中西藥聯合對人工誘發雞霍亂的防治效果

馬 驛，陳均玉，陳欽旭，陳秀眉，彭金菊，李 健，馮寶順，盧國棟

（廣東海洋大學動物醫學系，廣東 湛江 524088）

禽霍亂又稱禽巴氏桿菌病（Pasteurellosis）、禽出血性敗血癥，是由多殺性巴氏桿菌（Pasteurella multocida）引起的禽類的接觸性傳染病。該病在大多數國家都有分布，強毒株能使不同年齡的雞感染，發病率高達100%，死亡率達60%以上，是需重點防制的家禽疫病之一［1－3］。目前，治療細菌性疾病的最常用藥物是抗生素和合成抗菌藥，但具有產生耐藥性、導致藥物殘留等缺點。我國傳統中藥除可克服前述缺點外，還可增強動物免疫力，因此，使用中藥或中藥的有效活性成分，以取代部分高殘留藥物的研究尤為重要［4－6］。長期的臨床實踐及藥理研究表明，中西藥物科學合理的配伍應用能提高療效，降低藥物毒副作用，但中藥的化學成分和藥理作用十分復雜，中西藥聯合使用不當，會降低療效，增加副作用或引起藥源性疾病，嚴重的甚至危及動物生命，需要通過實驗觀察中西藥聯合用藥是否有效。本試驗選取體外抑菌效果較好的五倍子、恩諾沙星，以及五倍子與恩諾沙星組成的復方，通過給人工感染多殺性巴氏桿菌的雞飼喂含藥飼料后，觀察藥物對其防治效果，為采用中西藥結合防治畜禽疾病提供理論依據和參考。

1 材料與方法

1.1 材料 中藥材五倍子，購自湛江市藥材市場。恩諾沙星，含量98.5%，批號：110131291，浙江國邦藥業有限公司。禽巴氏桿菌（C48-3）標準菌株，由中國獸醫藥品監察所提供。40日齡雞公母各半，體重0.8～1.1 kg，試驗前在籠中飼養7 d。

1.2 方法

1.2.1 試驗分組 試驗設陰性對照組、陽性感染對照組、不同藥物試驗組，每組24羽雞。Ⅰ組為不感染細菌陰性對照組；Ⅱ組為感染細菌陽性對照組；Ⅲ組為中藥組，飼料中添加五倍子，按雞的體重計算，預防組和治療組的每天用藥量均3.125 g／kg（筆者經測定得知：五倍子對多殺性巴氏桿菌的MIC為3.125 mg／m L［7］）；Ⅳ組為西藥組，飼料中添加恩諾沙星，按雞的體重計算，預防組和治療組的每天用藥量分別為5 mg／kg、10 mg／kg（恩諾沙星用量參照陳杖榴編獸醫藥理學［8］）；Ⅴ組為中西藥結合組，飼料中添加五倍子和恩諾沙星，預防組的每天用藥量按體重計算，為五倍子3.125 g／kg、恩諾沙星5 mg／kg，治療組的每天用藥量為五倍子3.125 g／kg、恩諾沙星10 mg／kg。

1.2.2 飼料配制及投喂方法 將五倍子加工成粉末狀，粉末加水煮沸30 min后，將藥渣藥水與飼料混合拌勻，恩諾沙星藥粉與飼料混合拌勻。

1.2.3 多殺性巴氏桿菌菌液的制備及人工感染試驗 將多殺性巴氏桿菌接種于1%豬血清營養肉湯中，37℃恒溫培養8～12 h，采用平板計數法計數，用肉湯稀釋至所需濃度。通過預試驗篩選能引起雞死亡的多殺性巴氏桿菌的數量，每羽皮下注射濃度為104CFU／m L的細菌混懸液0.1 m L，陰性對照組每羽皮下注射生理鹽水0.1 m L。治療試驗：攻毒當天投喂添加藥物的飼料，連續給藥5 d，停藥后觀察10 d；預防試驗：連續投喂添加藥物的飼料5 d后注射細菌，自攻毒之日開始連續觀察10 d。統計各組死亡雞數量，按常規檢驗方法剖檢死雞，分離體液及組織中細菌鏡檢，確定死亡原因。

