肥大細胞與乳腺浸潤性導管癌淋巴結轉移及淋巴管生成的關系探討

黎晴，楊梅，曹桂明*

(1.廣州市荔灣區人民醫院病理室，廣東廣州510370；2.南華大學附屬南華醫院病理科，湖南衡陽421000)

肥大細胞與乳腺浸潤性導管癌淋巴結轉移及淋巴管生成的關系探討

黎晴1，楊梅2，曹桂明2*

(1.廣州市荔灣區人民醫院病理室，廣東廣州510370；2.南華大學附屬南華醫院病理科，湖南衡陽421000)

目的探討肥大細胞在浸潤性導管癌中的表達及其與淋巴結轉移及淋巴管生成的關系。方法用免疫組化染色檢查肥大細胞在乳腺良性病變和乳腺浸潤性導管癌組織中的表達，用D2-40標記淋巴管并計數。結果肥大細胞數量在乳腺良性病變和乳腺浸潤性導管癌之間的差異有統計學意義(P＜0.01)；乳腺浸潤性導管癌中的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級患者的肥大細胞數量差異有統計學意義(P＜0.01)。肥大細胞數量與浸潤性導管癌有無淋巴結轉移之間的差異有統計學意義(P＜0.01)。肥大細胞數量與乳腺癌淋巴管數量呈正相關(r=0.18)。結論肥大細胞數量可作為乳腺浸潤性導管癌遠期預后判斷的參考指標。

乳腺癌；組織學分級；肥大細胞；淋巴管計數；預后判斷

淋巴結轉移是乳腺癌最主要的擴散轉移方式，在乳腺浸潤癌中，淋巴管內皮細胞的基底膜破裂處淋巴迷路與惡性腫瘤細胞直接接觸，提示淋巴管是腫瘤細胞擴散的主要途徑[1]。肥大細胞是一種多功能細胞，活化后能分泌多種生物活性物質參與免疫和炎癥反應。它在乳腺癌中廣泛浸潤，并與腫瘤的發病機制、分化、轉移和預后密切相關[2-3]。目前對于肥大細胞與乳腺癌淋巴結轉移及淋巴管生成的關系研究甚少。我們就87例乳腺病變中肥大細胞的數量與乳腺癌淋巴結轉移及淋巴管生成的關系進行研究，以探討肥大細胞在乳腺癌淋巴道轉移擴散中的作用以及是否可作為判斷乳腺癌預后的參考指標。

1 資料與方法

1.1 標本收集附屬南華醫院病理科1998年12月至2008年3月序列檔案石蠟切片標本共87例，其中術前未經放、化療的乳腺浸潤性導管癌根治標本55例，乳腺良性病變32例。所有病例均為女性。乳腺癌患者的年齡27～76歲，平均49.7歲。根據2003年乳腺腫瘤WHO組織學分類標準對所有病例進行診斷、分級。

1.2 方法用肥大細胞類胰蛋白酶和D2-40抗體通過免疫組化SP法分別標記肥大細胞(MC)和淋巴管。在光鏡40×10高倍視野(HPF×400)下觀察每張切片中20個HPF的MC，然后計算每個HPF的MC平均數(x-)、標準差(s)。D2-40陽性淋巴管按Weidner法[4]計數，分別測定乳腺癌腫瘤區、周邊區和良性乳腺病變的淋巴管密度(Lymphatic vessel density，LVD)。

1.3 統計學處理采用Kruskal-Wallis秩和檢驗，相關性分析采用Spearman等級相關分析，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

肥大細胞陽性細胞胞漿著棕黃色、顆粒狀，在病理組織中分布不均勻，大多數呈灶狀分布于病變組織與正常組織交界處或密集于膠原纖維組織內(圖1、圖2)。乳腺良性病變的肥大細胞數量明顯低于乳腺浸潤性導管癌，差異有統計學意義(P＜0.01)；在浸潤性導管癌中，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級之間的肥大細胞數量差異亦有統計學意義(P＜0.01)，見表1。被D2-40染成棕黃色的微小管腔、管腔樣結構或細胞即為D2-40陽性，每個呈棕黃色、有或無內皮細胞被覆、不含紅細胞的微小管腔或管腔樣結構或內皮細胞簇視為一個淋巴管(圖3)。將浸潤性導管癌分成有或無淋巴結轉移兩組，發現有淋巴結轉移組的肥大細胞數量明顯高于無淋巴結轉移組(P＜0.01)，并且肥大細胞數量與癌周邊區淋巴管數量呈正相關(r= 0.18；見表2)。

圖1 乳腺浸潤性導管癌中的肥大細胞；圖2乳腺良性病變中的肥大細胞；圖3乳腺浸潤性導管癌中D2-40抗體陽性的淋巴管

表1 乳腺良性病變與浸潤性導管癌的肥大細胞數量與臨床病理指標的比較()

