阿魏酸鈉對大鼠胸主動脈的非內皮依賴性血管舒張作用

何志鵬 吳琪 章順安（等）

[摘要] 目的 研究阿魏酸鈉對離體大鼠胸主動脈的影響。 方法 以等長張力的形式記錄鼠主動脈及去內皮鼠主動脈對去氧腎上腺素和高鉀的反應，以及阿魏酸鈉對鼠主動脈及去內皮鼠主動脈的舒張作用。 結果阿魏酸鈉（0.1～30 mmol/L）能使預先用濃度為（2.73±0.02）的去氧腎上腺素和濃度為（2.57±0.06）的高鉀預收縮的離體主動脈環舒張（P < 0.05）；機械去除內皮后，阿魏酸鈉對主動脈環的舒張效應沒有明顯改變。 結論 阿魏酸鈉是一種非內皮依賴性的血管平滑肌細胞松弛劑。

[關鍵詞] 阿魏酸鈉；主動脈；血管舒張

[中圖分類號] R961[文獻標識碼] A[文章編號] 1673—9701（2012）25—0021—02

Endothelium—independent vasorelaxant effect of sodium ferulate on rat thoracic aorta

HE Zhipeng WU Qi ZHANG Shunan TANG Yantian HU Ze SHI Peijia

Department of Cardiology， the Peoples Hospital of Beilun District， Ningbo 315800， China

[Abstract] Objective To investigate the effects of sodium ferulate （SF） on rat isolated thoracic aortas. Methods Isometric tension was recorded the reaction that rat aorta and endothelium—denuded aorta response to phenylephrine and high potassium， and the effect of sodium ferulate on rat aorta and de—endothelialized rat aortic diastolic function. Results SF （0.1—30 mmol/L） relaxed the isolated aortic rings precontracted with phenylephrine（PE） and high—K+ in a concentration—dependent manner with respective pD2 of 2.73±0.02 and 2.57±0.06（P < 0.05）. Mechanical removal of endotheliumdid not significantly modify the SF—induced relaxation. Conclusion These results indicate that SF acts directly as a non—selective relaxant to vascular smoothmuscle.

[Key words] Sodium ferulate；Aorta；Vasorelaxation

阿魏酸鈉（SF），即3—甲氧基—4—羥基肉桂鈉（C10H9O4Na），是阿魏酸（FA）的一種鈉鹽。體外和體內研究表明，阿魏酸鈉或阿魏酸具有有益的藥理作用，包括其較強的抗氧化、抗炎、抑制血小板聚集、清除自由基作用[1]。近年來，有報道阿魏酸通過提高NO的生物利用度來修復自發性高血壓大鼠主動脈的內皮功能，從而降低其血壓[2]，對于阿魏酸鈉對血管是否有此作用報道不多，本文對此進行探討。

1 材料與方法

1.1 主要材料

①阿魏酸鈉（SF，純度99.54%）由中國的香氣化工（中國杭州）提供。去氧腎上腺素（phenylephrine，PE），乙酰膽堿（acetylcholine， ACh）購自美國Sigma公司（St Louis， MO，USA）。②SD大鼠，雄性，體重250～300 g，購自中國科學研究院（中國上海）動物實驗中心。研究的程序和協議按照我們的制度指南進行。動物房里溫度恒定在（23±2）℃和濕度（55±5）%，暴露12 h光照、黑暗交替周期，喂食標準飲食，不限制飲水。

1.2 方法

1.2.1 胸主動脈環的制備分離出胸主動脈，并放置在4℃ Krebs—Henseleit液（K—H，mmol/L：Nacl 118.3，KCl 4.7，MgSO4 1.2，KH2PO4 1.2，NaHCO3 25.0，CaCl2 1.25，葡萄糖11.0）。小心除去脂肪和結締組織，將主動脈切成3～4 mm寬的環。據實驗需要，采用棉簽磨擦血管環內表面的方法制備去內皮血管環。

1.2.2 等距血管張力的測量在37℃裝有5 mL K—H溶液的器官浴槽中，主動脈環水平懸掛于兩根不銹鋼絲上。用壓力移動傳感器連接醫學實驗室的6.0的多道記錄儀（中國南京制造）記錄等距離的張力。主動脈環被2.0 g的靜息張力拉長，并允許其平衡保持60～90 min，在每個實驗之前用氯化鉀（60 mmol/L）刺激環至少3次直到獲得可重現的最大收縮反應。初步評定現有內皮功能：用氯化鉀60 mmol/L重復刺激3次，以誘發血管的最大收縮幅度。待血管環重新穩定后，用去氧腎上腺素1 μmol/L收縮血管環達峰值，加入ACh 10 μmol/L檢驗血管內皮完整性。若加ACh后使PE預收縮的血管環舒張80%以上認為內皮完整，舒張10%以下則認為內皮去除。

