鴿Ⅰ型副黏病毒滅活疫苗的免疫抗體監(jiān)測與分析

仇微紅，葉賀佳，李 敏，孫招金，王 鑫，羅開健，2

（1.廣州市華南農(nóng)大生物藥品有限公司，廣東 廣州 511300；2.華南農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院，廣東 廣州 510642）

鴿Ⅰ型副黏病毒（PPMV-Ⅰ）病又稱鴿瘟或鴿新城疫，是一種由禽Ⅰ型副黏病毒引起的、流行于鴿群的高度接觸性急性傳染病，它以腸炎、嚴(yán)重腹瀉和神經(jīng)癥狀為特征，是危害養(yǎng)鴿業(yè)的主要疫病之一。鴿Ⅰ型副黏病毒病目前在各種鴿群（肉鴿、信鴿和賽鴿）中普遍存在，臨床發(fā)病多見于3月齡以下的鴿，乳鴿的敏感性最高，發(fā)病后的死亡率較高，可達(dá)50%～80% 以 上［1］，嚴(yán) 重 的 可 高 達(dá) 95% 以 上［1－3］。該病可通過空氣中的塵埃、污染的器具、飼料和飲水傳播；飼養(yǎng)密度大、空氣不流暢、受冷刺激會加劇本病的發(fā)生。隨著養(yǎng)鴿業(yè)的迅猛發(fā)展和環(huán)境污染的加重，本病常并發(fā)或繼發(fā)沙門菌病、大腸桿菌病、毛滴蟲病、念珠菌病等疫病，以致病情變得復(fù)雜和嚴(yán)重，鴿群死亡率升高。該病已經(jīng)成為養(yǎng)鴿業(yè)的一種最主要的疾病，但對本病迄今尚無特異性的有效治療藥物，所以關(guān)鍵在于預(yù)防。目前還沒有一種專門用于防治鴿瘟的專屬疫苗，盡管鴿Ⅰ型副黏病毒與雞的新城疫病毒為同一屬，但用雞新城疫疫苗免疫鴿群后保護(hù)效果并不理想［4］。有研究報道，有些鴿場曾用雞NDV活疫苗，如Ⅰ系苗、Ⅱ系苗（B1）和LaSota（Ⅳ系）等免疫鴿群，未能獲得滿意的效果，對預(yù)防鴿Ⅰ型副黏病毒感染只有低水平保護(hù)力（有報道說僅有20%保護(hù)率，而且免疫期短）。因此，分離出免疫原性良好的毒株，研制出具有較好免疫保護(hù)效果的鴿Ⅰ型副黏病毒滅活疫苗是研制的關(guān)鍵。

1 材料與方法

1.1 材料 30日齡左右非免疫的潮蓮白黃鴿，購自廣東省江門市翔勝鴿場。鴿瘟油乳劑滅活疫苗，由廣州市華南農(nóng)大生物藥品有限公司制備及提供；雞新城疫活疫苗（La Sota株），購自廣東永順生物制藥有限公司（生產(chǎn)批號：20090901）。鴿瘟滅活抗原，由廣州市華南農(nóng)大生物藥品有限公司制備及提供。1.2 試驗方法

1.2.1 鴿Ⅰ型副黏病毒滅活疫苗免疫效力試驗

將450只30日齡左右潮蓮白黃鴿隨機(jī)分成A、B、C、D、E、F、G、H、I共9組，50只／組，其中 A-D組為雞新城疫活疫苗（La Sota株）＋鴿Ⅰ型副黏病毒滅活疫苗免疫組，E-H組為鴿Ⅰ型副黏病毒滅活疫苗免疫組，Ⅰ組不免疫作為空白對照。La Sota活疫苗的免疫劑量為翼下肌肉注射1羽份／只，免疫后7 d胸肌接種鴿Ⅰ型副黏病毒滅活疫苗。具體免疫程序見表1。免疫后定期每周隨機(jī)抽取20只免疫鴿采集血液分離血清，使用鴿瘟滅活抗原進(jìn)行HI抗體檢測，觀察到第8周。

