溶出度自身對照法在藥品檢驗(yàn)中的應(yīng)用

聶延君，鞏麗萍，謝元超

(山東省食品藥品檢驗(yàn)所，山東濟(jì)南250101)

藥物溶出度(dissolution rate)是指藥物從片劑、膠囊劑或顆粒劑等固體制劑在規(guī)定的介質(zhì)中溶出的速率和程度。溶出度是影響藥物吸收及生物利用度的重要因素，溶出度的研究和應(yīng)用促進(jìn)了藥物研制水平，強(qiáng)化了藥品質(zhì)量控制手段，在藥物的研制、生產(chǎn)和指導(dǎo)臨床用藥方面具有重要的意義。

隨著新藥研究的快速發(fā)展，新的藥物品種及制劑層出不窮，在現(xiàn)代藥品檢驗(yàn)工作中，所需的藥物對照品也日益增多。但在實(shí)際工作中經(jīng)常遇到?jīng)]有或缺少藥物對照品的情況，自身對照法正是一種不需對照品即可快速檢驗(yàn)藥品的檢測方法，是我國首創(chuàng)并已在抗生素類藥物溶出度測定中廣泛應(yīng)用，由于該法不需對照品，可以有效排除輔料和其他組分的干擾，已有不少研究證明該法亦可應(yīng)用于中藥制劑的溶出度測定。

本文將綜述溶出度研究的發(fā)展歷程以及自身對照法在抗生素類藥物和中藥制劑中的應(yīng)用，以為廣大藥品檢驗(yàn)工作者提供參考。

1 溶出度研究的發(fā)展概況

溶出度的研究大致經(jīng)歷了以下幾個(gè)階段［1］:①1879年～1960年溶出度理論的建立:1897年Noyes和Whitney提出了溶出速率方程，即Noyes－Whitney方程，dC/dt=K(Cs－C)這是溶出度測定的基本原理。1904年Nernet和Brunner將Fick擴(kuò)散定律應(yīng)用于Noyes－Whitney方程;②1950年～1980年溶出度與生物利用度相關(guān)性研究:1951年Edwards對阿司匹林片進(jìn)行了研究，并指出阿司匹林的鎮(zhèn)痛作用取決于藥物在胃腸道內(nèi)的溶出速率［1］;Smolen等介紹了有關(guān)溶出與生物利用度曲線近似一致的概念［2］，溶出度逐漸成為國際公認(rèn)的檢驗(yàn)藥品質(zhì)量的重要措施。1967年美國處方集(NF)12版第二補(bǔ)充版最先介紹了緩釋片與膠丸的溶出度試驗(yàn)。隨后，1975年的英國藥典1973年補(bǔ)充版、1981年第十改正日本藥局方都收載了溶出度檢測項(xiàng)目。1977年中國藥典開始收載溶出度［3］;③1980年～2000年溶出度逐漸成為研制和評價(jià)口服制劑質(zhì)量的重要工具;④2000年～至今溶出度的研究拓展到生物藥劑學(xué)領(lǐng)域。

溶出量的計(jì)算方法有三種:①吸收系數(shù)法;②對照品法;③自身對照法。在實(shí)際應(yīng)用中，吸收系數(shù)法和對照品法是常用的兩種方法，但這兩種方法存在著一定缺陷，如當(dāng)藥物制劑中有的輔料有紫外吸收時(shí)，就會(huì)對溶出結(jié)果產(chǎn)生影響，使得結(jié)果偏高，有的竟會(huì)超過標(biāo)示量的110%［4］;另外，溶出度所需的對照品與含量測定項(xiàng)下所用的對照品不一定完全一致，含量測定項(xiàng)下應(yīng)用的對照品，其標(biāo)定通常采用HPLC法，而像抗生素類藥中對照品則采用微生物法標(biāo)化，與溶出度采用化學(xué)法測定之間有些差異，對測定結(jié)果將產(chǎn)生誤差［5］。自身對照法是目前中國藥典中抗生素類藥物溶出度測定的獨(dú)有測定方法，乙酰螺旋霉素最先采用該法［6］，2000年版中國藥典將抗生素品種固體制劑的溶出度測定方法幾乎都改成自身對照法［7］。

2 溶出度自身對照法

自身對照法是取同批號的樣品10片，研細(xì)，精密稱取約相當(dāng)于平均片重1片的重量，按標(biāo)示量用溶出介質(zhì)稀釋到所需濃度，過濾，取續(xù)濾液作為自身對照溶液［6］。該法具有以下優(yōu)點(diǎn):①不需對照品或標(biāo)準(zhǔn)品即可快檢驗(yàn)，非常適合企業(yè)、藥品檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)對藥物質(zhì)量的監(jiān)督檢驗(yàn);②消除了藥物輔料及復(fù)方制劑中其他成分對測定結(jié)果的干擾［8］。自身對照法目前主要應(yīng)用于抗生素藥物的測定，更是以其特有的優(yōu)點(diǎn)在中國藥典中占有了一席之地。

