不同蛋白質(zhì)含量飼料對(duì)中華絨螯蟹生長性能和消化酶活性的影響

天津農(nóng)學(xué)院水產(chǎn)科學(xué)系 孫金輝 孫敬鋒 孫學(xué)亮白東清 喬秀亭

中華絨螯蟹（Eriocheir sinensis）為甲殼綱、十足目、方蟹科、絨螯蟹屬，俗稱河蟹。其主要分布在長江中下游各地，在江蘇、湖北、安徽和上海等地區(qū)，現(xiàn)已逐漸形成規(guī)模化養(yǎng)殖。河蟹生長迅速，肉質(zhì)細(xì)嫩，味道鮮美，具有較高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。目前關(guān)于甲殼動(dòng)物消化酶活力的研究已有較多報(bào)道 （江洪波等，2003），而有關(guān)中華絨螯蟹發(fā)育過程中不同蛋白質(zhì)飼料對(duì)其消化酶活性變化的研究尚不多見。因此，本文研究了中華絨螯蟹發(fā)育過程中不同蛋白含量飼料對(duì)其生長性能及消化生理的影響情況，旨在探討中華絨螯蟹的消化生理特性，并為人工餌料的合理配制及中華絨螯蟹的科學(xué)養(yǎng)殖提供參考。

2 材料與方法

2.1 試驗(yàn)材料

2.1.1 試驗(yàn)蟹來源及管理 試驗(yàn)用蟹取自寧河七里海河蟹養(yǎng)殖基地。平均殼長為（3.50±0.6）cm，體重為（16.42±1.12）g，河蟹在 80 L 的水族箱內(nèi)暫養(yǎng)一周，待攝食正常后開始試驗(yàn)，試驗(yàn)期間每天投喂2次，投喂量為蟹重的3%～5%。

2.1.2 試驗(yàn)分組 試驗(yàn)分為3組，每組66只河蟹，分別投喂人工蟹用配合飼料I、II號(hào)（蛋白質(zhì)含量分別為38%和35%）及天然餌料，每個(gè)試驗(yàn)組各設(shè)2個(gè)平行，進(jìn)行試驗(yàn)。

2.2 試驗(yàn)方法

2.2.1 殼長、體重測量 取試驗(yàn)蟹，利用分度值為0.01 cm的游標(biāo)卡尺，測量河蟹頭胸甲額齒中間凹陷處至頭胸甲后緣的直線長度，該長度即為河蟹的殼長，測量結(jié)果準(zhǔn)確至小數(shù)點(diǎn)后兩位（江蘇省淡水水產(chǎn)研究所，2010）。將河蟹放入器皿中，用量程為1000 g的電子稱稱重。

2.2.2 豐滿度計(jì)算 豐滿度計(jì)算公式為：

式中，K為豐滿度；W為體重，g；L為殼長，cm。

2.2.3 蛋白酶活性測定 蛋白酶活性的測定用福林-酚顯色法進(jìn)行測定，在680 nm下，以每克新鮮組織1 min內(nèi)水解酪蛋白產(chǎn)生1 μg酪氨酸為一個(gè)酶活力單位，μg/min·g（桂遠(yuǎn)明，2004）。

2.2.4 淀粉酶活性測定 淀粉酶活性采用碘淀粉顯色法測定，酶活力定義為30 min內(nèi)，100 mL酶液中的淀粉酶能完全水解淀粉10 mg為一個(gè)酶活力單位，mg/30 min·g（桂遠(yuǎn)明，2004）。

淀粉酶活性=[（對(duì)照管光密度－測定管光密度）/對(duì)照管光密度]×800；

回歸曲線為：Y=0.001X+0.0014，R2=0.9952。

2.2.5 脂肪酶活性測定 脂肪酶活力采用聚乙烯醇橄欖油為底物的標(biāo)準(zhǔn)氫氧化鈉溶液滴定法進(jìn)行測定。脂肪酶活力定義為：在pH 7.5條件下，每克新鮮組織中的脂肪酶水解脂肪，每分鐘產(chǎn)生1 μmol脂肪酸的酶量為一個(gè)酶活力單位 （μmol/min）（桂遠(yuǎn)明，2004）。

3 結(jié)果與分析

3.1 不同飼料蛋白質(zhì)對(duì)河蟹生長性能的影響

三種飼料對(duì)河蟹生長性能的影響見圖1至圖3。由圖1可知，第一次采樣時(shí)（8月16日），攝食 I號(hào)飼料的河蟹殼長較II號(hào)飼料增長1.79%，較天然餌料增長12.04%（P＜0.05）；第二次至第三次取樣間，河蟹殼長的增長進(jìn)入平緩期。由圖2可知，在整個(gè)飼喂期間，河蟹的體重呈現(xiàn)明顯的增長的態(tài)勢，在第一次及第二次取樣后，投喂I號(hào)飼料的河蟹體重呈現(xiàn)出優(yōu)于其他兩組的趨勢。在試驗(yàn)?zāi)┢谌雍蟀l(fā)現(xiàn)，I號(hào)飼料河蟹體重較其他兩組分別顯著增長21.42%和30.77%（P＜0.05）。由圖3可知，在整個(gè)試驗(yàn)期間，河蟹的豐滿度呈現(xiàn)試驗(yàn)前期增長緩慢，試驗(yàn)后期快速增長的趨勢。與河蟹的殼長及體重情況相同，在試驗(yàn)后期I號(hào)飼料組河蟹豐滿度顯著高于其他兩組16.36%和16.08%（P ＜ 0.05）。