表1 乳腺良性病變與浸潤性導管癌的肥大細胞數量與臨床病理指標的比較()

組織學類型乳腺良性病變浸潤性導管癌浸潤性導管癌分級Ⅰ級Ⅱ級Ⅲ級32 55 19 22 14 7.80±1.22 15.44±2.39 10.75±2.61 13.70±1.92 15.33±0.62 12.08＜0.01 10.39 19.12 25.96＜0.01＜0.01＜0.01

表2 肥大細胞數量與LVD的關系()

表2 肥大細胞數量與LVD的關系()

注：兩者比較，差異有統計學意義，*P＜0.01。

11.21±4.60*5.78±3.02有無31 24 14.03±2.01*11.22±0.55 0.18

3 討論

目前已有的研究尚不能明確定義肥大細胞對腫瘤生長的影響，但已有實驗證明肥大細胞能促進腫瘤的前哨淋巴結中血管的生成，從而影響腫瘤的生長及轉移[5]。本文研究數據表明，乳腺良性病變與浸潤性導管癌的肥大細胞數量水平差異有統計學意義(H= 12.08，P＜0.01)，而且隨著乳腺浸潤性導管癌的級別增加，肥大細胞數量也隨之增加，組間差異有統計學意義(P＜0.01)。這提示肥大細胞數量與乳腺浸潤性導管癌級別程度呈正相關。我們的實驗還發現，肥大細胞數量多的病例淋巴結轉移的幾率也大為增加，數據顯示肥大細胞數量在有無淋巴結轉移的分組比較中，其組間差異有統計學意義(P＜0.01)，相關性分析顯示呈正相關性(r=0.18)，并且在有淋巴結轉移的病例中，癌周淋巴管的數量也明顯增多，與沒有淋巴結轉移的病例中癌周淋巴管的數量之間比較差異有統計學意義(P＜0.01)，說明淋巴管生成與淋巴結轉移呈正相關，這與我們之前的研究發現相符[6-7]。依據這一研究數據，可以推斷：肥大細胞具有促進腫瘤發展的作用，且肥大細胞數量有利于腫瘤的病理分級和對預后的判斷，并且肥大細胞能通過促進淋巴管生成，導致淋巴結轉移，從而影響患者預后。先前有文獻報道類胰蛋白酶陽性的肥大細胞可能促進乳腺癌前哨淋巴結中的血管生成[8]，這提示肥大細胞促進淋巴結轉移有可能是刺激淋巴管及血管生成雙重機制作用的結果。但是其促進淋巴管及血管生成的具體通路還有待進一步的研究證明。

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[8]Ribatti N,Finato E,Crivellato,et al.Angiogenesis and mast cells in human breast cancer sentinel lymph nodes with and without micrometastases[J].Histopathology,2007,51:837-42.

Study of the relationship between the expression of Mass Cells and lymph node metastases and lymphangiogenesis in invasive ductal carcinoma.

LI Qing1,YANG Mei2,CAO Gui-ming2*.1.Department of Pathology,People's Hospi-tal of Liwan District of Guangzhou City,Guangzhou 510370,Guangdong,CHINA;2.Department of Pathology,the Affiliated Hospital of Nanhua University,Hengyang 421000,Hunan,CHINA

ObjectiveTo observe the expression of mass cells in breast invasive ductal carcinoma,and analyze the relationship between mass cells and lymph node metastasis and lymphangiogenesis.MethodsImmunohistochemistry(IHC)was used to detect the levels of Mass cells,and D2-40 was used to mark lymphatic vessels.ResultsThe quantity of mass cells showed significant different in benign breast lesions and invasive ductal carcinoma tissues(P＜0.01),and also showed significant difference between the three grades(gradeⅠ,gradeⅡ,and gradeⅢ)of invasive ductal carcinoma(P＜0.01);Statistically significant difference was also found in the quantity of the mass cells between invasive ductal carcinoma with lymph node metastasis and that without lymph node metastasis. ConclusionThe quantities of the mass cells was positively correlated with lymphangiogenesis and lymph node metastasis,which could be used as the valuable indexes for the diagnosis and long-term prognosis of breast invasive ductal carcinoma.

Breast carcinoma;Mass cells;Histological grading;LVD;Index for diagnosis

R737.9

A

1003—6350(2012)09—007—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2012.09.003

2011-10-20)

湖南省衛生廳項目(編號：B2006-122)；衡陽市2007年社會發展科技支撐計劃項目(編號：2007KS25)

黎晴(1983—)，女，湖南省瀏陽市人，醫師，碩士。

*通訊作者：曹桂明。E-mail：13975437349@163.com