脈沖式釋藥系統及脂質體的研究進展

高洪燕

黑龍江省醫院藥劑部，黑龍江哈爾濱 150036

脈沖式釋藥系統是根據人體生理節律變化和時辰藥理學的原理而設計的，又稱為定時釋藥系統，主要用于缺血性心臟病、哮喘、關節炎、潰瘍病的預防與治療，目的較多的是用于心血管病的預防和治療，此類患者往往在凌晨時由于體內兒茶酚胺水平增高，因而收縮壓、心率的增高而發生心血管意外，如心肌梗死、心源性猝死，腦卒中等[1]。脂質體按其發展過程一般分為3代，第1代脂質體是用卵磷脂（或豆磷脂）、膽固醇為基本材料制成的脂質體；第2代是隱形脂質體，在材料中另加有PEG-DSPE；第3代為與單克隆抗體連接的免疫脂質體。近幾年由于脂質體制備技術的進步，取得了突破性的進展。現在國外已經批準上市的產品主要有阿霉素脂質體，Doxil目前公認批準用于治療艾滋病相關的卡巴氏瘤，兩性霉素B脂質體，正宗霉素脂質體、硝酸益康唑脂質體。用于肺癌的治療。免疫調劑的脂質體、制霉素脂質體、長春新堿脂質體等。國內僅批準二性霉素脂質體等[2-3]。國內僅批準二性霉素B脂質體進口中，正在研究的也有多種。

1 脈沖式釋藥系統的研究進展

脈沖式釋藥系統是根據人體生理節律變化和時辰藥理學的原理而設計的，主要用于缺血性心臟病、哮喘、關節炎、潰瘍病預防與治療，目前較多的是用于心血管病的預防和治療，此類患者往往在凌晨時由于體內兒茶酚胺水平增高，導致收縮壓、心率的增高而發生心血管意外，如心肌梗死、心源性猝死、腦卒中等。因此如果設計一種脈沖式定時釋藥制劑，在晚上睡前服用，則藥物在凌晨脈沖釋放達到一定的血藥水平并維護一定的時間，則對于這類患者避免在凌晨發生心血管意外將是十分有利的。下面介紹幾類脈沖式釋藥系統。

1.1 滲透泵型定時釋藥系統

此類釋藥系統的釋藥速度一般不受胃腸道的pH、胃蠕動、胃內容物的影響。典型的例子是美國Arza公司開發并已進口的鹽酸異博定，商品名Covera-HS，劑量每片180 mg，體外釋放3 h小于10%，6 h釋放20%～50%，9 h釋放56.5%～85.0%，12 h釋放大于80%，一般5 h開始釋放，可持續10 h，達峰時約為8 h，其制劑處方與一般滲透泵片類似，但在藥層與滲透層種均加入聚氧乙烯，包衣材料除醋酸纖維素外，還應用羥乙基纖維素。也有人利用滲透泵的原理制成脈沖式膠囊劑，選用不溶性的膠囊體及半透明性膠囊帽，在囊體一端裝藥、囊帽一端裝滲透劑，囊身囊間加一不透水的剛性材料（類似活塞），在水性環境中滲透活性物質吸水，按設計要求經一定時間后產生足夠的滲透壓，推動活塞將裝藥的囊體推出，藥物脈沖釋放[4]。

