高原玉樹地區藥食兩用植物蕪菁的抗衰老作用

王 花 吳 萍 文紹敦

(青海衛生職業技術學院，青海 西寧 810000)

延緩衰老和探討衰老的機制是當前醫學研究的熱點，而尋找天然、有效、安全、高質量，可長期服用，具有“食醫同源”、“醫膳同功”、延緩衰老功能的食品是如今醫藥領域研究方向之一。高原植物“蕪菁”，是生長在海拔3 800 m以上的一種藥食兩用特有經濟植物，有利五臟，輕身益氣，常食通中，令人肥健，消食下氣。日常生活觀察有抗衰老作用。本文主要探討蕪菁的抗衰作用。

1 材料與方法

1.1 動物 健康清潔級小鼠140只，體重(22±2)g，雌雄各半，由青海地方病病研究所實驗動物中心提供，生產許可證SCXK(青)20050001。在溫度為(22±2)℃、濕度適宜、12 h光照交替的環境中飼養。自由進食標準飼料、攝水，水源為自來水。隨時添加飼料，墊料為干燥潔凈的細刨花，每天換水1次，2 d換墊料1次。

1.2 藥物與試劑 蕪菁由青海大學醫學院藥學系生藥實驗室提供;維生素E膠丸由青島雙鯨藥業有限公司生產，國藥準字H37023086;D-半乳糖由上海制藥廠生產，批號:101016;0.9%生理鹽水由山東齊都藥業有限公司生產，國藥準字H37020764;丙二醛(MDA)，超氧化物歧化酶(SOD)檢測試劑盒，谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)試劑盒，考馬斯亮藍組織蛋白檢測試劑盒均購自南京建成生物工程研究所。

1.3 實驗樣品來源及處理 實驗樣品為青海高原玉樹地區當年產植物蕪菁干燥塊根，洗凈、晾干、搗碎，研末，依次用水、95%乙醇、石油醚進行提取，重復回流提取2次，殘渣用水煮45 min，濾取水提取液與前2次提取液合并，減壓濃縮后分別將上述提取物配制成濃度為5 mg/ml的溶液，避光低溫保存。

1.4 方法

1.4.1 動物分組 根據成組比較均數所需樣本的公式，估計樣本大約20只。將140只小鼠，雌雄各半，適應性喂養 1 w后，將小鼠雌雄分別編號，應用隨機數字表分配為7組:空白對照組(空白組)、維生素E陽性對照組(VE組)、衰老模型對照組(衰老組)、蕪菁水提組(水提組)、蕪菁乙醇提組(醇提組)、蕪菁石油醚提組(醚提組)、蕪菁水醇醚混合提組(混合組)，各組20只。

1.4.2 造模 按文獻〔1〕方法操作，采用 D-半乳糖皮下注射法制備小鼠亞急性衰老模型。除空白組外，其余各組小鼠每日頸背部皮下注射5%D-半乳糖生理鹽水溶液，注射容量為10 ml/kg。每天1次，連續6 w，制備亞急性衰老小鼠模型。空白組頸背部皮下注射同等容量的生理鹽水。動物每周稱一次體重，根據體重變化調整藥量。

1.4.3 給藥 造模的同時，水提組、醇提組、醚提組、混合提組以每日400 mg/kg提取物灌胃，空白組、衰老組以同等容量生理鹽水灌胃，VE組以VE 0.5 ml/d灌胃，連續給藥42 d。每周稱體重一次，根據體重調整用藥量。

1.4.4 標本采集與制備 末次給藥后，禁食不禁水24 h，將小鼠摘除眼球取血，取血量大約為 0.5 ml。血液肝素抗凝靜置30 min，在4℃下3 000 r/min離心10 min，常規分離血清，取上層血清備用。用于血清中SOD、MDA的測定。最后斷頭處死小鼠。于無菌條件下迅速取出肝、胸腺、脾，用冰生理鹽水沖洗后，用濾紙吸干水分，稱重，部分肝制備成10%的肝組織勻漿用于GSH-Px的測定。

