血細(xì)胞分析儀與手工法計(jì)數(shù)血細(xì)胞的臨床對(duì)比研究

高全成 孫永鋒

近年來，血細(xì)胞分析儀以其高精度、高靈敏、高準(zhǔn)確性，快速，重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)而受到臨床的重視，但由于其局限性的測定原理，其在實(shí)際工作中還存在一定的偏差［1］。因此，為對(duì)比探討血細(xì)胞分析儀與手工法計(jì)數(shù)血細(xì)胞的方法和結(jié)果，為臨床檢驗(yàn)提供參考，特回顧性分析來本院體檢的60例健康檢查人員，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析于2010年3月至2011年3月來本院體檢的60例健康檢查人員靜脈血，先編為試驗(yàn)組，后全編為對(duì)照組，其中男32例，女28例;年齡16歲～63歲，平均年齡(46.9 ±9.8)歲。

1.2 方法 先用EDTA-K2對(duì)所有健康測試者抗凝，用SYSMEX XT-1800i型血細(xì)胞分析儀儀測定白細(xì)胞計(jì)數(shù)(WBC)、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(RBC)、血小板(PLT)、血紅蛋白(Hb)4項(xiàng)指標(biāo)及及WBC分類結(jié)果(均按儀器操作說明書進(jìn)行儀器操作)，并同時(shí)用手工法測定，均重復(fù)測定每個(gè)項(xiàng)目2次后取平均值。采用WHO推薦的氰化高鐵血紅蛋白法手工測定Hb，用由上海伊華醫(yī)學(xué)科技有限公司提供的參比液在722分光光度計(jì)上比色測出吸光度值［2］。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析應(yīng)用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件，評(píng)分?jǐn)?shù)據(jù)以表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用χ2檢驗(yàn)，P ＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2組的血細(xì)胞檢查結(jié)果對(duì)比 2組WBC、RBC、PLT三項(xiàng)指標(biāo)測定結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，但試驗(yàn)組Hb測定值高于對(duì)照組(P＜0.05)，并由儀器的質(zhì)控結(jié)果可知各儀器4項(xiàng)指標(biāo)測定值的CV(%)均小于5%。見表1、2。

表1 2組血細(xì)胞檢查結(jié)果對(duì)比 n=6，

表1 2組血細(xì)胞檢查結(jié)果對(duì)比 n=6，

注:與對(duì)照組比較，*P ＜0.05

組別 WBC(×109/L)RBC(×1012/L) Hb(g/L) PLT(×109/L)試驗(yàn)組 6.3 ±1.0 5.3 ±0.5 147 ±11*210±38對(duì)照組6.3 ±1.0 5.3 ±0.5 125 ±11 214 ±39

表2 血常規(guī)4項(xiàng)指標(biāo)全血質(zhì)控物CV值 %

2.2 2組的白細(xì)胞分類檢查結(jié)果對(duì)比 2組WBC分類相比，中間細(xì)胞計(jì)數(shù)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，中性粒細(xì)胞與淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。見表3。

表3 2組WBC分類結(jié)果對(duì)比 n=60，%，

表3 2組WBC分類結(jié)果對(duì)比 n=60，%，

WBC分類 儀器檢測法 手工鏡檢法 P值11.3 ±7.5 9.4 ±3.9 ＜0.0532 .9 ±7.1 32.8 ±7.0 ＞0.05中性粒細(xì)胞 56.3±8.7 56.8±8.4 ＞0.05中間細(xì)胞淋巴細(xì)胞

3 討論

目前，隨著不斷發(fā)展的醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)，檢驗(yàn)科不斷進(jìn)入大量的新設(shè)備新技術(shù)，自動(dòng)化程度得到顯著提高。因此，隨著現(xiàn)代化儀器的進(jìn)入，細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查逐漸被淡化［3］。但血液中所有細(xì)胞尤其是異常細(xì)胞都不可能被任何先進(jìn)的血液分析儀所完全識(shí)別，還必須依靠顯微鏡檢查技術(shù)來解決問題［4］。而常規(guī)鏡下血涂片檢查應(yīng)當(dāng)是血細(xì)胞檢測的一個(gè)重要組成部分，有時(shí)還能驗(yàn)證和評(píng)價(jià)血液分析儀結(jié)果的準(zhǔn)確性。

