溫毒清浸膏對肉雞免疫功能的影響

湯法銀，吳玉臣，郭 爽

（1.鄭州牧業工程高等專科學校藥物工程系，河南 鄭州 450011；

2.河南農業大學牧醫工程學院，河南 鄭州 450002）

隨著社會的發展和人們生活水平的提高，越來越多的人關注食品衛生與安全。這也要求畜牧業在發展的過程中，對疾病的預防和治療必須少加或不加抗生素，以減少其殘留對人的危害。許多學者認為中藥可以提高機體的抵抗力，抵抗多種細菌和病毒的攻擊。溫毒清浸膏是以2005年版《中國獸藥典》收載溫毒清散為基礎，進行加減化裁，并經過現代浸提技術、濃縮技術和膏劑成型技術制成的用于飲水的浸膏劑，主要成分由黃芩、金銀花、連翹、黃連、梔子、黃芪、板藍根、赤芍、甘草、石膏、知母、杏仁等12味中藥組成，具有清熱解毒、瀉火除煩、涼血止痢、扶正祛邪之功效，為進一步驗證其功效，筆者考察了其對艾維茵肉雞免疫功能的影響，為該制劑臨床應用提供依據。

1 材料與方法

1.1 溫毒清浸膏制備 溫毒清浸膏由本校藥物工程系中獸醫藥實驗室研制，每1毫升相當于原藥材3 g。

1.2 試驗動物與分組 選1日齡艾維茵肉雞400羽，由河南農業大學種雞場提供。將試驗雞隨機分為四組，每組25羽，試驗組3組，對照組1組，每組設4個重復。

1.3 試驗動物的處理 試驗肉雞的飼養按正常標準進行飼喂，自由飲水。試驗組肉雞的飲水中分別加入3個不同劑量的溫毒清浸膏，分別為高劑量組（1 500 g／t），中劑量組（1 000 g／t），低劑量組（500 g／t）；對照組正常飲水。各組在7日齡接種新城疫疫苗（購自中牧實業股份有限公司），14日齡第2次免疫。各組在10、20、30 d和40 d每組選5羽試驗雞無菌采血后稱重宰殺，取其腔上囊、脾臟 、胸腺分別稱重。

1.4 測定指標

1.4.1 免疫器官指數測定 取1、10、20、30 d和40 d宰殺后的試驗雞腔上囊、脾臟 、胸腺，用濾紙吸干血液后稱重，并計算其免疫器官指數。免疫器官指數（g／kg）＝器官重量／體重。

1.4.2 淋巴細胞轉化率測定 刀豆蛋白（ConA）與MTT，均購自Sigma公司；RP1640培養基，購自Invitrogen公司。采用 MTT法檢測淋巴細胞轉化率［1］。1.4.3 血清中抗體水平測定 采用半微量血凝抑制試驗法（HI）［2］，HI抗體效價以 Log2X 表示。

2 試驗結果

2.1 免疫器官指數測定結果

2.1.1 對試驗雞腔上囊指數的影響 溫毒清浸膏對腔上囊指數的影響見表1。

表1 溫毒清浸膏對腔上囊指數的影響 （g／kg）

從表1可以看出，10 d試驗雞腔上囊指數對照組顯著低于各試驗組（P＜0.05），各試驗組間差異不顯著（P＞0.05）；20 d試驗雞腔上囊指數對照組顯著低于低劑量組和中劑量組（P＜0.05），極顯著低于高劑量組（P＜0.01），低劑量組和中劑量組差

異不顯著（P＞0.05），但低劑量組和中劑量組顯著低于高劑量組（P＜0.05）；30 d和40 d試驗雞腔上囊指數，對照組極顯著低于各試驗組（P＜0.01），各試驗組間差異不顯著（P＞0.05）。

2.1.2 溫毒清浸膏對試驗雞胸腺指數的影響 見表2。

表2 溫毒清浸膏對胸腺指數的影響 （g／kg）

從表2可以看出，10 d試驗雞胸腺指數對照組顯著低于各試驗組（P＜0.05），各試驗組間差異不顯著（P＞0.05）；20、30、40 d試驗雞胸腺指數對照組極顯著低于各試驗組（P＜0.01），各試驗組間差異不顯著（P＞0.05）。

