穴位埋線對單純性肥胖癥瘦素和胰島素抵抗影響的研究

[摘要]目的：探討穴位埋線療法對單純性肥胖癥瘦素和胰島素抵抗的作用。方法：采用RT-PCR技術測定瘦素受體(OB-R)基因表達水平，放射免疫分析測定血清和下丘腦瘦素(Leptin)和胰島素(INS)的含量。觀察穴位埋線療法治療前后單純性肥胖患者血清Leptin、INS、脂質水平的變化；還觀察穴位埋線療法治療前后肥胖大鼠體重、Lee's 指數、體脂、血清和下丘腦瘦素和INS 的含量以及下丘腦OB-R基因表達的變化。結果：單純性肥胖患者Leptin、INS、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白-膽固醇(LDL-C) 的含量均顯著高于正常人水平；而高密度脂蛋白-膽固醇(HDL-C)卻顯著低于正常人水平，穴位埋線療法治療后患者Leptin、INS、TC、TG、LDL-C的含量均明顯回降，而HDL-C含量卻明顯回升，這種變化與減肥療效有關。肥胖大鼠體重、Lee's 指數、體脂及血清Leptin和INS 水平均顯著高于正常大鼠，而下丘腦瘦素和INS水平及OB-R 基因表達水平均明顯低于正常大鼠。穴位埋線療法治療取得良好減肥療效的同時，肥胖大鼠血清瘦素和INS 均明顯回降，而下丘腦瘦素和INS水平以及OB-R基因表達水平卻明顯升高。結論：穴位埋線療法對肥胖機體中樞和外周Leptin和INS水平的良性調整作用以及促進下丘腦OB-R基因表達可能是穴位埋線療法糾正瘦素和胰島素抵抗以及異常的內分泌代謝的重要機制。

[關鍵詞]穴位埋線；單純性肥胖；瘦素抵抗；瘦素受體；胰島素抵抗；血腦屏障

[中圖分類號]R723.14 [文獻標識碼]A [文章編號]1008-6455（2012）03-0490-05

Study on the Influence of catgut implantation at acupoint on simple obesity Leptin and insulin resistance

YAN Run-hu1， LIU Xiao-ming2， BAI Jie1， YU Jiang1， GU Jin-song1

(1.College of Cosmetology Medicine Dalian Medical University， Dalian 116044 Liaoning，China；2.Department of Dermatology，The First Affiliated Hospital of Dalian Medical University)

Abstract：Objective To investigate the influence of catgut implantation at acupoint on simple obesity leptin and insulin resistance. Methods To adopt RT-PCR to survey and evaluate gene expression of OB-R， and radioimmunoassay to determine the contents of serum，hypothalamus Leptin，and INS.To observe the simple obesity patients' change of serum Leptin， INS， lipid before and after the treatment and observe the contents of obese rats' body weight， Lee's index， body fat，serum，hypothalamus Leptin and INS，and the gene expression change of hypothalamus before and after the treatment. Results The contents of serum，INS，TC，TG，LDL-C for simple obesity patients are dramatically higher than the level of normal people， while HDL-C is dramatically lower than the latter. After the treatment， the contents of serum，INS，TC，TG，LDL-C decrease significantly， while HDL-C increase significantly， which are related to the weight-losing efficacy.The levels of obese rats' body weight， Lee's index， body fat， serum Leptin and INS are dramatically higher than normal rats， while hypothalamus Leptin， the level of INS and gene expression of OB-R are dramatically lower than the latter. The treatment of catgut implantation at acupoint has a good weight-losing efficacy，meanwhile obese rats' serum Leptin and INS decrease significantly， while hypothalamus Leptin， the level of INS and gene expression of OB-R increase significantly. Conclusion The treatment of catgut implantation at acupoint benignly adjusts obesity organism's centrum and periphery Leptin and promotes the gene expression of hypothalamus OB-R， which may be an important mechanism in which the treatment corrects the Leptin，insulin resistance and exceptional endocrinology and metabolism.

