川芎、當歸炮制前后揮發性成分分析

劉鳳臣，蔡廣知，楊建龍，張彥飛，貢濟宇

(長春中醫藥大學藥學院，吉林 長春 130117)

當歸和川芎的化學成分主要為揮發油，具有平喘、解痙等作用[1-2]，對痛經、哮喘、抗免疫、心肌缺血、腦缺血、哮喘持續狀態、發熱等有明顯療效[3-7]。2味藥在臨床應用時主要是其飲片的炮制品，超臨界CO2萃取技術萃取溫度低，可大量保存對熱不穩定成分及易氧化的揮發性成分[8]，為了解飲片炮制之后揮發油的變化,本實驗采用超臨界CO2萃取技術萃取揮發油，采用GC-MS計算機聯用技術對其成分變化進行研究。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗材料與試劑 當歸和川芎藥材(購于吉林大藥房)，石油醚、乙醇、黃酒、蒸餾水。

1.1.2 主要設備 超臨界萃取儀Spe-ed SFE-Ⅱ(Applied Separations Inc.)，電子天平(梅特勒-托利多儀器有限公司)，科偉牌高速萬能粉碎機(北京科偉永興儀器有限公司)，熱恒溫鼓風干燥箱DHG-9070A型(上海精宏實驗設備有限公司)，QP-2010型GC-MS聯用儀(日本島津公司)。

1.2 試驗方法

1.2.1 藥材炮制 酒炙當歸：取當歸片，加入定量黃酒拌勻，稍悶潤，待酒被吸盡后，文火炒至深黃色，取出放涼(100 kg，用黃酒10 kg)。

酒炙川芎：川芎片，加入定量黃酒拌勻，稍悶潤，待酒被吸盡后，置炒制容器內，用文火加熱，炒至棕黃色時，取出晾涼。篩去碎屑(100 kg用黃酒10 kg)。

1.2.2 藥材粉碎、處理 分別精密稱取川芎、當歸生品及酒炙品各20 g，粉碎、干燥，過40目篩,即得。

1.2.3 揮發油的提取 采用超臨界CO2萃取法萃取其揮發油，將藥材粉末置于萃取釜中調壓力為30 MPa，溫度40 ℃，連續萃取180 min，收集揮發油，即得。

1.2.4 色譜條件

1.2.4.1 GC條件 HP-5MS石英毛細管柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm)；柱溫80～240 ℃，程序升溫4 ℃/min；

柱流量1.0 mL/min；進樣口溫度250 ℃；柱前壓100 kPa；進樣量0.2 μL；分流比10∶1；載氣為高純氦氣。

1.2.4.2 MS條件 電離方式EI；電子能量70 ev；接口溫度240 ℃；離子源溫度230 ℃；質量范圍35～450。

1.2.5 樣品制備及測定 分別精密稱取揮發油0.2 g，置5 mL容量瓶中，加石油醚定容至刻度，過0.22 μL濾膜，即得。取0.2 μL注入GC-MS聯用儀，記錄總離子流圖，保留時間和峰面積，再通過譜庫檢索，確定揮發油的組成和相對含量。

2 結果

2.1 當歸、川芎酒炙前后揮發油含量及提取率比較 見表1。

表1 藥材酒炙前后揮發油含量及提取率比較

2.2 GC-MS分析結果 采用超臨界CO2萃取所得當歸生品及酒炙品總揮發油，利用GC-MS聯用儀分析，得到的圖譜與標準圖譜對照，鑒定出16種化學成分，參考標準圖譜和相關文獻[9]確定其化學結構，用峰面積歸一化法計算各組分的質量分數，生品、酒炙品總離子流圖分別見圖1、圖2，結果見表2。

圖1

圖2

圖3

圖4

表2 超臨界CO2萃取當歸的揮發油成分GC-MS分析結果

表3 超臨界CO2萃取川芎的揮發油成分GC-MS分析結果

同樣方法，從川芎酒炙前后所得的揮發油中鑒定出12種化學成分，生品、酒炙品總離子流圖分別見圖3、圖4，結果見表3。

3 討論

本實驗采用超臨界CO2萃取技術，整個過程耗時短，效率高，萃取溫度低，可大量保存對熱不穩定的成分及易氧化的揮發性成分。

酒炙川芎和當歸揮發油含量較生品降低，可能是由于藥材加工處理和炮制過程中有所損失，2種飲片炮制前后揮發油組分發生了變化，2味藥揮發油中多數成分的相對含量均有升高趨勢，少部分揮發油減少甚至消失，川芎和當歸炮制前后揮發油變化的研究對臨床應用具有重要價值。

酒炙可以改變藥材的藥性、化學組成及含量，本文的研究為藥材酒炙法炮制的規范化及臨床應用積累了條件，今后在制定藥材炮制標準時，應充分考慮藥材炮制前后化學成分組成及含量變化，條件允許應配合開展相關藥理實驗研究。

[1]中華人民共和國藥典委員會.中國藥典[M].北京：中國醫藥科技出版社，2010：124-125.

[2]陶靜儀,阮于平,陳耀祖.當歸成分藁本內酯平喘作用的研究[J].藥學學報,1984,19(8):561-565.

[3]劉林娜.梅其炳.程建峰.當歸揮發油的研究進展[J].中成藥,2002,24(8):621-623.

[4]胡長鷹.當歸揮發油的提取與成分分析[J].科研開發,2006,22(2):24.

[5王普善,高宣亮.中藥川芎的化學成分研究[J].中草藥,1985,16(3):41-42.

[6]季芳,呂雪芳,阮琴,等.川芎中阿魏酸HPLC檢測分析[J].中國現代應用藥學雜志,2003,20(4):149-151.

[7]張達磊.李桂生.川芎揮發油的研究進展[J].時珍國醫國藥,2005,16(7):664-665.

[8]永芳.超臨界流體CO2萃取川芎揮發油化學成分的研究[J].中國藥學雜志,2000,35(2):84.

[9]叢浦珠,李筍玉.天然有機質譜學[M].北京:中國醫藥科技出版社,2002:23.