2.1.3 溫毒清浸膏對試驗雞脾臟指數的影響 見表3。

表3 溫毒清浸膏對脾臟指數的影響 （g／kg）

從表3可以看出10、20、30、40 d試驗雞胸腺指數對照組均極顯著低于各試驗組（P＜0.01），各試驗組間差異均不顯著（P＞0.05）。

2.2 淋巴細胞轉化率測定結果 見表4。

表4 溫毒清浸膏對試驗雞淋巴細胞轉化率的影響 （%）

由表4可以看出，10 d和20 d試驗肉雞其淋巴細胞轉化率對照組極顯著低于各試驗組（P＜0.01），低劑量組顯著低于中劑量組和高劑量組（P＜0.05），中劑量組和高劑量組間差異不顯著（P＞0.05）；30 d試驗肉雞其淋巴細胞轉化率對照組顯著低于低劑量組（P＜0.05），極顯著低于中劑量組和高劑量組（P＜0.01），中劑量組和高劑量組間差異不顯著（P＞0.05）；40 d試驗肉雞其淋巴細胞轉化率對照組顯著低于低劑量組（P＜0.05），極顯著低于中劑量組和高劑量組（P＜0.01），各試驗組間差異顯著（P＜0.05）。

2.3 血清中抗體水平檢測 經半微量血凝抑制試驗檢測血清中ND的抗體效價，其結果見表5。

表5 溫毒清浸膏對血清中ND的抗體效價的影響

由表5可以看出，試驗雞10 d時，各組間抗體效價無明顯差異（P＞0.05）；20、30、40 d時對照組與試驗組間差異極顯著（P＜0.01），各試驗組間差異不顯著（P＞0.05）。

3 分析與討論

3.1 溫毒清浸膏對免疫器官指數的影響 胸腺是禽類細胞免疫的中樞器官，是T細胞分化發育的主要場所。若切除新生動物的胸腺，該動物則缺乏T細胞，免疫功能將明顯降低。腔上囊是禽類特有的體液免疫中樞器官，是B細胞分化發育的主要場所。胚胎后期或剛孵化的雛禽切除腔上囊后，相應的免疫功能降低或消失，細胞 （分泌抗體）減少或消失，抗原刺激后不能產生特異性抗體，體液免疫受到抑制。脾臟是禽類最大的外周免疫器官，家禽的脾臟體積較小，主要參與體液免疫和細胞免疫。因此，免疫器官的發育情況與機體免疫功能的強弱有著密切的聯系。目前常用胸腺 、脾臟 、腔上囊指數來反映機體免疫功能的狀態。

此次試驗結果表明，飲用溫毒清浸膏10 d、20 d可顯著或極顯著提高其免疫器官指數，飲用溫毒清浸膏30 d、40 d后可極顯著提高其免疫器官指數。葉小芳等（2008）研究證明，口服中藥復方多糖及其均一組分、黃芪多糖250 mg／kg可顯著提高肉雛雞免疫器官指數［3］，與本試驗一致。吳玉臣（2008）等曾用黃芪等中藥方以小鼠為試驗動物進行試驗，發現此配方對小鼠的免疫器官指數無明顯影響［4］。這可能是由于試驗動物不同所致。

3.2 溫毒清浸膏對試驗肉雞淋巴細胞轉化率的影響 本研究表明，低劑量組可顯著或極顯著提高10、20、30、40 d淋巴細胞轉化率，中劑量組和高劑量組可極顯著提高各日齡淋巴細胞轉化率。司昌德等（2008）在飼料中添加0.1%和0.3%黃芪多糖，結果表明，溫毒清浸膏能顯著提高血清淋巴細胞轉化率［5］，與本試驗一致。馬得瑩等（2005）研究表明，女貞子、五味子、四君子湯和六味地黃丸均可顯著提高雛雞脾淋巴細胞轉化率［1］。

3.3 溫毒清浸膏對血清中抗體水平的影響 本試驗證明，飲用各劑量組溫毒清浸膏后可極顯著提高機體注射ND疫苗一段時間后的抗體水平。司昌德等（2008）研究表明，黃芪多糖可顯著提高肉仔雞血清抗ND抗體水平［5］，與本報道一致。

4 結語

溫毒清浸膏可顯著提高肉仔雞免疫器官指數，提高其細胞免疫功能和體液免疫功能。中劑量（1 000 g／t）為最適合添加量。

［1］馬得瑩，單安山，李群道，等.中草藥對蛋雛雞生長性能和免疫功能的影響［J］.中國獸醫學報，2005，25（1）：67-70.

［2］陰天榜.家禽免疫學［M］.北京：中國農業科技出版社，1999：260-269.

［3］葉小芳，谷新利，劉剛，等.中藥復方多糖及其均一組分對雛雞免疫功能影響的研究［J］.中國獸醫雜志，2008，44（12）：70-73.

［4］吳玉臣，郭爽，唐光武，等.自擬中藥復方對小白鼠免疫功能的影響研究［J］.中國畜牧獸醫，2008，35（1）：108-110.

［5］司昌德，閔亞宏.黃芪多糖對肉仔雞免疫功能的影響［J］.中國預防獸醫學報，2008，30（12）：978-980.