ACL TOP定量檢測D-二聚體在肺部疾病診斷中的應用

張灼錦 陳育賢 翁梅超

廣東省梅州市人民醫院檢驗科，廣東梅州 514031

D-二聚體存在于纖溶酶降解因子×IIIa交聯的纖維蛋白一（XDP）可溶性產物中。纖溶酶是一種絲氨酸蛋白酶，當游離于抑制劑時，作用于不溶性交聯纖維蛋白使產生一系列的可溶性降解物。它們的分子量決定于酶的消化程度。這些可溶性纖維蛋白降解產物中含有一種原始纖維蛋白原分子中，或者它的降解產物及可溶性纖維蛋白中沒有的新抗原(D-二聚體片段[1])。測定D-二聚體成了一種診斷血栓和溶栓治療監測所廣泛應用的指標。在深靜脈血栓(DVT)，肺栓塞(PE)，彌散性血管內凝血(DIC)等臨床狀態中發現D-二聚體的水平升高。在正常妊娠過程中D-二聚體的水平也會升高，但是如果非常高的話會伴隨出現并發癥。懷疑患有血栓病的患者進行D-二聚體測定陰性，低臨床可能性，對于深靜脈血栓(DVT)及肺栓塞(PE)有高陰性預測價值[2]，現對該院2010年3月—2012年3月期間收治的136例病例數據進行分析，并報道如下。

1 一般資料

1.1 對象

肺部疾病患者136例，常見癥狀如呼吸困難、咳嗽、胸痛、咯血等。

1.2 儀器

美國IL公司生產的ACL TOP全自動血凝儀。

1.3 試劑

①膠乳試劑：包被有鼠單克隆抗體（MA-8D3）的聚苯乙烯膠乳顆粒凍干懸浮液，與含有牛血清白蛋白、緩沖液，穩定劑和防腐劑的D-二聚體直接對比。②反應緩沖液：磷酸緩沖液，其中含有牛血清白蛋白，穩定劑和防腐劑。

2 方法

①免疫比濁法檢測DD的原理：D-二聚體膠乳試劑是一種大小均一的聚苯乙烯膠乳顆粒懸浮液，這些膠乳顆粒上包被著對纖維蛋白降解產物D-二聚體具有高度特異性的單克隆抗體，當含有D-二聚體的血漿與D-聚體測定試劑盒中的膠乳試劑和試劑緩沖液混合時，包被的膠乳顆粒會產生凝集。凝集程度與樣本中D-二聚體的濃度成正比，由于凝集而引起透射光減少，通過450 nm波長處記錄其變化，從標準曲線上讀出結果[3]。②抽取病人新鮮全血，用109mmol/L枸櫞酸鈉抗凝，3000 r/min離心10 min，取得乏血小板血漿，將離心好的標本放入儀器后自動進行檢測，一般10 min內出結果。③當待測標本濃度＞1050 ng/mL，儀器自動進行稀釋后作進一步檢測，實驗結果會自動乘以稀釋倍數。④質量控制：IL公司提供的低值及高值質控品。⑤據有關文獻報道，D-二聚體濃度<0.5 g/L基本可排除血栓形成[4]。因此，以D-二聚體檢測值是否超出0.5 g/L分為兩大類，并按病種進行歸類，總結D-二聚體檢測結果在肺部疾病診斷中的應用價值，特別觀察其在肺栓塞中的意義。

3 結果

在試驗中，總計136例患者（男78例，女56例）參加檢測。患者平均年齡為58歲（范圍為24～90歲）。所有患者中，46例患者(33.8%)的D-二聚體檢測值<0.5 g/L，全部46例患者在住院期間無任何肺栓塞及深部靜脈栓塞的癥狀，其陰性預期值為100%；90例患者血漿中的D-聚體檢測值>0.5 g/Lng^nl，其中26例患者進行過螺旋CT掃描確診，有11例患者被證實為肺栓塞，其陽性預期值為12.2%，ACL TOP免疫比濁法的敏感性為100%。見表1。

表1 136例肺部疾病患者的D-二聚體結果分析(n)

4 討論

從該次實驗結果可以看出，D-二聚體水平升高對肺栓塞并不是特異的，血漿中的D-二聚體水平由于呼吸系統多種疾病而升高，尤其是慢性阻塞性肺鏑(COPD)、呼吸衰竭和多種呼吸系統合并癥。因此,D-二聚體檢測的陰性結果在肺部疾病中的應用價值大于其陽性結果。

因為肺栓塞病臨床癥狀不明顯，與支氣管炎、心絞痛、胸膜炎、冠心病和肺炎等極為相似，所以容易造成誤診和漏診，如果不能及時確診，致命性栓塞可在1～2 h內導致患者死亡，對該病應給予足夠的重視，只要治療及時，大多數患者可以完全康復，所以快速準確的診斷顯得尤其重要。最新研究表明，螺旋CT掃描結果陰性能夠有效地排除可疑病人的肺栓塞診斷，可以作為肺栓塞影像檢查新的金標準[4]。但其價格高，技術性強，較適于對高度可疑的病人做確診檢查。如果使用ACL TOP免疫比濁法快速定量檢測D-二聚體作為篩選試驗，實驗意義在于陰性結果可100%排除肺栓塞，陽性結果可包括為肺栓塞在內的多種疾病。因為ACL TOP免疫比濁法定量檢測D-二聚體可實行全自動操作，具有準確、快速、簡便的特點，適合門急診檢測，可以把它作為排除診斷肺栓塞的首選篩選試驗，值得在臨床推廣應用。

[1]Gaffney PJ,et al.Monoclonal antibodies to crosslinked fibrin degradation products(XL-FDP)1[J].Characterization and preliminary evaluation in plasma,British Jourmal of Haematology,1988，68:83-90.

[2]郭雪梅，王鴻利.快速D-二聚體在診斷靜脈血栓形成中的應用進展[J].中國實驗診斷學，2000（4）:41-43.

[3]RC Gosseoin,Owings J T,JacobyRC,et al.Evaluation of a new automated quantitative D-Dimer,Advanced D-Dimer in patients suspected o fvenousthromboembolism [J].Blood Coagulation and Fibrinolysis,2002，113:323-330.

[4]Quiroz R,Kucher N,Zou KH,et al.Clinical validity of a negative computed tomography scan in patients with suspected pulmonary embolism:asystematic review[J].JAMA,2005,293:2012-2017.