249例HBV攜帶產婦血清和乳汁HBV標志物聯合檢測結果分析

(開封市醫學科學研究所，河南開封 475000)

母嬰傳播是乙型肝炎病毒傳播的重要方式，也是乙肝流行的主要因素［1］。通常認為乙型肝炎是血源性傳播疾病，母乳喂養是否增加HBV母嬰傳播風險，至今尚存爭議。2009年10月～2011年8月，我們對249例產婦血清和乳汁免疫學標志物(HBVM)和HBV-DNA進行了聯合檢測，現分析結果，旨在為阻斷HBV母嬰傳播提供依據。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 249例HBV攜帶者產婦來自2009年10月～2011年8月開封市區及其5縣各級醫院婦產科住院分娩者，產婦年齡16～41歲。

1.2 相關指標檢測 孕婦分別于產前取靜脈全血3 mL分離血清;產后3～5天用無菌鹽水清洗乳頭收集乳汁5 mL;乳汁標本處理參照文獻［2］、血清標本處理參照試劑說明書。①HBV-M:采用ELISA法，試劑購自上海科華生物工程有限公司。乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝表面抗體(抗-HBs)、e抗原(HBeAg)、乙肝前 S1抗原(Pre-S1Ag)P/N≥2.1 為陽性，e抗體(抗-HBe)和乙肝核心抗體(抗-HBc)P/N≤2.1為陽性(P為檢測標本OD值，N為陰性對照OD值);②HBV-DNA檢測:采用熒光定量聚合酶鏈反應技術(FQ-PCR法)。≥5.0×102IU/mL為陽性。試劑盒購自中山大學達安基因股份有限公司。

1.3 統計學方法 采用 SPSS18.0版系統軟件處理。陽性率及關聯性分析采用χ2檢驗，P≤0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 HBV-M 249例產婦血清HBV-M有3種陽性模式，在乳汁中又分別存在不同的HBV-M陽性模式。結果見表1。

表1 249例產婦血清與乳汁HBV-M陽性模式

2.2 血清與乳汁Pre-S1Ag的關系 血清、乳汁中Pre-S1Ag陽性分別為106例(占42.57%)、3例(占2.04%)，關聯性分析表明二者關系不密切(χ2=4.10，關聯系數P=0.127)。結果見表2。

表2 249例產婦血清與乳汁Pre-S1Ag的關系

2.3 血清與乳汁HBV-DNA的關系 249例產婦乳汁HBV-DNA陽性率與血清HBV-DNA載量大致呈正相關，不同血清HBV-DNA載量間乳汁HBV-DNA陽性率差異有統計學意義(χ2=113.48，P＜0.01)。結果見表3。

3 討論

表3 249例產婦乳汁HBV-DNA陽性率與血清HBV-DNA載量的關系

HBV母嬰傳播主要有三種途徑，即宮內感染(HBV通過胎盤感染胎兒)、產時感染(分娩時胎兒接觸母親血液和羊水而感染)、產后感染(通過母嬰密切接觸和哺乳而感染)［3］。近年來大量文獻報道母乳有傳播病毒的可能［3～5］。姚葉珊等［3］認為，母親為HBV攜帶者的嬰兒出生時乙肝病毒標志物陰性者，母乳喂養3個月后，母親為大三陽的嬰兒有28%發生HBV感染，母親為小三陽的嬰兒有7.8%發生HBV感染。因此，探討HBV攜帶產婦血清與乳汁HBV標志物的關系，可能對預防和阻斷HBV母嬰傳播有一定價值。

本研究結果顯示，常見的三種血清HBV-M陽性模式在乳汁中分別有不同的表達形式，提示同一產婦個體，其血清與乳汁中HBV標志物可能存在不同的表達模式。本組249例血清HBsAg陽性的產婦，乳汁HBsAg陽性者229例(91.97%)，提示血清HBsAg陽性的產婦，乳汁HBsAg陽性的可能性很大，乳汁中HBV可能主要來源于血清。但155例血清①④⑤陽性產婦中有134例乳汁以①⑤陽性模式表達，且抗-HBe未見表達;3例血清①④⑤陽性和1例血清①⑤陽性的產婦，乳汁HBeAg為陽性，提示乳汁中HBV不僅來源于外周血清，還可能有其它來源途徑;亦表明乳汁是HBV排泄的重要途徑之一。

