幾種中草藥提取物防治萵苣霜霉病研究

黃興學，王斌才，胡偵華，林處發，周國林，汪愛華，鄧耀華，張潤花，姚芳

（武漢市蔬菜科學研究所，430345）

萵苣霜霉病是萵苣上的毀滅性病害，化學防治是當前控制該病的主要措施，但由于化學殺菌劑連續使用，病菌的抗藥性越來越強，而為了提高防治效果又不得不增加施藥量和施藥次數，導致農藥殘留問題日趨嚴重。有機蔬菜不能使用任何化學藥劑，目前對萵苣霜霉病尚無有效辦法，急需研制出對該病治療和預防比較有效的且對蔬菜和環境友好的藥劑。植物源殺菌劑符合有機蔬菜生產標準，針對其他病害的植物源殺菌劑已有報道，但是對萵苣霜霉病有效的植物源殺菌劑尚少有研究，本研究報道了幾種中草藥防治萵苣霜霉病的藥效試驗。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

供試病原菌為萵苣霜霉病 （Bremia lactucae Regel），萵苣品種為武漢花葉萵苣。

1.2 試驗方法

①植物中草藥提取物的制備 將各中藥稱取30 g，加入1 500 mL水用煎藥壺熬煮。熬煮完成后過濾，用水定容至500 mL，即為60 g/L的藥劑。如果是混合物提取液，總質量100 g，濃度60 g/L。

②抑制孢子囊萌發試驗 從大田采回萵苣霜霉病病葉，用自來水洗去原有孢子囊，保濕24 h后，用毛筆輕輕將病斑處新產生的病原孢子囊刷入不同處理藥液中，配制成含藥孢子懸浮液，以不含藥的孢子懸浮液為對照。用懸滴法測定孢子萌發情況，于25℃下培養4 h后，顯微鏡下檢查萌發率，計算抑制率：抑制率（%）＝[（對照萌發率-處理萌發率）/對照萌發率]×100%。

③苗期試驗 將供試藥劑分別配制成12.5，25，50，100 mg/L， 以 500 mg/L 甲霜靈為標準藥劑對照，清水為空白對照，每個處理重復3次。當萵苣長出2片葉時進行試驗。a.預防作用測定試驗。用點滴法施藥，保濕24 h后，再用點滴法接菌保濕24 h，然后轉入常規管理，待清水對照充分發病后，調查防治效果。b.治療作用測定試驗。方法與保護作用基本相同，區別在于先接菌，保濕24 h后再施藥。分級方法及計算公式：0級，葉片無病斑；1級，病斑面積占整個葉片面積5%以下；3級，病斑面積占整個葉片面積6%～10%；5級，病斑面積占整個葉片面積11%～25%；7級，病斑面積占整個葉片面積26%～50%；9級，病斑面積占整個葉片面積的50%以上。病情指數＝（∑病級葉片數×該病級數值）/（調查總葉數×最高病級數值）；相對防效（%）＝[（對照區病情指數-處理區指數）/對照區病情指數]×100%。

1.3 數據分析

用Excel 2003進行數據統計及分析，用SAS 8.1進行方差分析。

2 結果與分析

2.1 中草藥提取液對孢子萌發的影響

從表1可以看出，8種中草藥提取液對萵苣霜霉病孢子的萌發抑制效果以穿心蓮最好，其次是厚樸和牛蒡，其他幾種中草藥提取液對孢子萌發的抑制率均在80%以下，對照最低。

2.2 3種中草藥混合物提取液對萵苣霜霉病孢子的萌發的影響

對萵苣霜霉病孢子萌發最大的用3種中草藥混合物進行室內抑菌測定（表2）。表2結果表明，3種混合物提取液抑制效果比兩種混合物和對照抑制效果好， 穿心蓮∶厚樸∶牛蒡＝2∶1∶1 混合物對萵苣霜霉病孢子的萌發抑制效果最好，其次是 1∶1∶1、1∶2∶1、1∶1∶2。 2種混合物抑制效果比3種混合物抑制效果差，但比對照好，差異達顯著水平。

2.3 中草藥提取物對萵苣苗期霜霉病的防效測定

由表3可知，除了苦參的治療效果，其他提取物的預防和治療效果都顯著高于對照。每一種提取物的預防效果都優于其對萵苣霜霉病的治療效果。從對萵苣霜霉病的預防效果來看，以牛蒡和穿心蓮最佳，顯著高于其他處理。而苦參和黃柏提取物效果較差，與其他中草藥提取物保護效果差異顯著。牛蒡對霜霉病發生后的治療效果優于其他提取物，其次為穿心蓮和厚樸。最差的是對照和苦參。

2.4 中草藥提取物混合液對萵苣霜霉病的田間防效

將對萵苣霜霉病孢子萌發抑制和萵苣幼苗霜霉病田間防效較好的穿心蓮、厚樸和牛蒡混合提取后進行防效測定。結果表明（表4），中草藥混合物對萵苣霜霉病的預防和治療作用分別優于于單個中藥提取物。預防效果和治療效果最好的是穿心蓮∶厚樸∶牛蒡=2∶1∶1 和 1∶1∶2 處理， 較差的是 1∶1∶0處理。

3 小結與討論

從對萵苣霜霉病孢子抑制和田間防效的觀察來說，都是穿心蓮、厚樸和牛蒡效果較好，3種中草藥混合物的防治效果比單個中藥要好。當混合物中穿心蓮和牛蒡比例增加的時候，藥效提高，因此改善防治萵苣霜霉病的中草藥配方，應選用混合制劑，其中穿心蓮和牛蒡是必須的組分，但比例還需要進一步研究。試驗證明，用中草藥提取物防治萵苣霜霉病是可行的。

中草藥制劑對孢子囊萌發的抑制率高于田間試驗的防效，原因可能是孢子萌發試驗測得的僅是藥劑與病原菌相互作用的結果；而田間試驗是藥劑、病原菌、寄主及環境條件之間相互作用的結果。

表1 中草藥提取液對萵苣霜霉病孢子萌發的影響

表2 3種混合物提取液對萵苣霜霉病孢子萌發的影響

表3 中草藥提取物對萵苣苗期霜霉病的防效測定

表4 3種中草藥混合物對萵苣霜霉病田間防效測定

中草藥制劑防治霜霉病的效果與其在田間的穩定性、滲透性、提取介質等有關，為進一步加強其防治效果，減少其有效防治濃度，降低成本，須在劑型、穩定性和滲透性等方面加強研究。另外，因為多種中藥混合物可以通過不同的方式抑制霜霉病的發生和蔓延，所以中草藥的配方還可進一步完善。