3.1 各血細(xì)胞檢測結(jié)果分析 據(jù)李海蓉［5］研究發(fā)現(xiàn)，血細(xì)胞分析儀效率高，操作簡單，穩(wěn)定性好，重復(fù)性佳，可控制計(jì)數(shù)誤差在5%以內(nèi)，同時(shí)儀器計(jì)數(shù)還避免了由于沖池、稀釋、人工計(jì)數(shù)等而導(dǎo)致的人為誤差，使工作效率大大提高。而傳統(tǒng)的手工法雖然改善了計(jì)數(shù)盤和微量吸管的準(zhǔn)確度和精密度，但操作十分費(fèi)時(shí)復(fù)雜，并不十分符合當(dāng)前臨床診斷的需求［6］。本研究中兩組間相比，WBC、RBC、PLT三項(xiàng)指標(biāo)測定結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，在一定程度上證明試驗(yàn)組的SYSMEX XT-1800i型血細(xì)胞分析儀可作為手工法的較好替代方法，其所測的3項(xiàng)指標(biāo)均與手工法所測結(jié)果關(guān)系密切。而試驗(yàn)組Hb測定值高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，我們認(rèn)為，其原因可能是由于722分光光度計(jì)儀器過于陳舊，降低了其靈敏度，使整個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線線性下降，使結(jié)果降低有關(guān)。因此于雪晶等［7］認(rèn)為，這些都有待于在今后的工作中進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量，或更新有關(guān)檢測儀器來證實(shí)。本研究中，每天用該儀器對(duì)全血質(zhì)控物進(jìn)行測定，由儀器的質(zhì)控結(jié)果可知各儀器4項(xiàng)指標(biāo)測定值的CV(%)均小于5%，結(jié)果表明該臺(tái)血液分析儀各項(xiàng)檢測指標(biāo)的結(jié)果精密度好、穩(wěn)定性高。但值得注意的是，血液分析儀僅能從細(xì)胞的大小、多少、比例、分布等指標(biāo)顯示正常或異常，特別是在以細(xì)胞結(jié)構(gòu)異常為主時(shí)常不能分析其原因，并且在細(xì)胞大小，數(shù)量變化不大的病理細(xì)胞檢測中顯得無能無力［8］。而在臨床疾病中，血細(xì)胞常表現(xiàn)出量和質(zhì)的輕微異常，因此手工技術(shù)法仍是觀察疾病的一個(gè)極其重要、無法替代的檢查手段。

3.2 各白細(xì)胞分類結(jié)果檢查分析 本研究中血細(xì)胞分析儀照射細(xì)胞是采用半導(dǎo)體激光，以便得到每個(gè)細(xì)胞的前向散射光、側(cè)向散射光和側(cè)向熒光等各種信號(hào)。依據(jù)這些信號(hào)，白細(xì)胞被儀器分為中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、嗜酸粒細(xì)胞、嗜堿粒細(xì)胞和單核細(xì)胞5類;而經(jīng)典的白細(xì)胞分類法便是人工顯微鏡白細(xì)胞分類法，能夠根據(jù)白細(xì)胞形態(tài)特征進(jìn)行準(zhǔn)確地計(jì)數(shù)分類［9］。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn):2組間WBC分類相比，中間細(xì)胞計(jì)數(shù)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，即儀器法明顯高于手工法。而中性粒細(xì)胞與淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，即淋巴細(xì)胞和中性粒細(xì)肥計(jì)數(shù)兩方法的結(jié)果較一致，與趙衍江［10］的報(bào)道基本一致，但相關(guān)系數(shù)均接大于0.9。但兩種檢測方法的中間細(xì)胞計(jì)數(shù)相關(guān)系數(shù)僅為0.5，相關(guān)性相對(duì)較差。這可能是由于儀器測定細(xì)胞數(shù)目在進(jìn)行低比率細(xì)胞檢測時(shí)較多，而手工只分類100個(gè)白細(xì)胞并且血片中的白細(xì)胞常不均勻分布，因此使手工漏檢的可能性增大。但手工法可具體分類出嗜堿性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞的相應(yīng)百分比;還可檢出如中毒顆粒、分葉過多、空泡變性等白細(xì)胞形態(tài)異常及腫瘤細(xì)胞或白血病細(xì)胞。

總之，在WBC、RBC、PLT三項(xiàng)上，2組檢測方法無差異;但在中間細(xì)胞和Hb計(jì)數(shù)上存在差異，此點(diǎn)應(yīng)當(dāng)在實(shí)驗(yàn)室檢測中推廣使用。

1 曾健兵，黃文勇，雷小平.手工血細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察與自動(dòng)分析儀的檢測比較.臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2010，9:770-771，774.

2 Flores P，Guimaraes J，VideiraAmaral JM.Th1 andth-cytokine expression in nasopharyngeal secretions during acute bronchiolitis in children younger than two years old.Allergol Immunopathol，2010，10:3008.

3 杜明，夏和鳳，紀(jì)桂香.五分類血細(xì)胞分析儀與手工鏡檢測定結(jié)果比較.中國誤診學(xué)雜志，2008，8:2853-2854.

4 Chow L，Aslam R，Speck ER，et al.A murine model of severe immune thrombocytopenia is induced by antibody-and CD8+T cell-mediated responses that are differentially sensitive to therapy.Blood，2010，115:1247-1253.

5 李海蓉.手工法與血細(xì)胞分析儀計(jì)數(shù)血小板的比較.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2009，6:614-615.

6 Tasker L，Lindsay RW，Clarke BT，et al.I nfection ofmice with respiratory syncytial virus during neonatal life primes for enhanced antibody and T cell res ponses on secondary challenge.Clin Exp Immunol，2008，153:277-288.

7 于雪晶，于松，孟慶敏.血細(xì)胞分析儀和手工法計(jì)數(shù)血細(xì)胞結(jié)果對(duì)比.職業(yè)與健康，2008，24:2534-2535.

8 Nurden AT，Viallard，JF，Nurden P.New-generation drugs that stimulate platelet production in chronic immune thrombocytopenic purpura.Lancet，2009，373:1562-1569.

9 Olcay L，Tuncer AM，Okur H，et al.Excessive naked megakaryocyte nuclei in myelodysplastic syndrome mimicking idiopathic thrombocytopenic purpura:a complicated pre-and post-transplantation course.Pediatr-Hematol Oncol，2009，26:387-397.

10 趙衍江.136例血液疾病血細(xì)胞分析儀篩查手工復(fù)檢的報(bào)告.遼寧醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2008，29:426.