指血預稀釋模式與靜脈血抗凝全血模式測定自行車運動員9項血細胞參數的比較實驗研究①

李鵬飛 馮葆欣 宗丕芳 尚文元 張衛英 宋國強

(1.國家體育總局體育科學研究所 北京 100061; 2.北京市蘆城體育運動技術學校 北京 102612)

臨床血常規檢驗以提倡取靜脈血用EDTAK2抗凝的全血模式測定為佳。但在我所生化實驗室日常為運動員檢測血常規時存在著末梢指血預稀釋與靜脈血抗凝全血的2種不同模式。本實驗比較的目的是為了了解這2種模式的測定結果是否存在差異及其大小,并做出相關回歸分析。

1 研究方法

1.1 儀器和試劑

1.2 抗凝劑

15%EDTAK2溶液,取5uL置于1.5mL離心管中。

1.3 樣本

同時采集運動員靜脈血及末梢指血標本各57例/次。男21人,年齡(17±1.20)歲,身高(176±4.28)cm,體重(71±5.10)kg,專項訓練年限(3±1.19)年。女19人,年齡(18±2.40)歲,身高(166.5±2.69)cm,體重(61.4±4.98)kg,專項訓練年限(2.4±1.25)年。

表1 57例/次末梢指血和靜脈血9項血細胞參數測定結果的比較(±s)Table1 The comparison of nine hematological parameters between fingertip and venous blood from cycling athletes(±s)

表1 57例/次末梢指血和靜脈血9項血細胞參數測定結果的比較(±s)Table1 The comparison of nine hematological parameters between fingertip and venous blood from cycling athletes(±s)

注:WBC,白細胞;RBC,紅細胞;HGB,血紅蛋白;HCT,紅細胞壓積;MCV,紅細胞平均體積;MCH,紅細胞平均血紅蛋白含量;MCHC,紅細胞平均血紅蛋白濃度;RDW,紅細胞體積分布寬度;PLT,血小板

配對t檢驗靜脈血 末梢指血 t P W BC(×109/L) 5.8±1.9 5.7±1.8 0.83 ＞0.05 R B C(×1012/L) 4.69±0.51 4.44±0.46 9.3 ＜0.01 H G B(g/L) 142±17 137±17 8.97 ＜0.01 H C T(%) 41.9±5 39.5±5 9.79 ＜0.01 M C V(fl) 88.8±5.16 89.4±5.12 3.12 ＜0.01 M C H(pg) 30.5±1.9 30.7±2.5 0.64 ＞0.05 M C H C(g/L) 344±9 344±18 0.446 ＞0.05 R D W(%) 12.6±1.1 12.8±1.0 2.657 ＜0.05 PLT(×109/L) 259±46 258±48 0.133 ＞0.05

1.4 方法

按操作規程推薦方法,準確取末梢指血20uL置于裝有1580uL稀釋液的塑料試管內,混勻。另取靜脈血0.5mL置于裝有抗凝劑的離心管內,混勻。在取血后0.5～2h內分別以預稀釋模式和全血模式完成測試。

1.5 考慮到盡量拓展線性范圍,在運動員不同訓練階段進行了重復抽樣,本比較實驗的統計樣本量大于采血人數,為57例/次。統計學處理采用配對t檢驗,并進行相關與回歸分析。

2 結果

(1)57例/次末梢指血和靜脈血測定血常規的9項主要參數分別進行配對t檢驗,結果見表1。表1顯示,通過配對t檢驗,二者的WBC、MCH、MCHC、PLT沒有顯著性的差異,而RBC、HGB、HCT、MCV、RDW有顯著性的差異。且末梢指血的RBC、HGB、HCT、MCV、RDW均低于靜脈血。

(2)對57例/次末梢指血、靜脈血上述5項血細胞參數(RBC、HGB、HCT、MCV、RDW)進行相關與回歸分析,結果見表2。

表2 57例/次末梢指血與靜脈血5項血細胞參數的直線回歸方程和相關系數Table2 The regression equation and correlation coefficient of five hematological parameters between fingertip and venous blood from cycling athletes