Key words：catgut implantation at acupoint;simple obesity;Leptin resistance(LR);leptin receptor;Insulin resistance(IR);hemato encephalic barrier

單純性肥胖癥是全球最常見的流行病之一，越來越受到醫學工作者的重視。肥胖癥不僅影響體形、美觀，而更重要的是肥胖癥增加了心腦血管、糖尿病、高脂血癥、不孕癥及腫瘤等疾病的發病率，嚴重影響人類身心健康，削弱機體抵抗力，增加病死率[1]。目前，肥胖癥已經取代了營養不良和感染所引起的疾病，成為危害人類健康的主要殺手之一[2]。現代研究表明，肥胖者多存在有胰島素抵抗(IR) 和瘦素抵抗(LR)的特征[3-4]。有關穴位埋線對單純性肥胖癥IR和LR的臨床和實驗研究報道甚少，本文就此做了相關探討，現報道如下。

1 資料和方法

1.1一般資料：820例肥胖癥患者來自2005年3月～2010年12月在大連醫科大學附屬第一醫院皮膚科中醫減肥美容專科門診就診者， 均符合單純性肥胖癥的診斷標準。其中男184例，女636例，年齡最小15歲，最大68歲，平均為38.5歲，病程最短2個月，最長33年，平均7年，輕度肥胖438例，中度肥胖270例，重度肥胖112例。

1.2 診斷及療效標準：單純性肥胖癥參考1991年在上海召開的全國第三屆肥胖研究學會會議上制定的“單純性肥胖癥的中西醫結合診斷及療效標準”[5]及中華人民共和國頒布的《中藥新藥治療單純性肥胖癥的臨床研究指導原則》第三輯的診斷標準及療效標準[6]。

1.3 觀察指標：觀察穴位埋線治療前后患者的體重、體重指數（BMI）、體脂百分率(F%)、體圍(胸圍、腰圍、髖圍、股圍)、腰/髖比值(WHR)、皮褶厚度(右側肱三頭肌、右側肩胛角下、右側臍旁部位)等肥胖指標；觀察穴位埋線治療前后清晨空腹抽取血的血清瘦素(Leptin)、胰島素(INS)、總膽固醇(TC)、甘油三酯（TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、血糖(FBS)的水平;極低密度脂蛋白膽固醇(VLDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、胰島素敏感性指數ISI＝-Log（Fins×FBS）[7]。

1.4 方法：穴位埋線方法：自做埋線包（彎盤1個、一次性埋線針1～2支、剪刀1把、鑷子1把、2號醫用羊腸線、無菌手套、紗布3～5塊），250ml生理鹽水備用。患者充分暴露埋線所取穴位，用碘酒棉簽在穴位上做標記，皮膚常規消毒后， 左手持小鑷子夾一段1～2cm羊腸線置入一次性埋線針內前端，快速刺入穴位內，得氣后邊推針芯邊退針管，將羊腸線留在穴內，查看針孔處無暴露羊腸線后，用創可貼護孔即可。24h后揭掉膠布，埋線后2天之內勿洗澡，初次埋線后針孔疼痛較重，個別患者有發熱、疲乏、嗜睡等現象，這些癥狀均屬正常反應，不必處理，1周內可自行消退。依據中醫理論，每次辨證選取6～7個體穴進行穴位埋線并且隨證加減，每次選用的穴位不同于前一次，可左右交替，重復使用，每2周埋線1次，3次為1個療程。觀察3個療程（約90天）后檢查肥胖指標，1年后復查。

1.5實驗研究

1.5.1營養性肥胖大鼠模型研制:1月齡剛斷乳SD雄性大鼠100只，體重50～70g，由大連醫科大學實驗動物中心提供。定時觀察大鼠的體長(H)、體重(W)、Lee's指數。凡經高脂飼料喂養12周后，大鼠體重超過普通飼料喂養大鼠體重的20%作為營養性肥胖實驗大鼠，設為肥胖大鼠組。

1.5.2動物分組:以普通鼠飼料喂養的大鼠作為正常對照組，簡稱正常組(20只)。將造模成功的營養性肥胖實驗大鼠（43只）隨機分為兩組，一組不做任何治療，為模型對照組，簡稱對照組(21只)；另一組給予穴位埋線治療，簡稱穴位埋線組(22只)。各部分實驗均從上述三組中隨機抽取12只，組成正常組、模型組和穴位埋線組。

1.5.3方法：分別將穴位埋線組大鼠放入固定器中，取一側“后三里”(相當于足三里) 和“內庭”穴，無菌條件下洗手、消毒后，將醫用外科2號羊腸線剪至0.5～1cm不等長度，插入埋線針中。局部消毒后將一次性埋線針刺入肥胖大鼠“后三里”、“內庭”，根據相應穴位肌肉豐度將適當長度的腸線推入組織中，退出埋線針后，以膠布固定。兩側穴位交替使用，每周埋線一次，每次均在周一早晨8:00-9:00進行，連續治療并觀察4周。

