1083例婦女HPV感染狀況分析

西電集團醫院（西安710077） 楊小藝 李 娜 王海寧

宮頸癌是比較常見的婦女惡性腫瘤之一，發病率僅次于乳腺癌。有研究證實，在世界范圍內罹患宮頸癌的患者中，有93%以上均能檢測到 HPV感染［1－2］。其中，高危型HPV感染、病毒的持續存在是導致宮頸癌前病變及宮頸癌的必要因素［3］。目前已分離出110余種HPV－DNA，其中30多種與宮頸感染和病變有關。國外有文獻報道因地域差異和檢測方法不同，宮頸原位腺癌及浸潤性腺癌與HPV型別的關系及檢出率大有不同［4］。為了解西安地區婦女HPV感染狀況及常見型別分布，本文采用HPV－RDB法對1083例西安市城區婦女進行HPV－DNA檢測，現將檢測結果報道如下。

對象與方法

1 研究對象 以2010年6月至2011年6月在西電集團醫院及西安交通大學醫學院第一附屬醫院婦科門診就診的1083例婦女為研究對象，年齡18～80歲，平均年齡36.5歲。每例均檢測HPV19種亞型。

2 標本采集 宮頸脫落細胞在無菌條件下用特制宮頸刷深入宮頸管內2cm，旋轉數周后并停留片刻取出，取出后放入裝有2ml細胞保存液的保存管中，沿刷柄折痕將宮頸刷折斷，旋緊管蓋，－20℃保存待測。

3 試劑與儀器 人乳頭瘤病毒基因分型檢測試劑盒（PCR－反向斑點雜交法）由廣州達安基因有限公司提供；儀器是由廣州達安基因有限公司提供的DA7600型擴增儀。

4 樣本DNA的提取 將宮頸刷上的細胞洗脫于2ml細胞保存液中，洗脫液轉至1.5ml離心管中，10000r／min離心5min，棄去上清，保留管底細胞沉淀。向沉淀中加入50μl DNA提取液，充分振蕩混勻，100℃保溫10min，10000r／min離心5min，上清備用。PCR擴增：嚴格按照試劑盒使用說明，取PCR反應管若干于室溫解凍平衡10min，分別加入提取上清5μl，6000r／min瞬時（3s）離心后，將各反應管放入PCR儀，按下列條件擴增：93℃3min變性，然后按93℃40s→55℃40s→72℃40s擴增，共40個循環，最后72℃延伸7min。雜交：將PCR擴增產物98℃，8min變性，立即置于冰水混合物中2min以上，按試劑盒說明進行雜交反應。

5 統計學方法 應用SPSS16.0統計軟件進行統計分析，采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

結 果

1 西安市城區婦女HPV感染率及HPV亞型分布 見表1。1083例樣本中，檢出HPV陽性402例，總陽性率為37.12%（402／1083）。亞型感染率相對較高的3個型別依次為16、52和58型，分別占檢出總例數的38.06%、16.42%和14.43%。分別占總例數的14.13%、6.09%和5.36%。

表1 西安市城區婦女HPV感染亞型分布

2 以年齡分組1083例西安市城區婦女HPV感染及分布情況 見表2。以＜20組和＞60歲組檢出率最高（75.00%和70.00%）。剩下的4個年齡段組，以20～29歲和40～49歲年齡段檢出率較高（P＜0.05）。

表2 以年齡分組HPV感染情況

討 論

人乳頭瘤病毒是一種具有種屬特異性的嗜上皮病毒，屬于乳頭瘤病毒科，是一種雙鏈閉環小DNA病毒。流行病學研究表明，HPV感染與宮頸癌的發生密切相關，現已知20余種與癌癥相關的HPV型別，例如HPV16、18、45、31、33、52、58和35是引起宮頸癌的比較常見的幾種基因型別，但是其地理變異及區域分布尚待研究［2］。

Clifford等［4］研究發現在世界范圍內除亞洲之外的區域比較常見的HPV基因型別是16、18、45、31和33，而在亞洲比較常見的是52和58。Bao等［5］對大量處于宮頸病變各個時期以及細胞學檢查正常的中國女性HPV感染進行監測，結果發現感染最多的型別是16型，其次比較廣泛流行的是58和52型。國內有學者研究證實，福州地區HPV陽性檢出率為25%，沈陽地區HPV陽性檢出率為21.63%，貴州地區HPV陽性檢出率為25.9%，HPV主要檢出亞型為16、52和58［6－8］。

