中藥防治大鼠非酒精性脂肪性肝炎的實驗研究進展*

陳 希 余軼群 李軍祥

（1.北京中醫藥大學，北京 100029；2.北京中醫藥大學東方醫院，北京 100078）

非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）包括單純性非酒精性脂肪肝（NAFL）、非酒精性脂肪性肝炎（NASH）和脂肪性肝硬化。其中NASH是一個重要的中間環節。對非酒精性脂肪性肝炎的發病機制而言，目前普遍認同的是“二次打擊學說”。第1次打擊為胰島素抵抗，是NAFLD發生發展的關鍵環節［1］；第2次打擊為在肝臟脂肪沉積基礎上所發生的氧化應激和脂質過氧化，是導致NASH的關鍵［2］。近些年研究發現，許多中藥具有防治NASH的療效，可從改善胰島素抵抗、調節脂質代謝、抗脂質過氧化、調控脂質代謝相關因子等方面發揮作用。現就中藥防治大鼠NASH的實驗研究進展做一綜述。

1 改善胰島素抵抗

胰島素抵抗致肝細胞內三酰甘油（TG）蓄積被認為是NASH的重要致病因素［3］。王偉芹等［4］應用清肝調脂飲（生甘草、梔子、田基黃、青皮、赤芍、枸杞子等）治療NASH大鼠模型，與西利賓胺作對照，結果發現，清肝調脂飲能不同程度降低模型大鼠血糖、血胰島素含量，降低胰島素抵抗和增加胰島素敏感指數，療效優于西利賓胺，且以高劑量最為明顯。郭紅梅等［5］用芪茵顆粒干預高脂乳劑灌胃建立的大鼠NASH模型，以易善復做對照，結果證實，芪茵顆粒和易善復組均可不同程度地降低NASH大鼠血清瘦素和胰島素抵抗指數，改善胰島素抵抗狀態，具有良好的防治脂肪肝作用。仇海樂等［6］以降脂益肝沖劑（由丹參、山楂、草決明、枸杞子、何首烏等18味中藥組成）對高脂飲食誘導的大鼠NASH進行干預，實驗表明，降脂益肝沖劑可升高胰島素敏感指數，改善胰島素抵抗，調整脂質代謝，促進肝功能的恢復。

2 調節脂質代謝

肝細胞內脂質特別是TG蓄積是NASH形成和進展的基礎［7］。梁惠卿等［8］以高膽固醇高脂肪飲食復制 NASH 模型，研究發現，茵陳蒿湯能抑制肝臟TG含量及肝重的增加，降低血清總膽固醇（TC）含量及轉氨酶水平，有效減輕大鼠肝組織脂肪變性及炎細胞浸潤。裴強等［9］以清肝化痰活血方（決明子、柴胡、陳皮、制半夏、郁金、赤芍等）和膽寧片作對照，觀察對NASH模型大鼠的影響，結果發現，清肝化痰活血方能降低大鼠血脂水平，減輕肝臟脂質沉積，改善肝組織病理變化，恢復肝功能，對脂肪肝有較好的預防作用。余軼群等［10］研究發現，何首烏、三七提取物能明顯降低NASH模型大鼠肝組織TG和血清TG、低密度脂蛋白（LDL）含量，升高高密度脂蛋白（HDL）含量，提示何首烏、三七提取物可降低NAFLD大鼠血清、肝臟脂質合成與聚積，從而有效防治NAFLD。

3 抗脂質過氧化

氧應激是過氧化物和抗氧化物之間的一種動態失衡狀態。肝組織中脂肪沉積致氧應激顯著增強。夏瑾瑜等［11］以不同劑量肝脂康膠囊（澤瀉、決明子、生山楂、五味子、郁金）和東寶肝泰對高脂飲食制作脂肪肝動物模型進行干預，對比研究發現，肝脂康膠囊大、中劑量組大鼠體重、肝指數及血清TG、TC、游離脂肪酸、丙氨酸氨基轉移酶（ALT）、谷氨酸氨基轉移酶（AST）顯著降低，HDL 升高，肝組織丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、GSH、TG及VitE恢復到接近正常。且肝脂康膠囊在降低肝指數、TC、AST，升高HDL方面，優于東寶肝泰。劉興等［12］研究發現，銀杏葉提取物可使NASH大鼠肝組織中MDA含量下降、SOD含量上升，減輕肝細胞損害，明顯改善肝功能。于洪波等［13］用復方中藥（包括西洋參、黃芪、澤瀉、山楂、白術、車前草、柴胡、丹參）防治大鼠NASH，結果表明，與模型組比較，復方中藥組肝組織SOD活性明顯升高，MDA含量顯著下降，血清腫瘤壞死因子（TNF）－α水平明顯降低，同時PPARγ表達明顯增強，提示該方可抗脂質過氧化和抑制炎癥反應，其機制可能與增強PPARγ表達有關。