表1 鴿Ⅰ型副黏病毒滅活疫苗具體免疫程序

1.2.2 鴿Ⅰ型副黏病毒滅活疫苗免疫持續(xù)期試驗

在鴿Ⅰ型副黏病毒滅活疫苗免疫效力試驗的基礎(chǔ)上，對鴿Ⅰ型副黏病毒滅活疫苗免疫效力試驗的A、B組繼續(xù)進(jìn)行抗體跟蹤，一直觀察到第20周，即于免疫后0、1、2、3、4、5、6、7、8、10、12、14、18、20周，隨機(jī)抽取20只免疫鴿采集血液分離血清，使用鴿瘟滅活抗原進(jìn)行HI抗體檢測。

圖1 鴿Ⅰ型副黏病毒滅活疫苗抗體產(chǎn)生的情況

2 結(jié)果

2.1 鴿Ⅰ型副黏病毒滅活疫苗免疫效力試驗結(jié)果見圖1和表2。

由表2、圖1結(jié)果表明，A、C組（雞新城疫La－Sota株活疫苗＋鴿Ⅰ型副黏病毒滅活油苗免疫）油苗一免后5～6周達(dá)到抗體高峰，B、D組油苗二免后4～5周再次達(dá)到抗體高峰。E-G組不做弱毒苗免疫，僅用滅活油苗免疫一次，其HI抗體免疫后也于5～6周達(dá)到抗體高峰。先用雞新城疫La Sota株活疫苗做基礎(chǔ)免疫后再用油苗接種，其HI抗體效價明顯高于僅接種油苗組。另外，HI抗體效價也于油苗的接種劑量有關(guān)，接種0.5 m L／只要略高于0.25 m L／只。

2.2 鴿Ⅰ型副黏病毒滅活疫苗免疫持續(xù)期試驗結(jié)果 結(jié)果表明，若以HI抗體平均效價為5log2作為免疫保護(hù)值，在弱毒活疫苗免疫后1周，疫苗以0.25 m L／只進(jìn)行1次免疫，免疫持續(xù)期為2個月；疫苗以0.25 m L／只進(jìn)行1次免疫，免疫后3周以同樣劑量重復(fù)免疫1次，免疫持續(xù)期為18周，詳見表3和圖2。

表2 鴿Ⅰ型副黏病毒滅活疫苗免疫效力試驗結(jié)果 （log2）

表3 鴿Ⅰ型副黏病毒滅活疫苗免疫持續(xù)期試驗結(jié)果 （log2）

3 討論與小結(jié)

從我們完成的鴿Ⅰ型副黏病毒滅活疫苗免疫效力試驗可知，總體來說作1羽份雞新城疫（La Sota株）活疫苗基礎(chǔ)免疫比未作基礎(chǔ)免疫的抗體產(chǎn)生高，而且從節(jié)省成本角度來考慮，鴿Ⅰ型副黏病毒滅活疫苗0.25 m L／只的免疫劑量比較適合。因此免疫程序是先做1羽份雞新城疫（La Sota株）活疫苗基礎(chǔ)免疫，1周后進(jìn)行鴿Ⅰ型副黏病毒滅活疫苗免疫0.25 m L／只，油苗免疫后3～4周以同樣方式、同樣劑量的進(jìn)行重復(fù)免疫，那么疫苗的保護(hù)期為18周。

圖2 鴿Ⅰ型副黏病毒滅活疫苗抗體持續(xù)情況

［1］Kaleta E F，Alexander D J，Russell P H.The first isolation of the PPMV-I virus responsible for the current panzootic in pigeons［J］.Avian poulty，1985，14：553-557.

［2］陳昌海，程雷.鴿新城疫研究概況［J］.中國獸醫(yī)雜志，1998，24（11）：53-54.

［3］許如蘇.鴿Ⅰ型副黏病毒的研究［J］.華南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報：自然科學(xué)版，1988，9（3）：37-45.

［4］張淑霞，楊增歧，趙余放，等.鴿禽I型副黏病毒油佐劑滅活苗對肉種鴿免疫效果觀察［J］.中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報，1999，21（3）：163-165.