P53在三陰性乳腺癌中的表達(dá)及其意義

張雁瑞 黃 犁 姜 輝 高慧軍 粱冠男

南方醫(yī)科大學(xué)附屬深圳市婦幼保健院病理科，廣東深圳 518028

乳腺癌是女性最常見的惡性腫瘤，近年來其發(fā)病率逐年上升，且呈年輕化趨勢。三陰性乳腺癌（triple negative breast cancer，TNBC）是指雌激素受體（estrogen receptor，ER）、孕激素受體 （progesterone receptor，PR）及人表皮生長因子受體（human epidermal growth factor receptor-2，HER-2）均陰性的乳腺癌。這類乳腺癌有著高侵襲性，患者5年生存率低，復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)高，預(yù)后差。筆者應(yīng)用免疫組化的方法檢測了三陰性乳腺癌中P53的表達(dá)以及P53在不同組織學(xué)級別乳腺癌中的表達(dá)，現(xiàn)報(bào)道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

本研究收集深圳市婦幼保健院病理科2008年1月～2011年12月的三陰性乳腺癌（TNBC）35例，患者均為女性，年齡33～60歲，中位年齡48歲，均經(jīng)術(shù)后病理及免疫組化證實(shí)，均未行輔助化療及放療。選取非三陰性乳腺癌（NTNBC）35例作對照。TNBC組及NTNBC組病理類型均為浸潤性導(dǎo)管癌。

1.2 方法

所有標(biāo)本均經(jīng)10%中性福爾馬林固定，石蠟包埋，5μm連續(xù)切片，HE染色。鏡下觀察，所有標(biāo)本均經(jīng)病理檢查證實(shí)為乳腺癌，并參照WHO分級標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行組織學(xué)分級，即按組織分化程度（以腺管形成為主要依據(jù)）、核異型性及核分裂計(jì)數(shù)將70例浸潤性導(dǎo)管癌分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級。免疫組化染色采用SP法。P53蛋白抗體及試劑盒均購自福建邁新公司。以微波修復(fù)法進(jìn)行抗原修復(fù)，DAB顯色。以已知陽性片為陽性對照，以PBS代替一抗為陰性對照。免疫組化結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)為：P53陽性信號定位在細(xì)胞核。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS 11.0進(jìn)行多項(xiàng)分析和比較，計(jì)數(shù)資料組間比較采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 P53在TNBC與NTNBC組織中的表達(dá)差異分析

P53在TNBC中的表達(dá)明顯高于NTNBC，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

表1 P53在TNBC及NTNBC中的表達(dá)[n（%）]

2.2 TNBC及NTNBC組織學(xué)分級的差異分析

TNBC的組織學(xué)高級別者明顯多于NTNBC，差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。見表2。

2.3 P53在不同組織學(xué)級別乳腺癌中的表達(dá)差異分析

P53在不同組織學(xué)級別乳腺癌中的表達(dá)差異顯著，差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。見表3。

表2 TNBC及NTNBC組織學(xué)分級的差異[n（%）]

表3 P53在不同組織學(xué)級別乳腺癌中的的表達(dá)差異[n（%）]

3 討論

乳腺癌是一類異質(zhì)性明顯的惡性腫瘤，在組織學(xué)形態(tài)、免疫表型、生物學(xué)行為、預(yù)后及治療反應(yīng)上存在很大差異。近年來，隨著ER、PR及HER-2等基因標(biāo)志物在乳腺癌病理學(xué)中的常規(guī)應(yīng)用，一種根據(jù)基因表達(dá)譜分析的既能反映預(yù)后又可指導(dǎo)臨床治療的乳腺癌分子病理分類法形成。根據(jù)乳腺癌基因表達(dá)的不同，可將乳腺癌分成導(dǎo)管A型、導(dǎo)管B型、Her-2過表達(dá)型、基底細(xì)胞樣型和正常乳腺樣型5個(gè)亞型，各亞型的病理學(xué)特征、生物學(xué)行為、臨床治療和預(yù)后明顯不同[1-3]。TNBC作為其中一類高危乳腺癌，已成為近年來研究的熱點(diǎn)。這類乳腺癌主要發(fā)生于絕經(jīng)前的年輕女性，尤其是那些在哺乳期使用抑泌乳藥的人群中有較高的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。患者多有乳腺癌家族史及乳腺癌易感基因-1（breast cancer susceptibility gene-1，BRCA-1）突變[4]。TNBC 的組織學(xué)類型絕大部分表現(xiàn)為導(dǎo)管癌，還有大汗腺癌、混合性癌、小葉癌及髓樣癌等。TNBC相對于非TNBC，腫瘤的組織學(xué)分級高，侵襲性強(qiáng)。Tan等[5]研究發(fā)現(xiàn)，大多數(shù)TNBC組織學(xué)分級為三級，并推斷TNBC與NTNBC在組織病理學(xué)特征方面的差異主要源于組織學(xué)級別上的差別。TNBC對內(nèi)分泌治療和Herceptin靶向治療效果欠佳，總體預(yù)后差，易復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移。