1.2.4 防治效果評價 用保護率進行評價，保護率（%）＝（陽性感染對照組的死亡數一藥物試驗組死亡數）／陽性感染對照組的死亡數×100。

2 結果

2.1 病死雞的剖檢結果及細菌形態特征 雞攻毒后食欲減退，精神沉郁，兩翅下垂，羽毛松亂。呼吸困難，口鼻有黏液性、漿液性分泌物流出。體溫升高，雞冠、肉髯暗紅色或青紫色，排灰白或黃綠色稀糞。攻毒20 h后開始出現死亡，第2天至第5天死亡數較多，第8天后未見死亡。剖檢病死雞可見鼻腔內有黏液，皮下組織、腹腔脂肪、腸系膜有大小不等的出血點，胸腔、腹腔和氣囊有纖維素性灰白色滲出物，腸黏膜充血，有出血性病灶，十二指腸最嚴重。心外膜上有很多出血點，心包內有淡黃色液體，并混有纖維素。肺充血、水腫，脾臟腫大，肝臟腫大、質變脆，表面布滿針尖大小的白色壞死點。分離體液及組織中細菌進行培養鑒定，在鮮血培養基上生長良好，長成淡灰白色、閃光的露珠狀小菌落，且無溶血現象。鏡檢為革蘭陰性、兩端鈍圓、兩極濃染，以單個和成雙排列為主的球桿狀或短桿狀細菌，與試驗前感染的多殺性巴氏桿菌的形態特征相同。

2.2 不同藥物對雞巴氏桿菌病的治療效果 治療試驗結果見表1，攻毒后陽性對照組雞死亡18羽，存活率僅為25%。投喂藥物組的雞死亡率與陽性對照組比較有所降低；五倍子、恩諾沙星，以及五倍子與恩諾沙星聯合對雞的保護率分別為0%、33.33%和11.11%，恩諾沙星組的保護率最高，對雞巴氏桿菌病有一定的治療效果。

表1 不同藥物對雞巴氏桿菌病的治療效果

2.3 不同藥物對雞巴氏桿菌病的預防效果 預防試驗結果見表2，攻毒后陽性對照組雞死亡20羽，存活率僅為16.67%。投喂藥物組的雞死亡率與陽性對照組比較均降低，其中恩諾沙星組差異顯著（P＜0.05），投喂藥物組的存活率均高于陽性對照組，五倍子、恩諾沙星，以及五倍子與恩諾沙星聯合對雞的的保護率分別為40%、70%和40%，恩諾沙星組的保護率最高，對雞巴氏桿菌病的預防效果較好。

表2 不同藥物對雞巴氏桿菌病的預防效果

3 討論

3.1 中西藥結合對雞巴氏桿菌病的防治效果 通過試驗表明，五倍子的體外抑菌效果較好，對多殺性巴氏桿菌的 MIC為3.125 mg／m L，恩諾沙星對巴氏桿菌的MIC為1μg／m L，中西藥聯合對巴氏桿菌的體外抑制增強，五倍子與恩諾沙星聯合的MIC為0.391 mg／m L （0.25μg／m L），即五倍子用量為單藥的1／8，恩諾沙星用量為單藥的1／4便能抑制巴氏桿菌［7］。將五倍子按照3.125 g／kg·d拌料給雞飼喂后，對雞巴氏桿菌病治療和預防的保護率分別為0%和40%；恩諾沙星對雞巴氏桿菌病的治療及預防效果較好，保護率分別為33.33%和70%；五倍子與恩諾沙星聯合對雞巴氏桿菌病的治療及預防效果不理想，保護率分別為11.11%和40%。盡管中西藥聯合體外抑菌效果顯著，對動物疾病的防治效果不一定明顯，這可能與人工感染多殺性巴氏桿菌的雞發病過快，不及充分發揮藥物的作用有一定關系。中藥、中藥復方，以及中西藥聯合的藥用效果是不能僅僅以藥物的MIC和MBC來進行評價，中藥的MIC和MBC測定結果對指導臨床用藥劑量有一定的參考價值，但體外抗菌試驗只能說明所試中藥與細菌直接接觸所產生的影響，而對被細菌感染患病的動物的治療效果，還須進行動物體內試驗才能證實。另外，天然中藥對動物還具有一定的營養和整體調節作用，以及中藥對動物機體免疫機能的影響等，都是評價中藥防治效果的重要指標［9］。