1.5.4檢測方法：由大連醫科大學中心實驗室采用RT-PCR等技術測定瘦素受體(OB-R)基因表達水平，放射免疫分析測定血清和下丘腦瘦素(Leptin)和胰島素(INS)等的含量。

1.6 統計學分析：數據用x±s 表示，數據處理用統計軟件SPSS12.0系統，包括t檢驗，方差分析及相關分析等。

2 結果

2.1穴位埋線對單純性肥胖癥的減肥作用觀察：經過3個療程治療，820例患者，治愈164例，占20.00%；顯效208例，占25.36%；有效312例，占38.04%；無效136例，占16.58%，總有效率83.42%。

2.2 穴位埋線治療后患者體重變化的動態觀察：見圖1

從圖1可以看出，隨著穴位埋線時間的延長，患者的體重逐步下降，并且在穴位埋線治療的早期，患者體重下降幅度較大。通過臨床觀察，肥胖患者在穴位埋線治療的前2個療程體重減輕較快，之后進入一個相對的穩定期，然后隨著穴位埋線的繼續治療，體重再逐漸下降。

2.3 穴位埋線治療前后及治療結束后1年各項肥胖指標比較見表1：穴位埋線治療后（90天）患者的皮褶厚度、體重、腰圍、體脂百分率、體質量指數、腰髖比均明顯下降，前后比較有極顯著性差異(P＜0.01)；患者的股圍、髖圍前后比較有顯著性差異(P ＜0.05)。治療1年后隨訪，患者體重、髖圍、腰髖比、體脂百分率、肱三頭肌皮褶與治療前相比較仍有極顯著性差異（P＜0.01)；患者肩胛角下皮褶、 臍旁腹壁皮褶、體質量指數與治療前相比較仍有顯著性差異(P ＜0.05)。

2.4 穴位埋線治療前、后及治療結束后1年各項生化指標比較見表2：穴位埋線治療后（90天）患者脂質指標中除HDL-C明顯回升外，均出現了顯著的回降，治療前后相比經統計學處理有極顯著差異（P＜0.01）；穴位埋線治療后患者Leptin、Ins明顯下降與治療前相比有極顯著差異（P＜0.01）；ISI明顯回升與治療前相比有極顯著差異（P＜0.05）。治療1年后隨訪，患者的TG、INS、Leptin前后比較有極顯著性差異(P＜0.01)；患者的TC、HDL-C、VLDL-C、LDL-C、FBS前后比較有顯著性差異(P＜0.05)。

2.5 穴位埋線對肥胖大鼠肥胖指標的影響見表3：肥胖大鼠體重和Lee's 指數均顯著高于正常大鼠水平，埋線治療后，體重和Lee's 指數顯著回降，經統計學處理具有顯著性差異。

2.6穴位埋線對肥胖大鼠下丘腦和血清瘦素含量的影響見表4：對照組血清瘦素含量較正常組明顯升高，而下丘腦瘦素含量和腦血瘦素之比較正常組均明顯降低；埋線組血清瘦素含量較對照組明顯回降，而下丘腦瘦素含量和腦血瘦素之比較對照組均明顯升高，經統計學處理均具有顯著性差異。

2.7 穴位埋線對肥胖大鼠下丘腦和血清INS含量的影響見表5：對照組血清INS含量顯著高于正常組，而下丘腦INS含量和腦血INS之比均顯著低于正常組；埋線組血清INS含量顯著低于對照組，而下丘腦INS含量和腦血INS之比均明顯高于對照組。經統計學處理均具有顯著性差異。

2.8 穴位埋線對肥胖大鼠下丘腦OB-R基因表達的RT-PCR分析見表6：對照組下丘腦OB-R基因表達相對定量值減少，與正常組比P＜0.01 ，有非常顯著性差異；埋線組下丘腦OB-R基因表達相對定量值增加，與對照組比P＜0.05，有顯著性差異。

