老年慢性乙型肝炎患者乙肝病毒大蛋白與HBV DNA的相關(guān)性

鄭 蘭 汪 潔 張為元

(上海市奉賢區(qū)古華醫(yī)院感染科，上海 201100)

乙型肝炎是一個全球性嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問題，我國約有9.75%的人群為乙型肝炎病毒表面抗原 (HBsAg)陽性〔1〕。近年來，隨著對乙肝表面抗原大蛋白研究的不斷深入，對于其在乙肝發(fā)病機制、病毒感染及復(fù)制等過程中的作用日益受到關(guān)注〔2〕。本文通過檢測老年慢性乙型肝炎患者乙肝病毒大蛋白(HBV-LP)及HBV DNA，探討兩者之前的關(guān)系，以期為慢性乙型肝炎的診斷和治療提供參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 我科2007年6月至2010年6月診治的慢性乙型肝炎患者60例，其中男性38例，女22例，年齡62～72歲，平均(68.5±7.9)歲，所有患者均經(jīng)肝組織病理活檢確診為慢性乙型病毒性肝炎。排除合并嚴(yán)重肝臟、腎臟功能不全及合并其他肝炎病毒感染的患者。將本組60例患者作為觀察組，同時選取60例在我院健康體檢無乙型肝炎及其他相關(guān)疾病的健康人群作為對照組，兩組患者資料無顯著差異，有可比性。

1.2 檢測方法 采用酶聯(lián)免疫吸附試驗進行HBV-LP檢測。ETI-max3000全自動酶免分析儀(德國 Diasorin公司產(chǎn)品)，PE5700自動熒光PCR儀(美國PerKin Elmer公司產(chǎn)品)，HBVLP酶聯(lián)免疫吸附試驗定量檢測試劑盒(北京熱景生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品)。采用熒光定量法檢測HBV DNA，檢測試劑盒采用深圳匹基生物工程公司產(chǎn)品，陽性為≥1×103copies/ml，陰性時取實測拷貝值，低于5.0×102copies/ml(靈敏度)時作零拷貝處理。乙肝兩對半標(biāo)志物采用時間分辨免疫熒光法(江蘇新波公司ANYTEST-NZ)檢測。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS13.0軟件進行統(tǒng)計學(xué)處理，數(shù)據(jù)以x±s表示，計數(shù)資料采用χ2檢驗，計量資料采用t檢驗，單因素相關(guān)性分析采用秩檢驗。

2 結(jié)果

本組60例HBsAg陽性患者，40例(66.67%)HBV-LP陽性，38例(63.33%)HBV DNA陽性，兩種血清標(biāo)志物檢測陽性率無顯著差異(χ2=0.146，P＞0.05)。其中大三陽組28例，小三陽組32例，兩組HBV-LP 差異顯著(χ2=16.21，P ＜0.05)，兩組HBV DNA差異顯著(χ2=15.23，P＜0.05)，對照組人群血清中檢測不到HBV-LP與HBV DNA的存在。采取相關(guān)性檢驗，HBV-LP與HBV DNA呈正相關(guān)(r=0.356，P＜0.05)。見表1。

表1 兩組研究對象HBV-LP與HBV DNA檢測結(jié)果〔n(%)〕

3 討論

老年乙肝患者較中青年患者而言，其發(fā)病特點有其自身的特殊性，發(fā)病遲緩、自覺癥狀輕，但病情發(fā)展迅速，發(fā)生肝衰竭的比例明顯升高，而且易產(chǎn)生肝性腦病，嚴(yán)重威脅患者的生命安全。外周血HBV DNA檢測是用來判定乙型肝炎患者和HBV攜帶者有無傳染性的最直接，同時也是最可靠的指標(biāo)〔3〕。研究表明，HBV感染者血清中有直徑22 nm的小球形顆粒、直徑22 nm和長度100～1 000 nm的管狀顆粒、Dane顆粒等三種不同形態(tài)的病毒顆粒;而HBV外膜包括主蛋白(HBsAg)、中蛋白(M蛋白)和大蛋白(L蛋白)，這三種蛋白在三種不同顆粒表面表達情況不同。在病毒非復(fù)制期，血清中HBV-LP水平很低甚至沒有，主要分布于肝細(xì)胞中。因此，臨床上可通過檢測血清中有無HBV-LP或其血清含量來判斷患者體內(nèi)HBV病毒是否處于復(fù)制狀態(tài)〔4〕。