Pre-S1Ag是HBsAg外殼蛋白成分之一，近年來被認為是優于HBeAg的免疫學血清標志物［6］。表2顯示，249例產婦血清 Pre-S1Ag陽性 106例(42.57%)，高于 HBeAg 陽性率(32.53%)。但乳汁標本Pre-S1Ag陽性僅3例(2.04%)，遠低于文獻［6］報道的34.5%，其中原因有待探討。對249例產婦血清與乳汁Pre-S1Ag檢測結果進行相關性分析，發現二者關系不密切。提示臨床開展血清Pre-S1Ag檢測對評價HBV的傳染性可能有一定價值，但乳汁Pre-S1Ag檢測的臨床意義不大。

HBV-DNA是判斷HBV復制及傳染性最為客觀的直接指標。表3結果顯示，249例產婦乳汁HBVDNA陽性率與血清HBV-DNA載量水平有關，血清HBV-DNA載量越高，乳汁HBV-DNA陽性的可能性越大，且不同血清HBV-DNA載量者其乳汁HBVDNA陽性率差別有統計學意義。對新生兒而言，產婦血清和乳汁HBV-DNA載量越高，宮內被感染的可能性就越大，母乳喂養被感染的可能性也越大。有文獻認為產婦血清HBV-DNA分泌到乳汁中可能具有界面濃度(106copies/mL)［2］，但本組104 例血清HBV-DNA載量為104～5.0×102IU/mL的產婦乳汁標本中有32例HBV-DNA陽性，且在71例血清HBV-DNA載量＜5.0×102IU/mL的產婦乳汁中檢出3例HBV-DNA陽性，表明血清HBV-DNA載量較低或陰性的產婦，乳汁仍有分泌HBV-DNA的可能性。

2010年版慢性乙型肝炎防治指南［7］認為，新生兒在出生12 h內注射抗乙肝免疫球蛋白和乙型肝炎疫苗后可接受HBsAg陽性母親的哺乳。但有研究認為，目前應用抗乙肝免疫球蛋白和乙型肝炎疫苗均僅針對未變異的HBV，且使用效果與患者本身的基因敏感性有關［4］。鑒于孕期注射抗乙肝免疫球蛋白和乙型肝炎疫苗并不能完全有效阻斷HBV母嬰傳播，故聯合檢測和綜合分析孕期血清與產后乳汁HBV感染狀況可能對有效干預和阻斷母嬰傳播有一定價值。本文納入樣本較少，欲充分顯現乳汁HBV標志物檢測對于指導母乳喂養及阻斷母嬰傳播的臨床價值，還需母乳喂養和人工喂養的嬰兒感染率比較研究的大樣本數據支持。

［1］王小蘭，胡美霞，周世瓊.熒光定量PCR檢測臍血HBV-DNA與母嬰傳播的臨床研究［J］.中國婦幼保健，2007，22(12):1684-1685.

［2］彭其才，許成芳，藤奔琦.產婦血清HBVDNA含量對乳汁和新生兒血清HBVDNA濃度的影響［J］.中山大學學報(醫學科學版)，2010，31(5):729-731.

［3］姚葉珊，鄺炎波.乙肝病毒母嬰垂直傳播分析［J］.現代醫院，2006，6(3):58-59.

［4］張合民，王雪霞.接受免疫治療HBV攜帶產婦的新生兒HBV感染情況分析［J］.山東醫藥，2008，48(30):86.

［5］張永亮.慢性乙型肝炎產婦血液、初乳、滿月乳HBV載量分析［J］.國際檢驗醫學雜志，2009，30(12):1220-1221.

［6］陳銘，艾彪，何瀚，等.乙型肝炎產婦血清與乳汁HBV標志物檢測意義［J］.檢驗醫學與臨床，2010，7(6):517-518.

［7］中華醫學會肝病學分會，中華醫學會感染病學分會.慢性乙型肝炎防治指(2010 年版)［J］.臨床肝膽病雜志，2011，27(1):1-16.