1.2 定時控制爆破釋藥系統

這類系統一般制成兩種劑型，一種先將藥物制成小丸，然后包以膨脹劑或高效崩解劑，常用崩解劑為羧甲基淀粉鈉，交聯羧甲基纖維素、交聯聚乙烯吡咯烷酮，最外層為包衣層，此層的組成與厚度是這類制劑能否達到定時釋放的關鍵，包衣層通常用EudragitRS30D加滑石粉及增塑劑，或用乙基纖維素代替RS30D。也可用EudragitRS30D與適用的乙基纖維素組合而成，最后將小丸加裝入膠囊中應用。其脈沖釋藥原理是在胃腸道內按照設計原理的時間水分透過包衣膜，則膨脹劑迅速膨脹使包衣爆破，藥物脈沖釋放[5-6]。另一種劑型制成片劑，片芯由藥物與膨脹劑組成，包衣層常用的有氫麻油、乙烯-醋酸乙烯共聚物，PEG6000或巴西棕櫚蠟、蜂蠟、HPMC等材料，也可用羥乙基纖維素包衣。脈沖釋藥的原理與小丸是一樣的，決定因素是包衣的組成與厚度。包衣的方法可以用于包衣或用常規包衣法，用于包衣則釋藥速度與壓力有關。

1.3 凝膠塞控制脈沖釋藥系統

首先將藥物裝入不溶性膠囊的囊體中，并在囊體的開口端塞入一個親水凝膠制面的塞子，然后蓋上一可溶性膠囊帽。在胃腸內水環境中，水溶性膠帽溶解，親水凝膠逐漸吸收膨脹，按照設計的時間凝膠塞與囊體脫離，藥物從囊體中脈沖釋放。藥物脈沖釋入時間由凝膠塞的大小與插入囊體的深淺來控制。這種類型的制劑，工藝較為復雜，其適用性有待研究。

2 脂質體的研究進展

脂質體按其發展過程一般分為3代，第1代脂質體；第2代是隱形脂質體，在材料中另加有PEC-DSPE；第3代為與單克隆抗體連接的免疫脂質體。近幾年來由于脂質體制備技術的進步，取得了突破性的進展。現在國外已經批準上市的產品主要有阿霉素脂質體，Doxil目前公批準用治療艾滋病相關的卡巴氏瘤，兩性霉素B脂質體、正宗霉素脂質體、硝酸益康脂質體[7-8]。正在研究可望上市的脂質體有商品名TLC-D99，即阿霉素脂質體，用于肺癌的治療。免疫調劑的脂質體（MTP-PE）、前列腺素EI脂質體、氨基羥丁基卡那霉素脂質體、制霉素脂質體、長春新堿脂質體等[9]。國內僅批準二性霉素B脂質體進口，正在研究的也有很多種，現將脂質體研究中存在問題及解決辦法作一簡單分析。

2.1 脂質的純度與穩定性

卵磷脂極不穩定，易氧化變質，一般都要求精制后在-20℃保存。因此一般主張用氫化大豆磷脂、二硬脂酰酯酰甘油、二硬性脂酰磷脂酰膽堿，膽固醇這類性質較穩定的材料，同時在處方中加入抗氧劑如0.1%生育酚，并通入氮氣加以解決。

2.2 藥物包封率低并易從脂質體中泄漏

例如阿霉素脂質體用常規的制備方法如薄膜分散法、逆相蒸發法、冷凍干燥法及凍融法等，其包封率一般約30%～50%或60%～70%左右[10-11]。現在國外批準的阿霉素脂質體包封率均在90%以上。解決這類藥物如阿霉素、正定霉素的包封率問題主要采用近幾年創立的pH梯度法與硫酸銨梯度法，特別采用硫酸銨梯度法不僅可使包封率達98%以上而且阿霉素在脂質體內部不易泄露，非常穩定，前面介紹的Doxil就是用這種方法制備的，使用這種方法首先要在脂質體內部與介質之間造成一個大的硫酸銨濃度差，由于硫酸銨對脂質體膜穿透系數很小，而阿霉素非質子型特別容易穿透脂質體膜，因而使用阿霉素不斷進入脂質體囊內并生成溶度積很小的硫酸阿霉素而包封于脂質體囊內形成穩定的脂質體。