2.1 在抗生素類藥物檢驗(yàn)中的應(yīng)用 抗生素類藥物中多組分抗生素的紫外吸收與效價(jià)關(guān)系難以確定，使得對照品可能與被測藥物組分及組分比例不一致，使用對照品不能正確反映藥物的溶出［9］，自身對照法可以很好解決這一難題，是一大創(chuàng)新，自身對照法受到了越來越多的關(guān)注。為避免出現(xiàn)溶出度有超出100%的不合理現(xiàn)象，謝元超等［10］建議頭孢氨芐片的樣品液和對照液采用同濃度、同步稀釋的方法進(jìn)行溶出度測定。孫國紅等［11］在對阿莫西林膠囊溶出度研究中發(fā)現(xiàn)，阿莫西林的溶出度與自身對照液濃度有關(guān)，當(dāng)自身對照液稀釋初始濃度大于1.5 mg·L－1時(shí)，溶出度隨初始濃度的增加而增大，而濃度小于1.5 mg·L－1時(shí)，溶出度不隨自身對照液濃度的變化，原因是當(dāng)濃度過大時(shí)，主藥溶解不完全，而輔料、濾膜等對阿莫西林有吸附作用。

自身對照法不僅適用于單一組分的藥物制劑溶出度測定，對多組分的藥物也有很重要的應(yīng)用價(jià)值。謝元超等［12］對多組分的麥白霉素片進(jìn)行了溶出度研究發(fā)現(xiàn)原測定方法不合理，測得的溶出度均偏高，多數(shù)在110%以上。采用同批號的麥白霉素片作自身對照時(shí)，由于同批麥白霉素片的濃度與其紫外吸收值存在線性關(guān)系，可以有效排除輔料的干擾，這樣測得的溶出結(jié)果更加科學(xué)合理，起到了控制溶出度質(zhì)量的目的。頭孢丙烯膠囊含有E和Z兩種異構(gòu)體，不同樣品的組分不恒定，而對照品中每個(gè)組分的量不太可能與樣品組成一致，張雷等［13］采用自身對照法測定頭孢丙烯膠囊，很好地解決了這一問題。劉谷欲等［14］以多組分的制霉菌素片為模型片，建立了制霉菌素片溶出度自身對照法的規(guī)范性方法，提出以0.2 mol·L－1十二烷基硫酸鈉溶液為溶出介質(zhì)。楊開金利用自身對照法建立了吉他霉素片的溶出度測定方法，并針對藥物的理化性質(zhì)選出了合適的溶出介質(zhì)［15］。

2.2 在復(fù)方制劑中的應(yīng)用 自身對照法不需對照品，只需藥物充分溶解后的濃度與吸收值成線性關(guān)系，就可以采用自身對照法，所以自身對照法也適用于復(fù)方、多組分的固體制劑溶出度測定。國家藥品標(biāo)準(zhǔn)中收載的頭孢氨芐甲氧芐啶膠囊溶出度檢查采用對照品對照的高效液相色譜法，該法操作、計(jì)算均較繁瑣，謝元超等［16］采用自身對照法測定溶出度，結(jié)果自身對照法更簡便易行，能準(zhǔn)確反映樣品溶出情況。對于復(fù)方磺胺甲惡唑片溶出度測定，美國藥典采用高效液相法分離磺胺甲惡唑和甲氧芐啶，然后用對照品分別測定，謝元超等［17］采取了自身對照法，不需分離兩成分，簡便快速，能正確反應(yīng)藥物的質(zhì)量。周希英等［18］測定慶大霉素碳酸鉍膠囊溶出度時(shí)發(fā)現(xiàn)膠囊的囊材可與藥物之間發(fā)生交聯(lián)作用，遇衍生化試劑時(shí)產(chǎn)生渾濁，影響測定結(jié)果，故需要在對照溶液中加入空膠囊溶解，以便克服樣品液和對照液測定中存在的誤差。