1.5 血清中SOD、MDA、GSH-Px的測定 參照南京建成生物工程公司試劑盒說明書的方法步驟測定。

1.6 小鼠免疫器官重量指數之測定 各組小鼠處死前稱重，處死后分別取出胸腺、脾臟剝離干凈后于電子天平上稱重，計算各免疫器官重量的指數。

1.7 統計學方法 采用SPSS17.0統計軟件進行單因素方差分析，兩組間比較采用 LSD-t檢驗，數據以x±s表示。

2 結果

2.1 動物體重與外觀特征的變化 實驗開始前，衰老組小鼠與正常小鼠體重無差別，動物毛色白，有光澤，精神狀態良好。隨著實驗的進展，各組小鼠體重逐漸增加，實驗18 d后造模小鼠均出現皮毛稀疏，毛色無光澤，形體消瘦，反應遲緩，攝食量減少。實驗結束時，空白組小鼠活潑好動，毛色光澤，飲食如常，大便為正常褐色軟便。衰老組小鼠明顯出現皮毛稀疏，毛色無光澤，形體消瘦，反應遲緩，攝食量減少。醚提組、醇提組和VE組小鼠外形基本無變化，活動頻率如常，攝食尚可，大便為深褐色軟便。混合提組、水提組小鼠毛色較暗，反應略顯遲緩，少數小鼠大便稀。上述結果表明醚提組、醇提組和VE組小鼠的一般狀況好于其他組小鼠。

2.2 免疫學指標脾和胸腺重量指數的影響 見表1。蕪菁不同提取物組間比較，對脾指數的影響，除水提組與混合組外，各組均有統計學意義(P＜0.05)，醚提組、醇提組和混合組作用優于VE;對胸腺指數的影響，醚提組和水提組有統計學意義(P＜0.05)，蕪菁不同提取組作用優于VE組。

表1 蕪菁對D-gal誘導的亞急性衰老小鼠脾胸腺指數的影響(x ± s，n=20)

2.3 自由基指標的比較 對血清SOD、MDA和肝組織中GSH-Px含量的變化，見表2。蕪菁不同提取組組間比較，對血清SOD、MDA和肝組織中GSH-Px含量的影響，除水提組與混合組外，各組相互之間均有統計學意義(P＜0.05)，醇提、醚提組療效優于VE組。

表2 各組小鼠治療后血清SOD、MDA含量、肝組織GSH-Px活力變化比較(x ± s，n=20)

3 討論

高原植物“蕪菁”是一種藥食兩用特有經濟植物。據《晶珠本草》記載:蕪菁味辛，性溫;治培根病、隆病，生赤巴。《本草綱目》記載:它出自西番土谷渾。根葉苦溫無毒，利五臟，輕身益氣，常食通中，令人肥健，消食下氣。現代醫藥研究表明:蕪菁肉質根中含有大量的VA、VB、VC及多種糖類、氨基酸、鈣、鐵、磷等礦物質，具有抗缺氧、抗氧化、護肝和增強免疫功能的作用。楊紅等〔2〕對新疆蕪菁的初步營養分析表明，其含有豐富的維生素和微量元素，如 β-胡蘿卜素、Cu、Zn、Se、Fe、Mn。黃酮類物質是蕪菁莖葉中主要成分，含2.537%以上。蕪菁又是十字花科植物，十字花科植物因富含營養素及多種具抗突變、抗癌活性的物質而被營養學家們所推崇。人們已從十字花科類蔬菜白菜、甘藍等中提取出了具明顯抗突變、抗癌、抗氧化作用的活性物質，如3-吲哚、萜類、單萜烯、三萜烯、親核素等〔3〕。馬龍等〔4〕研究表明新疆的蕪菁可能有抗衰老的作用。因此，本文結果表明衰老小鼠的抗氧化指標的SOD和GSH-Px活性均有明顯降低，MDA含量明顯升高，脾和胸腺指數降低，說明衰老小鼠模型造模成功，蕪菁不同提取物和VE能提高衰老小鼠抗氧化能力，且蕪菁不同提取物具有直接或間接地降低機體內脂質氧化程度，增強機體清除自由基的能力，保護細胞的結構和功能的作用，從而達到改善機體物質代謝紊亂及延緩機體衰老的功效。說明蕪菁對于D-半乳糖誘發的亞急性衰老模型有明顯的延緩衰老作用，其具體機制有待我們進一步深入研究。將為早期預防衰老，延緩衰老提供客觀的理論基礎和試驗依據，為臨床開發研制新的延緩衰老中藏藥產品奠定初步基礎。

1 徐叔云，卞如鐮，陳 修.藥理實驗方法學〔M〕.第3版.北京:人民衛生出版社，2001:1465-7.

2 楊 紅.蕪菁莖葉中黃酮類物質初探〔J〕.西昌高等專科學校學報，2003;15(2):118-9.

3 Wattenberg LW.Inhibition of carcinogenesis by minor dietary constituents〔J〕.Cancer Res，1992;52:2083.

4 馬 龍，屈衛東，鄧淑文，等.新疆蕪菁抗衰老作用的實驗研究〔J〕.新疆醫學院學報，1998;21(1):34-7.