2.3 藥物穩定性

脂質體粒徑過大，在血液循環中不穩定，易被單核巨噬細胞或肝、脾網狀內皮系統吞噬清除，故血漿半衰期短，不易達到或濃集于非肝、脾系統的靶區。

一般脂質體的粒徑為50 nm ～ 5 μm的范圍內，較大的脂質體1～2 μm更容易被RES清除，清除的機制是由于血液中存在調理素，在靜電力、范備華氏力及疏水的相互作用下，容易被吸附于脂膜的表面，被調理化的脂質體可激發起單核細胞對脂質體的吞噬作用，因而容易被MPS清除[12-13]。解決的方法一方面使脂質體粒徑變小約100 nm左右，通常采用擠壓技術通過0.1～0.2 μm的聚碳酸酯膜及高壓乳勻機制備，同時制備隱形脂質體或長循環脂質體，一般加PEG-DSPE，與氫化大豆磷脂及膽固醇等材料制成脂質體。這樣由于PEG在脂質體囊膜上形成一層屏障，因而脂質體不易吸收調理素，故不易被MPS清除，達到長循環的目的，藥物更易達到靶區。Doxil就是一種隱形脂質體，實驗表明[11]體內清除變慢，清除率由43.3 L/H變為0.08 L/H，半衰期為52 h。AIDS病相關的Kaposis瘤患者接受阿霉素隱形脂質體治療48 h與96 h后顯示在Kaposis肉瘤病變區的藥物濃度比正常皮膚大19倍，故使療效提高。

2.4 靶向性問題

隱形脂質體雖然對提高靶向與藥物療效有一定作用，但仍然受到限制，故研制免疫型脂質體，即將單抗與脂質體結合制合制備第3代脂質體，受到國內學者的關注，已有不少這方面的研究報道[14]。

[1] 項琪，姚崇舜，肖健，等.生物技術藥物給藥系統的研究進展[J].藥物生物技術，2006，13（2）：58-60.

[2] 施靖，王紅芳.脂質體作為藥物載體的研究[J].中國醫藥導報，2008，5（11）：19-21.

[3] 劉成圣，顏景泉，黨奇峰，等.包覆脂質體作為藥物載體的研究進展[J].中國醫藥導報，2009，6（4）：25-27.

[4] 郭濤.介紹幾種定時釋藥系統研究近況[J].中國藥師，1999，2（5）：25-27.

[5] Ishino R,Yoshino H,Hirakawa Y,et al. Design and preparation of pulsatile release tablet as a new oral drug delivery system[J].Chem Pharm Bull，1992，40（3）：3036.

[6] Conte U,Colombo P,La Manna A,et al.A new ibuprofen pulsed release oral dosage form[J].Drug Development and Industral Pharmacy,1989,15（4）：2583.

[7] 陳軍.抗腫瘤熱敏靶向脂質體的研究進展[J].藥學學報，2011，5（5）：502-506.

[8] Chen Q,Krol A,Wright A,et al.Tumor microvascular permeability is a key determinant for antivascular effects of doxorubicin encapsulated in a temperature sensitive liposome [J].Int J Hypertherma，2008，24（5）：475-482.

[9] Babincova M,Altanerova V,Lampert M,et al.Site-specific in vivo targeting of magnetoliposomes using externally applied magnetic field [J].Z Naturforsch，2000，55（3-4）：278.

[11] 黃園，段逸松.硫酸銨梯度法制備米托蒽醌脂質體[J].中國藥學雜志，2002，12（ 5）：917.

[12] 劉陶世，蔡寶昌，趙新慧，等.硫酸銨梯度法結合微濾擠出制備馬錢子堿脂質體的研究 [J].中成藥，2005，11（3）：1247.

[13] 鄭慶忠，劉利軍. pH梯度法制備氧化苦參堿脂質體[J].中國醫藥工業雜志，2006，37（3）：679.

[14] Hwang SH,Maitani Y.Remote loading of diclofenac,insulin and fluorescein isothiocyanate labeled insulin into liposomes by pH and acetate gradient methods[J].Int J Pharm,1999,179（5）：85.