本研究結果顯示，1083例受檢者中HPV陽性者402例，陽性率為37.12%。檢測HPV 19種亞型中，單純感染一種亞型者287例，同時感染2個亞型者93例，同時感染3個亞型者18例，同時感染4個亞型者4例。從表1中可以看出19種亞型中以16型感染例數最多，為153例（38.06%）（其中單一感染102例，混合感染41例）；其次為52型66例（16.42%）（其中單一感染29例，混合感染37例）；58型58例（14.43%）（其中單一感染32例，混合感染26例）。而在世界范圍內流行比較廣泛的18型，僅檢出陽性14例，陽性率1.29%，說明西安市城區育齡婦女在已檢出的高危亞型中比較常見的3種基因型別是16、52和58，與國內外學者研究結果大致相同。但是西安地區HPV陽性檢出率為37.12%，明顯高于福州、沈陽、貴州等地，考慮與受檢病例大部分為門診有宮頸病變的患者有關。

年齡也是HPV感染的重要因素。30歲之前的年輕婦女由于性生活活躍，HPV感染機會大，但是30歲之前自身免疫能力也較強，大部分HPV可通過自身免疫系統清除，只造成一過性感染。30歲之后，HPV的感染率下降，但是隨著年齡的增長，宮頸癌的發病率逐漸升高。所以對于30～50歲的婦女進行HPV的檢測和隨訪意義重大。本研究結果顯示，在＜20組和＞60歲組檢出率各出現兩個高值（75.00%和70.00%），但這兩組我們檢測例數過少。剩下的4個年齡段組，以20～29歲和40～49歲年齡段檢出率較高，差異有統計學意義（χ2＝24.11，P＜0.05）。結果表明30歲以前HPV感染率較高，這與年輕婦女性生活活躍有關；40～49歲為宮頸癌高發階段，HPV病毒的持續感染造成了宮頸的癌前病變乃至宮頸癌的發生，提示宮頸癌普查計劃應該對這一階段人群進行重點關注。

HPV分型檢測是檢測受檢者罹患宮頸癌的發病風險度及決定其篩查間隔的重要手段。本文通過對西安城區1083例婦女HPV感染型別的檢測，總結出本地區主要流行的HPV感染型別為16、52和58型；并對感染率較高年齡段進行了分析統計，為宮頸癌的普查提供了基本信息，并為宮頸癌疫苗的研究提供了一定的依據。

［1］ Walboomers JM，Jacobs MV，Manos MM，et al.Human papillomavirus is a necessary cause of invasive cervical cancer worldwide［J］.The Journal of Pathology，1999，189（1）：12－19.

［2］ Bosch FX，Manos MM，Munoz N，et al.Prevalence of Human Papillomavirus in Cervical Cancer：a Worldwide Per－spective［J］.J NCI J Natl Cancer Inst，1995，87（11）：796－802.

［3］ Schiffman M，Castle PE.Human papillomavirus：epidemiology and public health［J］.Arch Pathol Lab Med，2003，127（8）：930－934.

［4］ Clifford GM，Smith JS，Plummer M，et al.Human papillomavirus types in invasive cervical cancer worldwide：a meta－analysis［J］.Br J Cancer，2003，88（1）：63－73.

［5］ Bao YP，Li N，Smith JS，et al.Human papillomavirus type－distribution in the cervix of Chinese women：a metaanalysis［J］.Int J STD AIDS，2008，19 （2）：106－111.

［6］ 汪 欣，趙素萍，魏建威.福州地區935例婦女HPV感染情況的分析［J］.分子診斷與治療雜志，2011，3（1）：33－35.

［7］ 李艷紅，張 偉，朱少君，等.早期宮頸癌篩查有效方案的探討和研究［J］.陜西醫學雜志，2006，35（7）：842－843.

［8］ 高玉華，高 巖.2104名體檢婦女高危型 HPV－DNA檢測情況的分析［J］.醫藥與保健，2010，18（1）：124－125.