4 調節細胞因子

脂肪細胞能分泌很多激素與細胞因子，細胞因子通過多種途徑參與NASH的發生發展。朱丹等［14］利用理氣化痰祛瘀中藥（由桃仁、生山楂、澤瀉、香櫞、郁金、浙貝母等組成）作用于高脂飲食誘導的NASH 大鼠，檢測血清 FFA、TNF-α、白介素（IL）-6、leptin水平和肝組織 TNF－α、IL-6、leptin mRNA表達，研究認為TNF－α、IL-6、leptin參與高脂飲食誘導的大鼠NASH的發生，理氣化痰祛瘀中藥能調節TNF-α、IL-6、leptin的分泌，防止 NASH的進一步發展。胡可榮等［15］觀察保肝降脂飲對高脂飲食誘導建立大鼠NASH模型的影響，揭示保肝降脂飲可使大鼠血清中leptin含量顯著降低、肝細胞內脂肪酸含量減少、肝臟脂肪變性減輕。嚴茂祥等［16］觀察山楂葉總黃酮（TFHL）對高脂飲食誘導的NASH大鼠的影響。結果發現，與模型組比較，TFHL高、低劑量能顯著降低大鼠肝組織炎癥活動度、肝組織TNF-α mRNA表達及血清和肝組織勻漿TNF－α、IL-8含量。提示TFHL可能通過調節細胞因子網絡，抑制TNF－α、IL-8等的分泌，有效防治NASH。

5 調控脂質代謝相關因子

脂質代謝紊亂導致肝細胞內脂質過度蓄積是形成NASH的先決條件，在調控脂質代謝過程中，某些相關因子具有重要作用。姬愛冬等［17］以益腎調肝方（制首烏、枸杞子、三七、垂盆草、決明子）干預NASH大鼠，觀察對脂質代謝相關因子過氧化物酶體增殖物活化受體 α（PPARα）、PGC-1α 及 SREBP-1c、SCAP 的調控作用，結果發現，益腎調肝方可以使PPARα、PGC-1α下降幅度減小，使SREBP-1c、SCAP上升幅度降低，證實該方對脂質代謝相關因子PPARα、PGC-1α及SREBP-1c、SCAP有調控作用，可預防NASH。李立等［18］采用高脂飼料建立NASH大鼠模型，應用3種中醫辨證方（健脾補腎方、活血降濁方、綜合方）每日灌胃治療，結果顯示，與模型組比較，3種中醫辨證方組大鼠肝功能、血脂及 SREBP-1c、SCAP 含量明顯降低，PPARα、PGC-1α 含量明顯升高，提示3種中醫辨證方可以干預脂質代謝相關因子從而調節脂質代謝。趙巖等［19］觀察平糖方（白術、澤瀉、山楂、大黃、何首烏以 6∶2∶4∶2∶5 組成）對 NASH 大鼠的療效，結果發現，平糖方能顯著降低NAFLD大鼠的血脂及轉氨酶水平，且顯著降低肝臟SREBP-1c和脂肪酸合成酶（FAS）mRNA的表達，但LXRα mRNA的表達變化不明顯，提示平糖方對NAFLD大鼠具有治療作用，其機制可能與抑制肝臟成脂作用有關。施軍平等［20］采用高脂飲食制備大鼠NASH模型，探討理氣化痰祛瘀方（由生山楂、廣郁金、制桃仁、福澤瀉、海藻、香櫞、象貝母、炒萊菔子、云茯苓，按 3∶1.5∶1.2∶2.4∶1.5∶1.0∶1.2∶1.5∶1.5 比例組成）的作用，檢測肝組織中PPARα、γ和CPT-1的表達，結果發現，理氣化痰祛瘀方組大鼠肝組織炎癥活動程度較模型大鼠顯著降低，肝組織PPARα和CPT-1mRNA的表達明顯增強，而PPARγ蛋白和mRNA表達明顯下降。仇海樂等［6］研究發現降脂益肝沖劑可使NASH大鼠PPARγ的表達增強，能降低大鼠血清轉氨酶、TC、TG，升高胰島素敏感指數（ISI），提示該方可改善胰島素抵抗，降低肝臟的脂質沉積，有效治療大鼠NASH。

6 調控線粒體功能

線粒體是生理狀態下脂肪酸氧化代謝的主要場所［21］。NASH患者線粒體結構及功能異常，呼吸鏈功能障礙，從而誘發更多的脂質過氧化損傷。姬愛冬等［22］研究益腎調肝方對NASH大鼠線粒體的調控作用，發現該方可使線粒體含量、細胞色素C氧化酶活性、線粒體膜電位下降的幅度明顯減小，使線粒體DNA修復酶水平明顯升高，可顯著降低肝酶及血脂水平，減少脂肪沉積及改善肝臟病理。結果顯示，益腎調肝方對線粒體的調控可能是其預防NASH的作用靶點之一。

