HPLC測定銀葉桂中桂皮醛的含量

陳 浩 茍滿枝 劉 航 徐 健

1.樂山市食品藥品檢驗所，四川 樂山 614000;2.宜賓市食品藥品檢驗所，四川 宜賓 644000

樟科樟屬植物銀葉桂Cinnamomum mairei Levl.分布于我國云南東北部、四川西部等地。為《四川省中藥材標準》2010年版所載“官桂”來源，藥用部位干燥樹皮。有散寒止痛之功。本文根據文獻報道及藥效學研究結果，采用高效液相色譜法對銀葉桂中含有的桂皮醛進行了含量測定研究，為進一步建立官桂藥材質量標準提供依據。

1 儀器與試藥

美國Agilent1100液相色譜儀;桂皮醛對照品為中國藥品生物制品檢定所提供 (批號110710－201016，98.6%，含量測定用);銀葉桂樣品分別采自宜賓市宜賓縣、屏山縣、長寧縣，購自樂山市中藥材公司、樂山市龍馬藥業、成都中藥材市場;乙腈為色譜純，水為重蒸餾水，其它試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 色譜條件 色譜柱Diamonsil C18(250×4.6mm)5μm;流動相乙腈－水 (35∶65)，檢測波長為290nm，柱溫為35℃，流速為1.0ml/min。對照品及樣品的HPLC圖見圖1。

2.2 供試品溶液的制備 取樣品粉末 (過三號篩)約0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，稱定重量，超聲處理 (功率350W，頻率35kHz)10分鐘，放置過夜，同法超聲處理一次，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得。

2.3 線性范圍的考察 精密稱取桂皮醛對照品 (含量98.6%)48.11mg，置50ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，再精密量取10ml置100ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液;精密量取貯備液1.0、2.0、5.0、10.0、50.0ml，置100ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。精密吸取上述對照品溶液及貯備液各10μl，注入高效液相色譜儀分別進行測定。以進樣量 (μg)為橫坐標，峰面積為縱坐標，繪制標準曲線，其回歸方程為Y=11794x+22.813，r=0.9999，結果表明桂皮醛在0.009487～0.9487μg與峰面積線性關系良好。

2.4 精密度試驗 精密量吸取桂皮醛對照品溶液10μl，連續進樣5次，結果桂皮醛峰面積的RSD為0.21%。

2.5 穩定性試驗 精密量吸取供試品溶液10μl，分別于0，4，8，12，24h按上述色譜條件進樣測定，計算RSD為0.52%。結果表明供試品溶液中桂皮醛在24h內穩定。

2.6 重復性試驗 精密稱取銀葉桂藥材同批號樣品 (宜賓長寧)6份，每份約0.5g，按前述供試品制備方法及色譜條件進行桂皮醛含量測定，測得桂皮醛平均含量 (按干燥品計算)為0.38%，RSD為1.52%。

2.7 回收率試驗 精密吸取濃度為0.9487mg/ml的對照品溶液1.0ml，共6份，分別置50ml錐形瓶中。取已知含量的樣品 (宜賓長寧，HPLC法測定含量為0.38%)6份，每份約0.25g，精密稱定，置上述錐形瓶中，按擬定方法進行供試品溶液制備和桂皮醛含量測定 (按干燥品計算)，結果見表1。

以上試驗結果表明，該方法準確度良好。

2.8 樣品測定

按正文含量測定方法測定6批樣品中桂皮醛含量，結果見表2。

表1 回收率測定結果

表2 樣品的含量測定結果

3 討論

3.1 色譜條件的選擇

3.1.1 測定波長的選擇 采用甲醇作溶劑制備桂皮醛對照品溶液，在200～500nm波長下掃描其光譜圖，結果在290nm波長處有最大吸收，故測定波長選定為290nm。

3.1.2 流動相的選擇 采用流動相乙腈－水 (35:65)對本品供試品溶液進行系統適用性考察，結果在該流動相下，本品桂皮醛峰形對稱，理論板數6000，分離度符合要求。因此選定流動相乙腈－水 (35:65)作為測定流動相。

3.2 提取方法及時間的考察

取本品粉末0.5g，3份為一組，精密稱定，置錐形瓶中，每組分別精密加入甲醇25ml、乙醇25ml，稱定重量，分別采用:1、超聲處理10min，再稱定重量，用所加溶劑補足減失的重量，搖勻，濾過，即得;2、超聲處理10min，放置過夜，同法超聲處理一次，再稱定重量，用所加溶劑補足減失的重量，搖勻，濾過，即得。進樣量10μl，按上述選定的色譜條件實驗，結果表明:采用甲醇超聲處理10min，靜置過夜再超聲處理10min優于其它方法。因此選定本文提取方法。

3.3 本實驗建立的銀葉桂藥材中測定桂皮醛的高效液相色譜法，具操作性、穩定性及代表性。測定了銀葉桂多批次藥材中桂皮醛含量，為官桂藥材質量控制提供了依據。

［1］國家藥典委員會.中國藥典［S］.一部.北京:中國醫藥科技出版社，2010.

［2］中國科學院中國植物志編輯委員會.中國植物志［M］.北京:科學出版社，1983.

［3］肖培根.新編中藥志［M］.北京:化學工業出版社，2002.