綜合分析河蟹的殼長、體重與豐滿度指標(biāo)，投喂蛋白質(zhì)含量為38%的I號(hào)飼料對(duì)河蟹的生長促進(jìn)效果最佳。

3.2 不同蛋白質(zhì)含量飼料對(duì)河蟹消化酶活性的影響

3.2.1 不同蛋白質(zhì)含量飼料對(duì)河蟹蛋白酶活性的影響 由圖4可知，在試驗(yàn)前期和中期，各組河蟹體內(nèi)蛋白酶活力上升較為明顯，至試驗(yàn)后期蛋白酶活性變化較為平穩(wěn)。在試驗(yàn)中期，I號(hào)飼料組河蟹蛋白酶活性較II號(hào)飼料組與天然餌料組分別提高25%和27.15%（P＜0.05）。

3.2.2 不同蛋白質(zhì)含量飼料對(duì)河蟹淀粉酶活性的影響 由圖5可知，隨著飼喂時(shí)間的延長，河蟹淀粉酶酶活力逐漸上升，在第三次取樣時(shí)淀粉酶活力最高，且I號(hào)飼料組淀粉酶活力極顯著高于II號(hào)飼料組與天然餌料組（P＜0.01）。

3.2.3 不同蛋白質(zhì)含量飼料對(duì)河蟹脂肪酶活性的影響 由表6可知，與河蟹體內(nèi)淀粉活性相似，各試驗(yàn)組脂肪酶的活性也呈現(xiàn)隨飼喂時(shí)間的延長，酶活力逐漸上升的趨勢。各取樣時(shí)間I號(hào)飼料組脂肪酶活力均顯著高于其他兩組，且酶活力在試驗(yàn)?zāi)┢谶_(dá)到最大值。

4 討論

4.1 不同蛋白質(zhì)含量飼料對(duì)河蟹生長性能指標(biāo)的影響 為滿足河蟹的生長和生理需要，河蟹飼料應(yīng)盡量做到營養(yǎng)全面均衡，選料新鮮，以求最大限度的保證各種養(yǎng)分的含量，以滿足河蟹的生理需要及生長特點(diǎn)。本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，蛋白質(zhì)含量為38%的I號(hào)飼料對(duì)河蟹的殼長、增重及豐滿度等生長性能指標(biāo)具有明顯的促進(jìn)作用，說明在河蟹生長初期，需要較高的飼料蛋白質(zhì)用于自身生長。劉學(xué)軍等（1990）研究認(rèn)為，成蟹養(yǎng)殖前期餌料蛋白質(zhì)適宜含量為41.0%，中后期為36.0%。韓小蓮（1991）研究認(rèn)為，大眼幼體至Ⅲ期幼蟹蛋白質(zhì)的需要量為 45%。陳立僑等（1994）采用酪蛋白、明膠、酵母粉為蛋白源，結(jié)果表明，體重為6～10 g的中華絨螯蟹配合餌料蛋白質(zhì)適宜需要量為34.05% ～46.5%。Mu等（1998）研究表明，以蝦粉為蛋白源，體重為1.0 g仔蟹對(duì)蛋白質(zhì)的適宜需要量為39.0%，這些研究成果均與本試驗(yàn)的結(jié)論相符合。

此外，但在本研究還發(fā)現(xiàn)，投喂天然餌料的河蟹，生長速度慢，與配合飼料相比差距較大。究其原因，可能主要與天然餌料中所含的蛋白質(zhì)、脂類、維生素、碳水化合物以及礦物質(zhì)、鈣磷等無機(jī)鹽不如配合飼料中含量和配比合理相關(guān)，不能充分滿足河蟹的生長需要，嚴(yán)重影響了河蟹的正常代謝；尤其是對(duì)于蛻殼時(shí)期的河蟹而言，投喂天然餌料不僅影響蟹殼的生長，對(duì)于后期的生理器官的發(fā)育也有很大的影響。

4.2 不同蛋白質(zhì)含量飼料對(duì)河蟹消化酶活性的影響 研究證實(shí)，消化酶活性可作為蝦蟹餌料各營養(yǎng)成分消化吸收和利用的重要指標(biāo)。本試驗(yàn)結(jié)果表明，蛋白質(zhì)含量為38%的I號(hào)飼料對(duì)河蟹的蛋白酶、淀粉酶與脂肪酶的促進(jìn)效果均優(yōu)于其他兩種，這與大多學(xué)者的研究結(jié)論相似。周永奎等（2005）研究發(fā)現(xiàn)，在中華絨螯蟹卵巢的發(fā)育期，對(duì)其投喂較高含量的蛋白質(zhì)飼料，可有效提高河蟹體內(nèi)胰腺蛋白酶、淀粉酶、纖維素酶及脂肪酶的活性。林仕梅等（2001）與許實(shí)榮等（1987）也研究證實(shí)飼料中蛋白質(zhì)含量對(duì)蝦、蟹類的消化酶活性具有重要的影響。

目前關(guān)于甲殼動(dòng)物脂肪酶活力低的解釋主要有兩種：一種認(rèn)為這是測定脂肪酶的反應(yīng)條件不適宜或不夠靈敏所致，另一種則認(rèn)為是試驗(yàn)動(dòng)物本身脂肪酶活力很低甚至無活力所致。本試驗(yàn)結(jié)果表明，河蟹消化甘油三酯的能力較弱，因此表現(xiàn)為脂肪酶活力較低。

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