7 其 他

高原等［23］探討NASH內毒素性肝損傷機制及疏肝祛瘀通絡降濁法（主要成分為黃芪、生楂、柴胡等）不同劑量對其影響。結果顯示，中劑量治療組大鼠血清內毒素、TNF-α、IL-1β水平明顯降低，肝組織CD14陽性細胞數量明顯減少，肝組織多糖結合蛋白（LBP）mRNA 和和 4型 Toll樣受體（TLR-4）mRNA 表達均明顯下調。提示該方的療效可能與其降低血清內毒素水平、下調肝組織內毒素相關受體表達有關。嚴紅梅等［24-26］觀察杞薊制劑（枸杞子、水飛薊）對NASH大鼠的影響，實驗發現，杞薊制劑可抑制NASH大鼠肝組織細胞間黏附因子-1（ICAM-1）蛋白、肝組織CD14、溶菌酶蛋白、肝臟枯否氏細胞（KC）、肝組織型脂肪酸結合蛋白（L-FABP）mRNA和蛋白的表達，提示這些可能是杞薊制劑防治NASH的作用機制。李玉中等［27］觀察復方甘正浸膏對高脂飲食建立的NASH大鼠模型肝臟細胞色素P4502E1（CYP2E1）表達的影響，結果發現，復方甘正浸膏治療組CYP2E1陽性率明顯減少，SOD活性顯著增高，MDA水平顯著降低，證實該方具有清除脂質過氧化和氧自由基的作用。馬燕花等［28］觀察中藥慈菇消脂丸（山慈菇、澤瀉、柴胡、生山楂、決明子、甘草等）對NASH大鼠的防治作用，結果中藥治療組肝組織SOD活性顯著提高，MDA、NO含量顯著降低，環氧化酶-2、誘生型一氧化氮合酶蛋白表達顯著降低，結論證實，慈菇消脂丸對NASH大鼠具有防治作用，其作用機制與改善肝組織脂肪變性、抑制脂質過氧化、抗炎有關。

8 存在問題及展望

迄今為止，尚缺乏防治NASH的理想藥物，中醫藥治療具有一定的優勢，并且在實驗研究方面也取得了一定的進展，研究證實多種中藥及中藥提取物對NASH具有良好的防治作用，但筆者認為仍存在一定的問題。（1）缺乏病證結合模型。目前開展的大多數實驗研究皆沿用西醫的造模方法，雖然此類造模方法盡可能在病因、組織病理學和發病機制上與人類NASH相似，但仍不符合中醫傳統的辨證論治觀點。在今后的研究中，應致力于尋求建立病證結合的NASH動物模型，為更好地進行及開展中醫藥防治NASH提供理想的動物模型。（2）缺少離體細胞水平的研究。所查文獻資料中極少關于NASH離體細胞水平的研究。因動物模型個體差異較大，實驗條件不易控制，影響因素眾多，今后可加以開展中藥對NASH離體細胞模型的作用及機制研究，以彌補動物模型研究之不足。（3）缺乏自然恢復組對照。非藥物治療，如飲食、運動在NAFLD的臨床治療中意義重大，故藥物的實驗研究過程中，在給藥治療階段，應設立自然恢復組加以對照，從而更好地明確藥物療效。（4）某些作用環節尚未觸及。近些年關于中藥對NASH作用機制的研究逐漸開展，亦從分子水平闡明了一些中藥的作用靶點，但尚有NASH發生發展的某些環節，中藥研究尚未觸及。今后可進一步拓寬、深入中藥對該領域的研究，并多多采納、應用新的實驗技術與方法，以期明確中藥的作用機制及靶點。（5）研究結果推廣受限。盡管加以實驗研究的中藥，多為臨床療效確切的經方或驗方，但中藥復方存在藥物之間的相互作用，其作用機理復雜，難以明確發揮作用的藥物成分，影響其臨床推廣。故更好的發揮中醫治療NASH辨證、辨病論治相結合的優勢，篩選療效確切的藥物，研發適應癥廣的中藥新藥勢在必行。（6）中藥亦有毒性。長期以來，人們普遍認為中藥副作用小，但“是藥三分毒”，很多中藥長期應用有造成肝腎損害等的可能。因為NASH的形成是一個長期的慢性演變過程，所以中藥也不是一朝一夕就可以扭轉病情，但此類治療NASH的中藥長期應用，是否會對人體構成威脅，仍是一個疑問，需要我們進一步繼續開展中藥毒性方面的研究。

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