丹紅注射液對(duì)自然衰老大鼠心臟、大腦組織TNF—α、IL—6的影響

劉靈芝

[摘要] 目的 探討丹紅注射液（DH）對(duì)自然衰老大鼠心臟、大腦組織腫瘤壞死因子—α（TNF—α）、白介素—6（IL—6）的影響。 方法 將40只雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為衰老組、Vit E組、丹紅注射液大劑量組和丹紅注射液小劑量組，每組10只。按照實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)進(jìn)行處理后，用ELISA法檢測(cè)各組大鼠心臟、大腦組織中TNF—α、IL—6的水平。 結(jié)果 與衰老組相比，Vit E組、DH大劑量組和DH小劑量組大鼠心臟、大腦組織TNF—α、IL—6水平降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）；與DH小劑量組比較，DH大劑量組、Vit E組TNF—α、IL—6水平降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。 結(jié)論 DH可下調(diào)大鼠心臟、大腦組織中TNF—α、IL—6水平，減輕機(jī)體的炎癥反應(yīng)，其可能參與了抗大鼠自然衰老的作用。

[關(guān)鍵詞] 丹紅注射液；衰老；腫瘤壞死因子—α；白介素—6

[中圖分類(lèi)號(hào)] R285.5[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A[文章編號(hào)] 1673—9701（2012）25—0001—01

Influences of danhong injection on TNF—α and IL—6 of heart and cerebrum in aged rats

LIU Lingzhi

Department of Cardiology， Zhengzhou Peoples Hospital in Henan Province， Zhengzhou 450003， China

[Abstract] Objective To investigate the influences of danhong injection （DH） on tumor necrosis factor—α （TNF—α） and interleukin—6 （IL—6） of heart and cerebrum in aged rats. Methods All forty Wistar rats were randomly divided into the aging group， the Vit E group， the DH high—dose group and the DH low—dose group （n = 10）. All the rats were handled according to the experimental design， the TNF—α and IL—6 of heart and cerebrum were detected by ELISA method. Results The TNF—α and IL—6 levels of the Vit E group， the DH high—dose group and the DH low—dose group were lower than those of the aging group （P < 0.05）； The TNF—α and IL—6 levels of the Vit E group， the DH high—dose group were lower than those of the DH low—dose group （P < 0.05）. Conclusion DH can delay the aging in rats， maybe because it can reduce the inflammatory response.

[Key words] Danhong injection； Aging； Tumor necrosis factor—α； Interleukin—6

氧自由基損傷、細(xì)胞凋亡及炎癥反應(yīng)等均參與了大鼠衰老的發(fā)生發(fā)展過(guò)程，且各因素之間相互影響，或?qū)Υ龠M(jìn)衰老具有系統(tǒng)作用[1]。丹紅注射液（DH）具有活血化瘀的作用，能夠減輕機(jī)體的炎癥反應(yīng)。作者從炎癥反應(yīng)這一影響因素出發(fā)，采用ELISA法檢測(cè)DH作用后自然衰老大鼠心臟、大腦組織中腫瘤壞死因子—α（TNF—α）、白介素—6（IL—6）的水平變化，以期探討其在抗衰老中的可能作用及機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 主要試劑及儀器

丹紅注射液（DH）購(gòu)自菏澤步長(zhǎng)制藥有限公司（國(guó)藥準(zhǔn)字Z20026866），維生素E（Vit E）注射劑購(gòu)自上海通用藥業(yè)股份有限公司（批號(hào)：110412），TNF—α、IL—6 ELISA試劑盒均購(gòu)自美國(guó)Peprotech公司（批號(hào)均為20111017）；全自動(dòng)酶聯(lián)免疫分析儀為西化儀（北京）科技有限公司產(chǎn)品（型號(hào)：M238515）。

1.2 實(shí)驗(yàn)對(duì)象

健康18月齡雄性Wistar大鼠，體重387～412 g，購(gòu)自河南省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。

1.3 實(shí)驗(yàn)分組及給藥方法

將40只Wistar大鼠隨機(jī)分為衰老組、Vit E組（Vit E 50 mg/kg）、DH大劑量組（DH 1.0 mL/kg）和DH小劑量組（DH 0.5 mL/kg）4組，每組10只。自然衰老組大鼠皮下注射0.85%生理鹽水（2 mL/kg），3個(gè)處理組等時(shí)間注射相應(yīng)濃度藥物（2 mL/kg），每天1次，連續(xù)12個(gè)月。

1.4 TNF—α、IL—6檢測(cè)

各組大鼠末次給藥1 h后，用1%戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉，取心臟、大腦組織后用4℃生理鹽水沖洗，濾紙吸干，分別將大腦及心臟左心室組織勻漿，3 000 r/min離心15 min，取適量上清液，按ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)檢測(cè)TNF—α、IL—6水平。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS 13.0進(jìn)行分析，計(jì)量資料以（x±s）表示，組間采用t檢驗(yàn)，組內(nèi)比較采用單因素方差分析及LSD法，P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

與衰老組相比，3個(gè)處理組大鼠心臟、大腦組織中TNF—α、IL—6水平均明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）；與DH小劑量組比較，DH大劑量組、Vit E組大鼠心臟、大腦組織中TNF—α、IL—6水平均有所降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。見(jiàn)表1。

3 討論

隨著年齡的增長(zhǎng)，機(jī)體的總抗氧化能力下降，以致體內(nèi)活性氧水平過(guò)剩，不僅可以通過(guò)脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)生丙二醛等對(duì)機(jī)體造成損傷，而且還可以通過(guò)影響細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，促進(jìn)機(jī)體炎性介質(zhì)水平上升，從而進(jìn)一步造成損傷[2，3]。TNF—α是一種T細(xì)胞和活化的巨噬細(xì)胞分泌的多功能細(xì)胞因子，能夠誘導(dǎo)多種細(xì)胞的增殖或凋亡，與腫瘤發(fā)生、衰老進(jìn)展等有關(guān)，可與受體結(jié)合后通過(guò)細(xì)胞內(nèi)多種信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑引發(fā)自由基的過(guò)量產(chǎn)生等，進(jìn)而促進(jìn)機(jī)體的衰老[4]。IL—6是一種促進(jìn)炎癥反應(yīng)的細(xì)胞因子，在老年癡呆進(jìn)展、缺血再灌注損傷形成、腫瘤發(fā)生等過(guò)程中發(fā)揮重要作用，而應(yīng)用抗炎治療后，IL—6的水平下降，機(jī)體炎癥反應(yīng)減輕，可使上述疾病或病理生理過(guò)程的形成減慢或程度減輕[5，6]。本文結(jié)果顯示：3個(gè)處理組較衰老組大鼠心臟、大腦組織中TNF—α、IL—6水平均下降；DH大劑量組和Vit E組的TNF—α、IL—6水平相似，提示DH與Vit E一樣能夠減輕自然衰老大鼠的炎癥反應(yīng)；而DH小劑量組大鼠心臟、大腦組織中的TNF—α、IL—6高于前兩組，提示DH的作用可能具有劑量依賴(lài)性。

總之，通過(guò)本研究我們可以發(fā)現(xiàn)，DH能下調(diào)大鼠心臟、大腦組織中TNF—α、IL—6水平，從而減輕機(jī)體的炎癥反應(yīng)，這可能參與了其抗大鼠自然衰老的作用。

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（收稿日期：2012—06—12）