1.2.3 阿魏酸鈉對去氧腎上腺素和氯化鉀誘導的收縮的影響在標準K—H溶液中進行兩種不同的實驗設計。第一個實驗：用去氧腎上腺素（1 μmol/L）和高鉀（60 mmol/L）對主動脈環進行預收縮處理，一旦達到停滯期，往浴槽中加入阿魏酸鈉，劑量由0.1 mmol/L逐漸增加到30 mmol/L，就可以得到阿魏酸鈉誘導松弛的濃度—效應曲線。第二個實驗：將（1，3，10 mmol/L）阿魏酸鈉加入浴槽中，培養10 min后，將氯化鉀（0～60 mmol/L） 或去氧腎上腺素1 nmol/L～10 μmol/L加入浴槽中可以得到高鉀或去氧腎上腺素的濃度—效應曲線。在這兩組實驗中采用的都是內皮完整的主動脈環，采用去氧腎上腺素或氯化鉀誘導收縮的百分比表示張力。

1.2.4 內皮細胞在阿魏酸鈉誘導的松弛中的作用為了闡明內皮細胞在阿魏酸鈉誘導松弛中的作用，我們研究了阿魏酸鈉對用去氧腎上腺素（1 μmol/L）或氯化鉀（60 mmol/L）預收縮的內皮完整的主動脈環和去內皮的主動脈環的濃度—效應關系。

1.3 統計學方法

數據采用（x±s）表示。阿魏酸鈉使預收縮環達到最大松弛的50%時的濃度定義為半最大有效濃度（EC50）。由非線性回歸的濃度效應曲線（曲線擬合）計算出pD2（EC50值的負對數）。采用SPSS 13.0統計軟件處理數據，用兩組非配對Student t—檢驗進行比較，P < 0.05為有統計學意義。

2 結果

阿魏酸鈉（直到劑量達30 mmol/L）對大鼠主動脈環的基礎張力沒有影響。數據沒有顯示，見圖1、2。阿魏酸鈉對去氧腎上腺素和氯化鉀誘導的收縮的影響見表1、圖1A、圖1B、圖2A及圖2B。內皮細胞在阿魏酸鈉誘導的松弛中的作用見表1和圖1。

表1 阿魏酸鈉對去氧腎上腺素和氯化鉀誘導的收縮的影響（x±s）

3 討論

擴血管藥物可分為內皮依賴和非內皮依賴兩類。內皮依賴性血管擴張劑如乙酰膽堿引起血管舒張，需要內皮層的存在及它分泌的一氧化氮、前列環素、內皮依賴性超極化因子的作用[3，4]。內皮細胞功能障礙主要表現為舒張和收縮因子、促凝和抗凝物質、生長抑制和生長促進物質的生成釋放不平衡，引起生理系統多方面的變化，是多種血管性疾病的關鍵環節[5]。研究表明，吸煙、缺乏運動、年齡增加、雌激素減少、動脈硬化、高血壓、糖尿病、血脂異常、冠心病、心力衰竭、血管外科與介入治療等多種因素，均可造成內皮細胞損傷[6]。內皮素是血管內皮釋放的肽類物質，具有很強烈的收縮血管作用。過量內皮素釋放可引起冠狀動脈痙攣，促進心肌收縮，加重心肌缺血和心肌再灌注損傷，導致冠心病心絞痛的發生，冠狀動脈痙攣還與心肌梗死和猝死的發生高度相關[7]。有研究顯示，SF在改善心肌缺血的同時，可明顯降低內皮素釋放，增加體內一氧化氮含量，維持心血管系統恒定舒張，調節冠狀動脈基本張力，保持心肌血流灌注[8]。王怡練等[9]在常規治療不穩定型心絞痛基礎上加用SF，結果該組心臟事件發生率顯著降低，心電圖改善和減少含服硝酸甘油例數均優于加用其他藥物組（P < 0.05）。有研究顯示，應用SF靜脈注射2周后，心絞痛的發作次數明顯少于對照組（P < 0.05），心電圖缺血性ST—T改善優于對照組，且不影響心率、血壓等指標，對改善不穩定型心絞痛有良好的效果，尤其是與硝酸酯類、β受體阻滯劑等合用可以增強這些藥物的抗缺血作用[10]。本實驗顯示，阿魏酸鈉呈劑量依賴性的舒張去氧腎上腺素和高鉀預收縮的內皮完整的主動脈環，且機械的去除內皮后，阿魏酸鈉對去氧腎上腺素和氯化鉀的預收縮主動脈環的舒張作用沒有明顯的降低，提示阿魏酸鈉的舒血管作用是非內皮依賴性的，是通過阿魏酸鈉直接作用于血管平滑肌細胞實現的。

[參考文獻]

[1]Wang BH，Ou—Yang JP. Pharmacological actions of sodium ferulate in cardiovascular system[J]. Cardiovascular Drug Reviews，2005，23（2）：161—172.

[2]Suzuki A，Kagawa D，Fujii A，et al.Short— and long—term effects of fer＼

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[8]魏彤. 阿魏酸鈉對冠心病心絞痛病人內皮素、一氧化氮的影響[J]. 醫學理論與實踐，2005，18（6）：627—628.

[9]王怡練，周新華，左逸夫. 阿魏酸鈉治療不穩定型心絞痛的療效觀察[J].華北煤炭醫學院學報，2002，4（4）：458.

[10]紀文新，王赫楠，翟羽佳. 阿魏酸鈉治療不穩定型心絞痛療效分析[J]. 中國誤診學雜志，2006，6（16）：3105—3106.

（收稿日期：2012—05—03）