3.2 中西藥結合在畜禽疾病防治中的作用 抗菌藥對于多種細菌傳染性疾病有良好的療效，收效快、作用強、使用方便，對危急病癥更顯優越性，但抗菌藥具有毒副作用，易繼發雙重感染，使細菌產生耐藥性或造成藥物殘留危害人體健康。西藥注重袪除病邪，消除病因；中藥強調整體，重在提高機體的抗病能力，調整、平衡機體的各種功能，應用安全可靠，中西藥相互取長補短，提高臨床療效，其效果已得到普遍認可［5－6，10］。中西藥聯合對禽巴氏桿菌病的治療和預防效果較好，周勇用氯霉素與自擬“清瘟散”、“蒼苓散”結合，對鵝巴氏桿菌病療效顯著［2］。裴立峰采用雙氟沙星、氧氟沙星和增效磺胺等口服，或注射鏈霉素等，結合使用中藥復方，對禽霍亂的治愈率達91.5%［3］。由黃連、黃柏等中藥和鹽酸環丙沙星組成的中西藥復方制劑（炎瘟清片），對肉鴿巴氏桿菌病的治愈率達到96.6%［11］。這充分證明中西藥聯合標本兼治的優越性，體現了中醫所說“藥有個性之特長，方有合群之妙用”的精妙之處。但無論是單味藥還是聯合用藥，其抑菌的具體成分、作用方式和機理如何，仍需要今后作進一步的深入研究。

［1］曾振靈，劉建新，陳杖榴，等.三種獸用氟喹諾酮類藥物對人工誘發雞霍亂的療效比較［J］.華南農業大學學報，2000，21（2）：82-84.

［2］周勇.中西藥結合治療鵝巴氏桿菌病［J］.中獸醫醫藥雜志，2006，25（4）：43-44.

［3］裴立峰.中西醫結合治療禽霍亂［J］.養殖技術顧問，2010，4：70.

［4］曾春蘭，鐘振國.中藥抗菌作用的研究進展［J］.廣西中醫學院學報，2006，9（1）：51-53.

［5］方俊，盧向陽，邱業先，等.中草藥飼料添加劑的研究進展、制約因素及對策［J］.中國畜牧獸醫，2004，31（9）：6-8.

［6］溫偉，呂金良，高振偉，等.淺談現代中獸藥的發展前景［J］.四川畜牧獸醫，2009，12：10-12.

［7］馬驛，陳欽旭，陳秀眉，等.鵝巴氏桿菌病病原分離鑒定及中西藥聯合抑菌試驗［J］.中獸醫醫藥雜志，2011，30（2）：46-48.

［8］陳杖榴.獸醫藥理學［M］.3版.北京：中國農業出版社，2009.

［9］周邦靖.常用中藥的抗菌作用及其測定方法［M］.重慶：教學技術文獻出版社重慶分社，1987.

［10］逯春玲，張書超.談中西藥聯用的作用機制［J］.中國醫藥導報，2010，7（12）：192-193.

［11］李軍成，路彩霞，馮國庭.炎瘟清對肉鴿巴氏桿菌病的治療［J］.科技信息：學術版，2008，36：386.