本文研究結(jié)果顯示，大三陽組與小三陽組HBV DNA與HBV-LP檢測率均有顯著差異，而且相關(guān)性檢驗提示，HBV DNA與HBV-LP相關(guān)性很好。過去常將HBeAg的存在作為判斷HBV復(fù)制與否的參考依據(jù)，認(rèn)為HBeAg陰轉(zhuǎn)是HBV復(fù)制減弱、傳染性降低及預(yù)后良好的象征〔5〕。但多年的臨床實踐及各種文獻報道表明，即使HBeAg轉(zhuǎn)陰后，患者體內(nèi)仍有HBV復(fù)制，而且這些仍在體內(nèi)活躍復(fù)制的HBV可采用熒光定量PCR法檢測到，目前認(rèn)為引起這一現(xiàn)象的原因為免疫清除不全或HBV前C區(qū)末端發(fā)生變異，而且此類患者常為慢性乙肝患者;且有相關(guān)研究證實，此類患者更易發(fā)生肝硬化及肝癌，預(yù)后差〔6〕。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，對于小三陽患者檢測HBV-LP可以更準(zhǔn)確地判斷患者體內(nèi)HBV復(fù)制情況;而且，本文還發(fā)現(xiàn)在健康人群中未能檢測到HBV-LP，提示只有HBV攜帶者或乙型肝炎患者體內(nèi)才能檢測到HBV-LP。

HBV DNA陽性往往被認(rèn)為是判斷HBV感染及復(fù)制的金標(biāo)準(zhǔn)，HBV DNA的出現(xiàn)早于HBV其他血清標(biāo)志物，其拷貝數(shù)可直接反映血清HBV復(fù)制與傳染狀態(tài)，因此，PCR定量檢測HBV DNA在乙型肝炎的早期診斷中具有重要價值;研究還表明，HBV DNA血清水平可反映病毒復(fù)制水平，但是并不能完全反映靜息期肝細(xì)胞HBV復(fù)制情況，HBV DNA陰性并不代表體內(nèi)HBV被完全清除〔7〕。

綜上所述，HBV-LP作為判斷患者體內(nèi)HBV病毒是否復(fù)制的重要血清標(biāo)志物與HBV DNA明顯相關(guān)，根據(jù)兩者血清水平可以對患者體內(nèi)HBV復(fù)制及感染等進行評估和判斷，有助于采取正確及時的治療措施，促進患者HBV清除和疾病康復(fù)。

1 Pungpapong S，Kim WR，Poterucha JJ.Natural history of hepatitis B virus infection:an update for clinicians〔J〕.Mayo Clin Proc，2007;82(8):967-75.

2 毛遠麗，李伯安，馬洪濱，等.乙肝患者外膜蛋白血清學(xué)檢測及對于判定HBV DNA復(fù)制的意義〔J〕.中華病毒和臨床實驗學(xué)雜志，2006;20(3):276-8.

3 Bang G，Kim KH，Guamieri M，et al.Effect of mutating the two cysteines required for HBe antigenicity on hepatitis B virus DNA replication and Virion secretion〔J〕.Virology，2005;332(11):216-24.

4 戴利成，王翠妮，何建方，等.血清乙肝病毒外膜大蛋白檢測及其與病毒復(fù)制的關(guān)系〔J〕.中華實驗和臨床病毒學(xué)雜志，2006;20(3):235-7.

5 魏紅山，黃玉波，宋淑靜，等.e抗原陰性慢性乙型肝炎患者血清表面抗原大蛋白水平與乙型肝炎病毒DNA之間的關(guān)系〔J〕.中華肝臟病雜志，2006;7:543-4.

6 王 宇，楊延敏.乙型肝炎患者檢測乙肝表面抗原大蛋白和前S1抗原的區(qū)別和臨床意義〔J〕.大連醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2010;32(6):706-8.

7 童海江，王亞玲，夏偉仁.乙肝病毒大蛋白檢測在乙型肝炎診斷及治療中的意義〔J〕.放射免疫學(xué)雜志，2007;20(2):188-90.