4 討論

血常規,不僅是最常用的臨床檢查指標,也是體育科研中最常用的評定運動員身體機能狀況的指標。簡言之,RBC、HGB、HCT反映機體是否存在貧血;WBC反映機體是否有感染或免疫狀況;PLT反映機體凝血功能;根據MCV、MCH、MCHC值可將貧血分為以紅細胞生成減少為主的貧血、以紅細胞破壞過多為主的貧血及以失血為主的貧血等多類貧血;RDW主要用于篩選缺鐵性貧血。因此,上述血細胞參數具有十分重要的臨床價值和身體機能評定意義。血常規檢查中有末梢指血和靜脈血不同樣本,1995年全國血液學自動化分析質量控制研討會紀要中指出:末梢血影響因素較多,不能得出準確結果,其重復性、穩定性都不及靜脈血標本,應提倡靜脈血。目前,關于末梢指血和靜脈血各項血細胞參數比較的差異,有非常多的文獻報道。但可能由于實驗樣本年齡、實驗樣本量、地區差異、采血方法、采用試劑、實驗儀器型號等多種因素的不同,文獻報道的血細胞每一種參數比較結果不盡相同,甚至有截然相反的結論。雖有這些不同,但一般認為,靜脈血具有受采血技術操作影響小、無組織液混入、抗凝效果好,便于復查等優點,而指血末梢循環易受到外界環境變化、情緒變化、應激反應、疾病、局部瘢痕等情況影響,造成末梢循環障礙,在采集末梢血時血流不暢,常擠壓局部使組織液滲入,導致血液稀釋。因此,綜合文獻建議,血細胞計數儀宜采用靜脈血樣本,并且也更符合血細胞計數儀的設計要求。

隨著世界科技的發展,臨床檢驗技術的更新十分迅速。以臨床血液細胞常規檢驗而論,50年代電子血球計數儀問世,發展至今,全自動18參數的血細胞分析儀已經進入我國。本實驗中使用的diff2三分類血細胞計數儀為美國Beckman Coulter公司生產,在臨床檢測中有較高聲譽也應用較廣泛。它自動化程度較高、計數精確,可以重復計數(3次)、具有識別系統、監控系統、自動清洗保養控制系統和全自動校正程序。采用液晶觸摸屏幕,操作簡易,使用抗凝血在儀器內自動稀釋,不但減少實驗誤差也提高了結果精確性,故障發生率低,采血量少,是一臺性能優良的血液分析儀。因此,使用這種全自動化儀器,必須保證標本采集的質量,才能得到高精度的檢驗結果。否則,由于標本采集不當,帶來很高的誤差,就失去了使用這種高精密度儀器的意義。由于自身末梢指血與靜脈血確實存在著差異,為了保證檢測質量,使測定值更接近真值,即使全自動血細胞分析儀一般都設有末梢指血和靜脈血2種測定模式(其目的是為了方便不同人群的需要),行業公認在使用全自動血球分析儀時,應盡量使用靜脈血檢測。

我所生化實驗室在實際工作中,根據運動員或運動隊的可接受程度,測定血細胞參數也同時存在末梢指血預稀釋和靜脈血抗凝全血兩種測定模式。我們上述實驗也證實自身末梢指血與靜脈血確實存在差異,57例/次末梢指血和靜脈血9項血細胞參數測定結果顯示:末梢指血的RBC、HGB、HCT、MCV、RDW均顯著低于靜脈血,而WBC、MCH、MCHC、PLT沒有顯著性的差異。科研工作人員對于實驗室不同模式下的測定結果,要充分考慮上述差異后再進行評定,必要時可適當參考文獻報道和上述各參數的相關回歸方程進行統一性判斷。

[1]馮連世,馮美云,馮煒權.運動訓練的生理生化監控方法[M].北京:人民體育出版社,2006.

[2]馮連世,李開剛.運動員機能評定常用生理生化指標測試方法及應用[M].北京:人民體育出版社,2002.

[3]宗丕芳.采用定值新鮮血校準CISF-820血細胞分析儀[J].中國運動醫學雜志,2006,25(6):703～705.

[4]馮勝強,劉德軍,靳迪,等.不同采血方法在ACT5diff血細胞分析儀對白細胞計數及其分類的準確性探討[J].Jiangxi J.Med Lab Sci,2007,25(4):406.