新生兒缺氧缺血腦病血清hs-CRP、TNF-α和MMP-9的測(cè)定及臨床意義

田建川 嚴(yán)世統(tǒng)

重慶市巫山縣人民醫(yī)院，重慶巫山 404700

新生兒缺氧缺血性腦病（hypoxic-ischemic encephalopathy，HIE）是各種圍生期因素引起的缺氧和腦血流減少或暫停而導(dǎo)致胎兒和新生兒的腦損傷[1]，是引起新生兒死亡和慢性神經(jīng)系統(tǒng)損傷的主要原因之一。HIE可誘導(dǎo)多種細(xì)胞因子和炎性介質(zhì)釋放，如腫瘤壞死因子α（Tumor necrosis factorα，TNF-α）、hs-CRP、MMP-9[2]，但其具體機(jī)制仍不十分清楚。因此，筆者于2010年9月～2012年5月動(dòng)態(tài)觀察了45例HIE患兒血清hs-CRP、TNF-α和MMP-9水平的變化，探討hs-CRP、TNF-α和MMP-9在HIE中的發(fā)病機(jī)制。現(xiàn)報(bào)道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

將2010年9月～2012年5月入院的45例HIE患兒，均符合HIE診斷依據(jù)和診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]，男22例，女23例，出生體質(zhì)量（3 125±79）g，胎齡（39.84±8.70）周；輕度 18 例，中度 12 例，重度15例。另選同期在本院產(chǎn)房出生的30例健康新生兒為正常對(duì)照組，男 17 例，女 13 例，出生體質(zhì)量（3 098±80）g，胎齡（40.03±9.33）周；均無窒息、嚴(yán)重感染及神經(jīng)系統(tǒng)疾病史。兩組患兒在性別﹑胎齡﹑出生體重等方面比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 標(biāo)本采集與處理

HIE組入院后第1、3、7天清晨各抽靜脈血3 mL，健康對(duì)照組于出生后24 h抽靜脈血，立即分離血清后置-20℃冰箱保存待測(cè)。采用Quik Read速率免疫濁度法檢測(cè)CRP含量。血清TNF-α采用酶聯(lián)免疫（ELISA）法測(cè)定（深圳晶美有限公司）；血清MMP-9采用ELISA方法檢測(cè)（上海森雄科技實(shí)業(yè)有限公司試劑盒）。所有實(shí)驗(yàn)具體操作方法嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 兩組血清hs-CRP、TNF-α和MMP-9水平比較

HIE組血清hs-CRP、TNF-α和MMP-9水平均較健康對(duì)照組明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P<0.01），以發(fā)病后3 d升高最為明顯，后逐漸下降。見表1。

表1 兩組血清hs-CRP、TNF-α和MMP-9水平比較（±s）

表1 兩組血清hs-CRP、TNF-α和MMP-9水平比較（±s）

注：與正常對(duì)照組比較，*P<0.01；與 HIE組 1 d比較，#P<0.01；與HIE組3 d比較，△P<0.01

組別 例數(shù)（n）h s-C R P（m g/L）T N F-α（n g/m L）M M P-9（p g/m L）1 d H I E組 3 d 7 d正常對(duì)照組4 5 4 5 4 5 3 0 8.9 2±1.7 4*2 0.1 7±4.6 5#4.0 8±0.8 3#△0.9 3±0.1 8 1.1 5±0.2 3*1.8 7±0.3 5#0.8 4±0.1 6#△0.5 7±0.1 1 3 3.8 2±1.2 3*3 8.5 3±3.7 2#3 2.6 0±1.0 5#△2 8.7 1±1.1 8

2.2 發(fā)病后 3 d不同病情程度血清 hs-CRP、TNF-α和MMP-9水平的比較

HIE組重度患者血清hs-CRP、TNF-α和MMP-9水平均較輕度和中度患者明顯升高（P<0.05）。見表2。

表2 發(fā)病后3 d不同病情程度血清hs-CRP、TNF-α和MMP-9水平的比較（±s）

表2 發(fā)病后3 d不同病情程度血清hs-CRP、TNF-α和MMP-9水平的比較（±s）

注：與輕度比較，*P<0.01；與中度比較，#P<0.01

組別 例數(shù)（n） h s-C R P（m g/L） T N F-α（n g/m L） M M P-9 （p g/m L）輕度中度重度1 8 1 2 1 5 1 3.5 0±3.1 2 2 0.1 7±4.6 5*2 7.9 1±4.0 6#1.2 3±0.3 6 1.8 7±0.3 5*2.4 0±0.4 7#3 2.6 5±0.6 4 3 6.7 2±1.5 0*4 3.8 4±2.3 1#

3 討論

HIE是由于各種圍生期窒息引起的腦缺氧、缺血而導(dǎo)致新生兒急性死亡及遺留不同程度的神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥，其發(fā)病機(jī)制有：能量代謝障礙、細(xì)胞內(nèi)鈣超載、興奮性氨基酸毒性作用、自由基的損傷和炎癥反應(yīng)等。

炎癥反應(yīng)是HIE患者缺氧缺血性腦損傷導(dǎo)致神經(jīng)元凋亡和壞死的重要環(huán)節(jié)之一，其產(chǎn)生的多種免疫細(xì)胞及細(xì)胞因子均參與腦損傷的發(fā)生、發(fā)展及修復(fù)過程。hs-CRP、TNF-α和MMP-9都參與了HIE的病理生理過程，近年來其在腦缺血再灌注損傷過程中的作用越來越受到人們的關(guān)注。TNF-α可以誘導(dǎo)細(xì)胞死亡和引發(fā)炎癥反應(yīng)[4]。大量研究表明，TNF-α在新生兒窒息及HIE等腦損傷性疾病中是上調(diào)的。血清TNF-α水平升高可能與腦損傷后膠質(zhì)細(xì)胞破壞，腦水腫、缺氧缺血等刺激TNF-α表達(dá)及腦損傷后血腦屏障破壞，單核細(xì)胞、中性粒細(xì)胞進(jìn)入腦并釋放TNF-α有關(guān)[5-6]。hs-CRP是一種非特異性急性時(shí)相蛋白，是炎性反應(yīng)的敏感標(biāo)志物。當(dāng)組織損傷﹑缺血﹑缺氧時(shí)，其濃度急劇上升，hs-CRP水平是判斷組織損傷的較敏感指標(biāo)[7]。MMPs（基質(zhì)金屬蛋白）是降解ECM的蛋白酶類之一，其編碼基因具有同源性。近年來研究發(fā)現(xiàn)，腦缺血及再灌注損傷可誘導(dǎo)MMPs的表達(dá)，尤其是MMP-9和MMP-2增加更為顯著，其活性與腦血管通透性、血腦屏障通透性和腦水腫明顯相關(guān)。MMP-9可加重缺血腦組織毛細(xì)血管破壞，特別是血腦屏障微血管基底膜的破壞，上調(diào)的MMP-9通過降解細(xì)胞外基質(zhì)導(dǎo)致腦微血管結(jié)構(gòu)完整性破壞和血腦屏障損壞，造成繼發(fā)性腦水腫和腦損傷[8]。

本研究結(jié)果顯示，HIE患兒血清 hs-CRP、TNF-α和MMP-9水平明顯高于正常對(duì)照，且HIE組重度患者明顯高于輕度和中度患者。表明hs-CRP、TNF-α和MMP-9在HIE的發(fā)病中具有重要作用，可能參與了HIE的發(fā)生發(fā)展，但其機(jī)制有待于進(jìn)一步闡明。

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