P53基因是迄今發(fā)現(xiàn)的與人類腫瘤相關(guān)性最高的基因。野生型P53是一種抑癌基因，它定位于17號染色體短臂，在細(xì)胞周期的G1期起關(guān)鍵的調(diào)控作用，是細(xì)胞增殖和分化的重要調(diào)控因子，在正常細(xì)胞中可以抑制細(xì)胞增殖。P53基因發(fā)生突變后，失去了對細(xì)胞增殖、凋亡及DNA修復(fù)等的調(diào)控作用，由抑癌基因轉(zhuǎn)變?yōu)榘┗颍哂写龠M(jìn)惡性轉(zhuǎn)化的功能，與被激活的原癌基因起協(xié)同作用，導(dǎo)致細(xì)胞異常增生，最終形成惡性腫瘤[6]。絕大多數(shù)惡性腫瘤和癌前病變中存在P53基因突變。有研究發(fā)現(xiàn)，乳腺癌患者中50%～70%有突變型P53蛋白的表達(dá)，有家族史的乳腺癌其P53基因突變率高于散發(fā)性乳腺癌。P53基因突變是乳腺癌發(fā)生發(fā)展過程中的早期事件及重要原因。隨著腫瘤的進(jìn)展，P53蛋白表達(dá)的陽性率明顯升高，患者復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移的風(fēng)險(xiǎn)增加，生存期明顯縮短。因此，P53的表達(dá)可作為判斷乳腺癌生物學(xué)行為、復(fù)發(fā)和預(yù)后的一項(xiàng)重要指標(biāo)[7-8]。

本研究結(jié)果顯示，P53在TNBC組中的表達(dá)明顯高于NTNBC，提示TNBC細(xì)胞具有更強(qiáng)的增殖活性，更易發(fā)生轉(zhuǎn)移及復(fù)發(fā)，預(yù)后更差，這與文獻(xiàn)報(bào)道的結(jié)果一致[9]。有研究表明TNBC的組織學(xué)分級多為高級別。與其他類型乳腺癌相比，TNBC細(xì)胞分化差，組織學(xué)1級患者比率較小。本研究結(jié)果亦顯示TNBC的組織學(xué)高級別者明顯多于NTNBC。同時(shí)，P53在不同組織學(xué)分級中的表達(dá)率分別為：Ⅰ級20.0%，Ⅱ級41.9%，Ⅲ級89.7%，三組比較差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），提示隨著組織學(xué)分級的增高，P53陽性率越高，也與文獻(xiàn)報(bào)道的結(jié)果一致[10]，提示P53可以作為判斷乳腺癌細(xì)胞分化程度的一項(xiàng)重要指標(biāo)。

[1]Perou CM，Sorlie T，Eisen MB，et al.Molecular portraits of human breast tumours[J].Nature，2000，406（6797）：747-752.

[2]Sorlie T，Tibshirani R，Parker J，et al.Repeated observation of breast tumor subtypes in independent gene expression data sets[J].Proc Natl Acad Sci，2003，100（14）：8418-8423.

[3]Nielsen TO，Hsu FD，Jensen K，et al.Immunohistochemical and clinical characterization of thebasal-likesubtypeof invasive breast carcinoma[J].Clin Cancer Res，2004，10（16）：5367-5374.

[4]黃玥，盧崇亮.三陰性乳腺癌的研究進(jìn)展[J].中國現(xiàn)代普通外科進(jìn)展，2010，13（9）：726-729.

[5]Tan DS，MarchióC，Jones RL，et al.Triple negative breast cancer：molecular profiling and prognostic impact in adjuvant anthracycline treated patient[J].Breast Cancer Res Treat，2008，111（1）：27-44.

[6]Iwamb P，Crawford L.Characterization of the human p53 gene [J].Mol cell Biol，1986，6（5）：1379-1385.

[7]Bidard FC，Matthieu MC，Chollet P，et al.p53 status and efficacy of primary anthracyclines/alkylating agent-based regimen according to breast cancer molecular classes [J].Ann Oncol，2008，19 （7）：1261-1265.

[8]Menezes MV，Cestari AL，Almeida O，et al.Protein expression of Cerb-2 and p53 in normal ducts，ductal carcinoma in situ and invasive carcinoma of the same breast[J].Sao Paulo Med J，2006，124（3）：121-124.

[9]Rakha EA，Sayed ME，Green AR，et al.Prognostic markers in triplenegative breast cancer[J].Cancer，2007，109（1）：25-32.

[10]吳祥德，董守義.乳腺疾病診治[M].2版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2009：214-215.