胎傳梅毒的3種血清學檢測方法比較分析

張 丹

湖南省長沙市省兒童醫院皮膚科，湖南長沙 410000

胎傳梅毒(Congenital syphilis，CS)又稱先天梅毒，是梅毒螺旋體經由母體胎盤進入胎兒血循環使胎兒受染而引起的新生兒、嬰兒和兒童梅毒[1]。為了及時落實干預措施，對其進行早期診斷十分重要。目前在胎傳梅毒的診斷中，主要是以臨床癥狀和血清學結合的方法來進行判別。因此，探索早期、敏感和特異的實驗室診斷策略就十分必要。本研究采用甲苯胺紅不加熱血清反應素試驗(Toluidine red unheated serum test，TRUST)、梅毒螺旋體明膠凝集試驗(T.pallidum particle agglutination，TPPA)和梅毒螺旋體免疫吸附試驗 (T.pallidum enzyme－ linked i mmunosorbent assay，TPELISA)3種技術，對157例胎傳梅毒患兒血清進行檢測，現將比較結果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

該院2009年1月—2011年8月共診斷出157例胎傳梅毒患兒，診斷符合《中國疾病預防控制中心統一性病診斷標準》。其中年齡最小1d，最大3月，男性92例，女性65例。

1.2 試劑和方法

非特異性梅毒螺旋體抗原血清試驗采用上海榮盛生物技術有限公司生產的TRUST試劑盒，特異性梅毒螺旋體抗原血清試驗借助日本富士瑞必歐株氏會社生產的TPPA試劑盒用被動血凝法檢測，以及上海科華生物工程股份公司生產的TP－IgMELISA試劑盒檢測IgM。所用試劑都在有效期內，嚴格按照各試劑的說明書規范操作。

1.3 儀器

酶標儀為 Bio－Rad MODEL680， 洗板機為 Bio－Rad MODEL1575，恒溫孵箱為廣州深華公司的GSP－9050MBE隔水式電熱恒溫培養箱。

1.4 統計學分析

采用SPSS 17.0統計軟件進行，不同方法間的差異比較采用McNemar非參數檢驗，檢驗水準α取0.05。

2 結果

所有樣本TPPA檢測均為陽性，3種血清學檢測全部為陽性者 93例。TRUST陽性檢出率為 59.24%， 與 TPPA、TP－IgMELISA檢測結果有明顯差異，且差異有統計學意義（P＜0.05）。而TP－IgM－ELISA和 TPPA2組方法檢測結果的符合率為 98.09%（154/157），其檢測結果間的差異無統計學意義（P＞0.05）。

表1 157例梅毒抗體陽性者TRUST、TPPA和TP-IgM-ELISA檢測結果

3 討論

從抗原抗體反應原理上看，現階段廣泛用于實際工作中的梅毒血清學檢測手段主要分為非梅毒螺旋體抗原血清試驗和梅毒螺旋體抗原血清試驗2組。非梅毒螺旋體抗原血清試驗檢測的是由螺旋菌誘導胞膜損傷產生的抗磷脂抗體（即反應素）。此類試驗操作簡單，成本低，是監測療效的唯一推薦試驗。但由于抗磷脂抗體為非特異性抗體，存在假陽性問題，受檢樣本的抗體濃度過高，也可能存在前帶反應即假陰性問題[2]。TRUST試驗就是其中一種，實際操作中在白色卡片上判讀紅色凝塊的陽性結果比較容易，操作簡便、快捷，文獻報道其檢出率和重復性強于快速血漿反應素試驗（RPR）。本研究中TRUST的陽性檢出率為59.24%，漏檢率可見一斑。梅毒螺旋體抗原血清試驗是用梅毒螺旋體或其成分做抗原來檢測樣本中的抗螺旋體抗體，具有較高的敏感性和特異性。應用此類方法檢測到抗梅毒螺旋體抗體表明受檢者曾有暴露，但陽性結果并不能反應受檢者治療情況，因此尚不能用于治療效果的評價。TPPA和TP－IgM－ELISA即屬此類。TPPA是將特異性梅毒螺旋體抗原包被在明膠顆粒上，以排除非特異性反應，有較高敏感性和特異性。本研究結果顯示TPPA的陽性檢測率為100%，提示其敏感性好，且目前已被參比實驗室用于確認實驗，其特異性達到98%～100%[3]，較之具有同等敏感性熒光密螺旋體抗體吸收試驗（FTA－ABS），成本相對較低，操作簡單。但在實踐中發現，該方法所需試劑價格較貴，結果判讀不能自動化，依賴于肉眼觀察，不適合應用于大規模的樣本檢測。TP－IgM－ELISA借助了酶放大系統，使其敏感性并不低于TPPA，本研究結果證實了二者的符合率高達98.09%，且差異不具統計學意義（P＞0.05）。而且此法檢測的是血清TP－IgM水平，IgM相對分子量大，不能通過胎盤屏障，從理論上講，妊娠末3個月的胎兒如感染梅毒螺旋體，即可主動合成針對病原菌的IgM抗體。因此，此法不但可作為梅毒活動性感染的的監測，且尤其適合早期胎傳梅毒的診斷。

綜上，本研究證實了TP－IgM－ELISA具有較高的診斷符合率，且操作便于標準化控制，實驗試劑相對低廉，可以取代TRUST和TPPA作為胎傳梅毒的首選血清學診斷方法。

[1]陳祥生.該國梅毒流行現狀及防治策略[J].國際流行病學傳染病學雜志,2008,35(2):73－77.

[2]黃志明,周佳慧,羅榮華，等.妊娠梅毒 TRUST滴度及產前干預對先天梅毒發病的影響[J].中國熱帶醫學,2009,8(9):1408－1410.

[3]陳祥生.該國梅毒流行現狀及防治策略[J].國際流行病學傳染病學雜志,2008,35(2):73－77.