間充質干細胞治療慢性重癥乙型肝炎臨床分析

李江濤 趙和泰 張效北 韓笑元 李偉 覃雪燕 李丁 何龍

(解放軍第303醫院干細胞中心 南寧 530021)

重癥乙型肝炎占慢性乙型肝炎的80%以上,并發癥較多,其主要的生理性改變是肝細胞的大量壞死及機體免疫功能改變。近年來,臍帶間充質干細胞移植治療肝病已成為國內外干細胞研究的熱點,間充質干細胞是具有高度自我更新能力和多向分化潛能的干細胞,能夠分化為肝細胞樣細胞[1],在治療肝病方面發揮著重要的作用。我院2010年6月至2011年5月采用間充質干細胞治療慢性重癥乙型肝炎45例,效果滿意,現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

60例均為我院收治的慢性重癥乙型肝炎的患者,均符合2000年《病毒性肝炎防治方案》中的診斷標準,排除合并感染的患者,均為入選標準:(1)乙肝表面抗原(HBsAg)陽性,e抗體陽性≥6個月;(2)HBV DNA水平≥105copies/mL;(3)出現丙氨酸轉氨酶(ALT)和總膽紅素(TB)升高;(4)未接受過核苷類似物或干擾素抗病毒治療。

1.2 治療方法

研究組患者均臍帶間充質干細胞,采集新生兒臍帶,將臍帶剪碎至約1mm×1mm×1mm,首先經0.1%膠原酶37℃消化30min后,在經0.125%的胰酶37℃消化30min,用100目及200目分別進行濾網過濾,去除未消化的組織。然后進行培養、接代,獲得(1.0～5.6)×107的間充質干細胞,置于4℃下進行保存,備用。保存時間不能超過60h。進行移植治療前注射小劑量地塞米松預防過敏反應。根據輸入途徑決定細胞數量,前臂靜脈8×107個／次,肝動脈4×107個/次。干細胞移植過程行全環境保護,無環鳥苷靜脈應用預防病毒感染。術后當日起續使用促肝細胞生長素3d,促進干細胞在肝臟內分化為肝細胞。

1.3 評價指標

比較2組患者的血清總膽紅素(TB)、谷草轉氨酶(AST)、谷氨酰轉肽酶(γ-GT)、丙氨酸轉氨酶(ALT)、凝血酶原時間(PT)、血液生化指標采用儀器為日立7170A全自動生化分析儀測定,試劑盒均由南京建成生物工程研究所提供,操作步驟按試劑盒說明進行。

1.4 統計學處理

表1 治療前后各指標的變化(±s)

表1 治療前后各指標的變化(±s)

注:2組相比,*P<0.05

時間 A ST(IU／L) A LT(IU／L) TB(μm ol／L) PT(s) γ-G T(IU／L)對照組 65.4±55.7 69.3±32.9 51.3±13.7 22.7±2.1 338.4±55.7研究組 40.6±4.2 39.8±6.2 31.4±2.3 (10.2±1.2)* (712.3±101.5)*

2 結果

研究組患者的手術成功率為100%,術后未見嚴重不良反應及并發癥發生,隨訪4～12個月,患者的臨床癥狀均得到好轉,研究組患者的AST、ALT、TB、PT明顯低于對照組,γ-GT明顯高于對照組,P<0.05,見表1。

3 討論

研究發現,間充質干細胞具有向多種細胞(包括肌腱、韌帶、肝細胞、心肌細胞和骨髓基質等)分化發育的潛能,并和人體免疫系統相互作用,發揮重要的免疫調節作用。特別是骨髓來源的間充質干細胞已經被用于終末期肝病的治療,并被證實安全、可靠,在一定程度上可顯著提高肝功能。UC-MSC治療ACLF能明顯減輕肝臟炎癥,改善肝臟功能,減輕腹水,促進肝細胞再生,降低死亡率,其治療的適應癥為早、中期的患者,而對晚期患者無明顯治療作用。本研究為肝衰竭患者的治療提供了新的有效的治療手段,具有重要的臨床意義。

γ-GT較治療前顯著上升,P<0.05。這表明間充質干細胞移植到受損的肝臟中可分化為成熟的肝細胞,從而促進肝功能的恢復,且臍帶來源廣泛,便于取材、保存,對供者無不利影響。綜上所述,間充質干細胞治療肝病可顯著改善患者的肝功能,緩解臨床癥狀。本臨床試驗證實:人臍帶間充質干細胞移植治療肝硬化患者安全性好,能升高白蛋白,減少腹水,并能明顯改善肝硬化患者的預后。本研究治療病例相對較多(以往研究<10例,本研究45例),并有明確的對照組(15例,而以往研究無對照組),采用了更精確的預后指標(MELD和MELD-Na。以往研究多采用Child-Pugh評分,主觀性強),所以本研究具有很好的代表性。

[1]任紅英,趙欽軍,劉擁軍,等.臍帶間充質干細胞體外誘導分化為肝細胞樣細胞的研究[J].山東醫藥,2008,48(30):24～26.

[2]徐若男,施明,王福生.人臍帶間充質干細胞的特征及其臨床應用前景[J].中國免疫學雜志,2010,26(1):82～84.