其HBV DNA陽(yáng)性率及病毒含量均最高,而HBsAg、HBeAb、HBcAb或HBsAg、HBcAb陽(yáng)性者,其HBV DNA陽(yáng)性率及含量處于中間水平,僅HBsAg陽(yáng)性者,其HBV DNA陽(yáng)性率及含量均在較低水平。且第1、第2組與第3、第4組之間有顯著性差異(χ2=49.49,P<0.01);第3、第4組與第5組之間,有顯著性差異。(χ2=57.66,P<0.01)。

3 討論

我國(guó)是乙型肝炎病毒感染者高發(fā)區(qū),判斷乙肝病毒的含量、復(fù)制及活動(dòng)情況,對(duì)乙型肝炎的監(jiān)測(cè)預(yù)防及乙肝患者的治療效果的判定,有十分重要的意義,傳統(tǒng)的ELISA檢測(cè)方法,方便快速經(jīng)濟(jì),可以判斷乙肝病人不同的感染期,實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)HBV DNA,是病毒在人體內(nèi)復(fù)制的最直接的標(biāo)志,和傳統(tǒng)方法相比,具有結(jié)果精確靈敏,相對(duì)定量的優(yōu)點(diǎn)。ELISA檢測(cè)方法中,把HBeAg陽(yáng)性,做為判斷其病毒復(fù)制及傳染的依據(jù),從熒光PCR檢測(cè)HBV DNA結(jié)果發(fā)現(xiàn),HBeAg陽(yáng)性者93例,HBV DNA陽(yáng)性者92例,二者存在正相關(guān)關(guān)系,與文獻(xiàn)[3]報(bào)導(dǎo)一致,具有相似的流行病學(xué)意義。但是,HBeAg陰性,也有相當(dāng)一部分感染者病毒是可以復(fù)制傳染的,尤其是HBcAb同時(shí)為陽(yáng)性者,復(fù)制率達(dá)到50%以上,因此,不能把HBeAg做為判定HBV病毒復(fù)制傳染的唯一標(biāo)志,最好是2種方法同時(shí)進(jìn)行檢測(cè),以利于治療和對(duì)預(yù)后進(jìn)行判定,對(duì)乙型肝炎患者的治療用藥起到更好的的指導(dǎo)作用。

[1] 劉崇伯,中國(guó)病毒乙型肝炎的流行征及預(yù)防[J].中國(guó)公共衛(wèi)生,1997,13(9):515.

[2] 中華醫(yī)學(xué)會(huì),傳染病與寄生蟲(chóng)病學(xué)分會(huì),肝病學(xué)分會(huì)聯(lián)合修訂.病毒性肝炎防治方案[J].中華傳染病雜志,2001,19(1):56.

[3] 張健,李寧,呂維紅.HBV-DNA定量測(cè)定對(duì)乙肝五項(xiàng)的評(píng)價(jià)意義[J].華中醫(yī)學(xué)雜志,2001,25(1):15～17.