3 討論

中醫認為單純性肥胖癥主要是脾胃功能失調所致，辨證以胃強脾弱為主。埋線療法的整個操作過程包括了穴位封閉療法、針刺療法、刺血療法、組織療法、割治療法，同時也包含了埋針效應及后作用效應，是多種方法和效應的集中和整合，形成了穴位埋線獨特的治療效果[8]。穴位埋線是針灸的改良與延伸[9]，但其作用的持續性則非針灸所能比擬。臨床上穴位埋線治療因其只需2周治療1 次，節省時間而且每次治療的針數少，痛苦少，因此患者的接受度高，符合現代人快速高效的生活節奏[10]。穴位埋線療法減肥的過程中，不僅減重降脂，而且改善肥胖相關的并發癥，使機體恢復健康。

在肥胖病因病機的探討上，借助了分子生物學技術取得了豐碩的成果。1994 年，Zhang等[11]在小鼠身上成功克隆了與肥胖有關的基因，并且鑒定了人類的相應肥胖基因和它所表達的蛋白產物-瘦素。它是由脂肪細胞分泌的一種循環激素，可通過多種途徑發揮作用。其中重要的是作用于下丘腦的體重調節中樞，引起食欲降低，能量消耗增加從而減輕體重。現已證明，瘦素通過與中樞的瘦素受體(OB-R)結合可以抑制增加食欲肽(NPY)[12] 和增強減少食欲肽[α-促黑素細胞激素(α-MSH) 、r-MSH、β-內啡肽(β-EP)等]的作用進而調節攝食和能量代謝。瘦素參與攝食行為及體內能量代謝調節的主要途徑是瘦素與中樞神經系統OB-R結合后通過抑制下丘腦弓狀核NPY神經元合成與釋放NPY，進而參與攝食行為和能量代謝的調控[13]。

近年發現，在脂肪組織與胰島之間可能存在“脂肪-胰島內分泌軸”脂肪組織與胰島之間通過瘦素與INS形成一個雙向反饋環。正常情況下，瘦素與胰島β細胞內OB-R結合產生抑制INS分泌的作用[14]。肥胖者胰島β細胞可能由于OB-R對瘦素不敏感性導致“脂肪-胰島內分泌軸”紊亂，瘦素不能有效地抑制胰島β細胞INS分泌，從而導致高INS血癥。高INS血癥和瘦素的不敏感性使瘦素與INS成正反饋，從而促進脂肪合成和進一步加重高瘦素血癥[15]。

臨床觀察結果顯示，單純性肥胖患者血清瘦素和INS含量均顯著高于正常人水平，說明本組患者具有高瘦素血癥和高INS血癥，即LR和IR的特征。實驗結果表明，肥胖大鼠血清瘦素和INS水平與單純性肥胖患者相同。這些結果均證明肥胖機體存在著LR和IR的特征。總之，瘦素血腦轉運異常和OB-R基因表達的缺陷使下丘腦分泌NPY增強，出現攝食增加，能耗減少，導致高INS血癥，使機體內脂肪增多，產生IR；肥胖機體胰島β細胞OB-R對瘦素的不敏感性，導致瘦素不能有效地抑制胰島β細胞分泌INS ，從而進一步加重高INS血癥及IR。高INS血癥又會引起瘦素的過度分泌，導致高瘦素血癥和LR。這樣如此惡性循環必然導致肥胖的加重。

實驗研究表明，穴位埋線治療后，肥胖大鼠體重、Lee's 指數、體脂含量均出現顯著回降，說明穴位埋線具有良好的減肥作用。同時肥胖大鼠血清瘦素和INS的含量均出現顯著回降；而下丘腦瘦素和INS的含量、腦血的瘦素和INS含量比值以及下丘腦OB-R基因表達均出現顯著回升。說明穴位埋線具有降低肥胖機體外周瘦素和INS的含量，升高中樞瘦素和INS的含量，上調OB-R基因表達的作用，從而糾正LR和IR。

綜上所述，肥胖機體瘦素和INS血腦轉運異常， INS-R和OB-R基因表達缺陷或受體后信號傳導抑制可能是產生LR、IR及肥胖的重要原因。穴位埋線對肥胖機體中樞和外周瘦素和INS水平的良性調整作用以及促進下丘腦OB-R基因表達可能是糾正LR、IR和異常的內分泌代謝的重要作用機制，這很可能是穴位埋線減肥作用機制之一。

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[收稿日期]2011-12-27 [修回日期]2012-02-09

編輯/李陽利