酶法和堿性苦味酸速率法測定血肌酐的比較分析

許祖林 易彩響 魯海平 陳桃麗 譚 瓊

宜春新建醫院檢驗科，江西宜春 336000

在中國，腎病患者越來越多，由于各地醫療水平發展的不均恒，許多病人在甲地檢查、乙地治療，或在甲地診斷治療、乙地進行治療后的療效觀察，其中血肌酐測定是腎功能的一個主要指標。但由于各地實驗室檢測方法的不同，正常參考范圍也不一樣，給臨床醫師和患者帶來不便。肌酐測定方法有化學方法和本科學方法，大多數化學方法是根據1886年Jaffe建立的堿性苦味酸反應：肌酐與苦味酸反應生成橘紅色化合物[1]。為了了解這兩種檢測方法的相關性，現隨機抽取了2009年10月—2011年11月來該院門診與住院部患者8份血樣標本共40份作為研究對象，按照美國臨床和實驗室標準協會（CLSI）指南文件EP9-A2[2]的要求，在同一臺儀器上對兩種方法進行比對分析，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

①檢測系統：儀器為Olypus AU400全自動生化分析儀；酶法試劑為積水醫療株社產品，批號801R11，苦味酸試劑為南昌百特生物高新技術有限公司產品，批號111221；校準品為奧林巴斯原裝校準品，批號0114；質控品為奧林巴斯原裝質控品，高值批號0030，低值批號0029。②樣本來源：依照EP9-A2[2]文件，每天隨機抽取該院2012年門診及住院患者8份血樣標本，連續5 d共40份，其中低于正常值（以酶法為準，下同）標本 10份，正常值標本21份，高于正常值標本 9份。（最低值19.6 umol/L，最高值1 795.9 umol/L）

1.2 方法

①按照EP9-A2[2]文件，每天選取8份標本，分別按1→8，8→1，進行重復測定，連續5 d，共檢測40份標本。測定前儀器常規進行保養、校準品定標，每天用兩個濃度質控品進行測定，結果均在控。

1.3 統計方法

2 結果

兩種方法檢測肌酐所得的數據比較，差異有統計學意義（P＜0.01），見表 1。

表1 兩種方法檢測肌酐數據比較（±s）

表1 兩種方法檢測肌酐數據比較（±s）

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兩種方法檢測肌酐的測定結果的相關性、回歸方程以及平均偏倚情況，見表2。

表2 兩種方法檢測肌酐測定結果相關性、回歸方程、平均偏倚

3 討論

肌酐是肌肉中肌酸和磷酸肌酸代謝終產物，人體內的肌酐包括內源性肌酐和外源性肌酐兩部分，在控制外源攝入、未進行劇烈運動條件下，肌酐在血中濃度取決于腎小球濾過率，因此，血肌酐的測定在腎臟疾病的診斷中有非常重要的臨床意義，是反映腎小球濾過功能的主要指標之一。臨床上肌酐測定的常規方法有堿性苦味酸法和酶法，由于存在“假性肌酐”的干擾，人們對堿性苦味酸法進行了各種改進，以提高結果的真實性，并實現自動化分析，但總體而言，沒有從根本上改變其存在非特異性反應的問題。在實際工作中發現，樣品中肌酐在低濃度時，苦味酸法測定結果比酶法測定結果高，在高濃度時苦味酸法測定結果比酶法測定結果低，可能是由于低濃度時，“假性肌酐”發生反應所占比重較大，面酶法特異性高無“假性肌酐”的干擾，高濃度時“假性肌酐”發生反應所占比重相對較小，且由于苦味酸法的線性范圍相對較小，所以測定結果反而比酶法低。

從表1可以看出：兩種方法測定結果比較，差異具有統計學意義（P<0.05），表2可以看出，兩種方法平均偏倚為21.99%，超出了CLLA'88允許誤差，不能為臨床所接受，說明兩者不能使用同一正常參考范圍。但從表2可以看出兩種方法測定結果具有很好的準確性，相關系數（r）為0.998，說明兩種方法檢測結果可以通過線性回歸方程進行相互換算。

綜上所述，酶法測定血肌酐是目前較好的檢測方法，建議各實驗室采用，但由于苦味酸法較經濟，仍有不少實驗室采用。在特定情況下，如腎移植后病人腎功能的觀察，由于治療地與觀察地實驗室使用的方法不同使結果的可比性出現問題時，可以用回歸方程進行數據轉換后進行療效評估。

[1]葉應嫵,王毓三 ,申子瑜.全國臨床操作規程[M].3版.南京:東南大學出版社,2006：465.

[2]Clinical and Laboratory standards Institute Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples[S].EP9-A2,CLSI.2002