2.3 在中藥檢驗(yàn)中的應(yīng)用 由于中藥制劑的成分復(fù)雜，其制備多為傳統(tǒng)工藝，手段較為原始，偽品摻假嚴(yán)重，中藥制劑質(zhì)量參差不齊。《中國藥典》對于中藥制劑的檢查項(xiàng)目也僅局限于外觀、鑒別、含量檢查等。中藥市場走向國際化并要被國際認(rèn)可，就必須嚴(yán)格規(guī)范中藥制劑的質(zhì)量，指明作用效力，因此很有必要制定一套更加嚴(yán)格的質(zhì)量控制體系。隨著中藥質(zhì)量控制現(xiàn)代化的發(fā)展，許多化學(xué)藥品質(zhì)量控制的理念與方法在中藥質(zhì)量控制中得到了應(yīng)用，溶出度測定也逐步用于中藥制劑的質(zhì)量控制。在大多數(shù)情況下，中藥制劑溶出度和生物利用度存在相關(guān)性，而生物利用度研究耗時(shí)耗力，溶出度無疑成為控制中藥質(zhì)量的有力措施［19］。中藥溶出度測定方法首選紫外分光光度法(包括比色法)［9］，其中自身對照法由于操作簡單、省時(shí)，數(shù)據(jù)獲取直接;可有效排除了制劑中輔料等因素的干擾，可以更準(zhǔn)確的反映藥物的溶出情況;不需要購買對照品，無需流動(dòng)相等試劑損耗，大大降低檢驗(yàn)成本，節(jié)能環(huán)保，非常適合多組分的中藥溶出度測定，也符合中藥整體性的原則。何慶園等［20］選用同批號的舍尼通片作自身對照，消除了輔料和其他組分的干擾，建立了舍尼通片的溶出度測定方法。王淑梅等［21］以丹參水溶性成分丹參素為指標(biāo)，以自身對照法測定復(fù)方丹參片的溶出度，能夠作為其質(zhì)量控制的一種方法。阮健［22，23］以 0.1 mol·L－1鹽酸為溶出介質(zhì)，利用自身對照法對三黃片和牛黃解毒片分別進(jìn)行溶出度試驗(yàn)，均能有效評定三黃片和牛黃解毒片的質(zhì)量。韋娟［24］利用自身對照法對三個(gè)不同廠家的蒲地蘭消炎片進(jìn)行了溶出度研究，發(fā)現(xiàn)各廠家之間藥品溶出度差異較大，自身對照法可用于評定中藥制劑的溶出度質(zhì)量。黃獻(xiàn)［25］紫外掃描了不同廠家的芒果止咳片，發(fā)現(xiàn)吸收圖譜基本一致，在259 nm均有吸收，這與該藥的有效成分芒果苷的特征吸收峰一致，進(jìn)而采用自身對照法對四個(gè)廠家的芒果止咳片進(jìn)行溶出度比較，認(rèn)為其建立的溶出度測定方法能夠?yàn)樵撍幍纳a(chǎn)工藝改進(jìn)以及質(zhì)量控制提供依據(jù)。莫志江等［26］以溶劑為空白，全波長掃描銀杏葉片溶液，發(fā)現(xiàn)其在265 nm的吸收峰與銀杏葉的主要有效成分黃酮苷類的特征吸收峰基本相符，因此選用自身對照法建立了銀杏葉片體外溶出度測定方法，認(rèn)為其所建立的方法簡單穩(wěn)定、重現(xiàn)性好。

3 展望

針對中藥制劑的特殊性，袁海龍還提出了基于化學(xué)分析和生物效價(jià)檢測的中藥固體制劑體外評價(jià)的管理新模式，認(rèn)為國家藥品審評部門應(yīng)針對每一種中藥固體制劑，參照化學(xué)藥物的方法，公布溶出試驗(yàn)參數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)“化學(xué)－生物”溶出譜、該制劑的溶出度試驗(yàn)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)等以供全國藥品生產(chǎn)企業(yè)參照執(zhí)行［16］。

由于不同廠家的生產(chǎn)工藝不同，中藥制劑質(zhì)量差異較大，有必要增加溶出度檢查項(xiàng)目。自身對照法測定藥物溶出度具有針對性強(qiáng)，能減少誤差，消除干擾的優(yōu)點(diǎn)，可以準(zhǔn)確、方便、快捷的測定中藥制劑溶出度，因此自身對照法具有很好的推動(dòng)和應(yīng)用價(jià)值。同時(shí)也存在不足和局限性，如當(dāng)藥物制劑本身含量不合格時(shí)，測得的溶出度可能是合格，使溶出度和含量沒有直接關(guān)系，減少了質(zhì)量評價(jià)各項(xiàng)目間的關(guān)聯(lián)性;輔料有吸附作用影響藥物溶出時(shí)，將影響溶出度結(jié)果等等［27］，這些可以用其他方法補(bǔ)充和完善。

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