冷沉淀凝血因子制備方法的改進

張湘 段逢時

冷沉淀凝血因子制備方法的改進

張湘 段逢時

目的通過冷沉淀凝血因子制備方法的改變提高了產品質量。方法1將新鮮冰凍血漿置于4±2攝氏度水浴箱內融化后，虹吸出血漿，袋內剩余40～50 ml冷沉淀凝血因子2將新鮮冰凍血漿置于(4±2)℃冰箱中過夜融化，經離心后分離出冷沉淀凝血因子20～30 ml。結果離心法優于虹吸法。結論本文對比離心法和虹吸法兩種方法制備冷沉淀凝血酶因子，得出離心法制備冷沉淀凝血因子質量優于虹吸法，將冷沉淀凝血因子制備方法進行改進。

新鮮冰凍血漿;離心法;制備;冷沉淀凝血因子

冷沉淀是由保存期內的新鮮冰凍血漿(FFP)。在1℃～6℃的條件下融化后，分離出沉淀在血漿中的冷不溶解物質，凍結而成的制品。其中主要含有豐富的凝血因子Ⅷ(FⅧ)、纖維蛋白原(Fib)、血管性假血友病因子(vWF)纖維結合蛋白(Fn)等。臨床上主要用于甲型血友病，纖維蛋白原及凝血因子缺乏所致的出血性疾病的治療，以及手術、創傷引起的凝血機制障礙的治療。近年來，冷沉淀在深度燒傷、腫瘤手術、皮膚、黏膜疾病、角膜疾病、彌散性血管內凝血、多發傷和手術創傷、自發性氣胸等醫學領域里得到廣泛應用［1］。

1 制備方法

多年來，我站沿用虹吸法制備方法如下:留取200 ml全血采集時間小于7 min，400 ml全血采集時間小于13 min的血液，采集后6 h內分離出帶有聯袋的新鮮冰凍血漿，并且即刻放入-50℃冰箱快速冰凍后，放入-20℃以下冰箱保存。冷凍24 h以上的新鮮冰凍血漿用于制備冷沉淀凝血因子。將新鮮冰凍血漿袋置于(4±2)℃水浴裝置中，另一空袋懸于水浴箱外，位置低于血漿袋，兩袋之間形成一定的高度落差。血漿融化后，隨時被虹吸至空袋中，當融化至剩下40～50 ml血漿與沉淀物時，閉合導管，阻斷虹吸。將血漿與沉淀物混合，制成冷沉淀凝成凝血因子［2］。將其快速置于低溫速凍冰箱中凍結。制備過程中，由于我站沒有專用的水浴裝置，需要用冰塊將水浴箱內水溫降至4℃左右，而后將新鮮冰凍血漿放入水浴箱，制備過程中水溫調控不恒定。血漿融化速度慢，導致制備時間長。水浴虹吸法在FFP溶解的過程中，冷沉淀凝血因子有時不能形成大的凝聚團塊，或成絮狀，不能聚集吸附在中央未融化的冰塊上或袋壁上，有部分往往由于虹吸作用而流到另一轉移空袋中，降低了FⅧ的含量［3］。

依據《血站技術操作規范》(2012版)將制備方法改進為離心法，現將方法介紹如下:1.取出待制備冷沉淀的新鮮冰凍血漿，置(4±2)℃冰箱中過夜融化(時間約為12～15 h);次日，當血漿中尚有部分冰核時即從冰箱中取出。2.將帶有冰核的血漿配平后放入溫度已調至(4±2)℃的離心機中，3000 g，離心8 min。3.離心后取出血漿放入分漿夾上擠出上清血漿部分。底部可見白色冷不溶物質即為冷沉淀凝血因子。將袋內留有20～30 ml血漿與沉淀物混合，制成冷沉淀凝血因子。將其快速置于低溫速凍冰箱中凍結。制備后經質控科檢驗，由200 ml新鮮冰凍血漿制備的冷沉淀凝血因子1u:FⅧ含量＞80IU/袋，Fib＞150 mg/袋，容量:20～30 ml。符合GB18469-2001《全血及成分血質量要求》。應用此方法制備過程中，血漿在(4±2)℃冰箱中過夜融化，溫度控制恒定。同時血漿過夜融化節約了人為加速其融化時間。帶有冰核的血漿經離心后血袋底部附著有白色片狀沉淀物質。經分漿夾分離血漿過程中，冷沉淀流失少，大大提高了產品質量。

2 討論

《血站技術操作規程》(2012版)中規定出冷沉淀凝血因子制備方法分為虹吸法和離心法。兩種方法都能制備出符合國家標準的冷沉淀凝血因子。結合我站實際，使用新鮮冰凍血漿置于(4±2)℃冰箱中過夜融化，離心法制備冷沉淀凝血因子優于虹吸法。離心法制備提高了冷沉淀凝血因子的含量，新鮮冰凍血漿置于(4±2)℃冰箱中過夜融化節省了手工融化血漿的時間。同時也避免了購置專用的水浴裝置，符合我站目前經濟狀況。在提高冷沉淀凝血因子產品質量上，除了選擇合適的制備方法外，還應嚴格控制血液采集到成分制備的整個過程，200 ml全血采集時間＞7 min，或400 ml全血采集時間＞13 min，所采集的全血不可用于制備新鮮冰凍血漿。采集后的血液應加強整個過程的冷鏈控制，改進從采集到制備成成品的流程，盡量縮短其時間，確保在采集全血后6 h內分離出新鮮冰凍血漿。應當將新鮮冰凍血漿和冷沉淀凝血因子快速凍結，最好在60 min內將血漿中心溫度將至-30℃以下等，才能保證冷沉淀凝血因子的質量。

［1］雷千紅，葉東，欒建鳳.冷沉淀臨床應用的新進展.醫學研究生學報，2004，17(1):81-82．

［2］中華人民共和國衛生部.血站技術操作規程，2012．

［3］楊文萍，關亮.淺談冷沉淀制備有效性的質量保證.中國預防醫學雜志，2009，10(8):774-775．

136200 遼源市中心血站(張湘);遼源市婦嬰醫院(段逢時)