張 玉,吳慧明,王 偉,徐麗紅,王建清
(1.浙江省農業科學院農產品質量標準研究所,浙江杭州310021;2.浙江大學農藥與環境毒理研究所,浙江杭州310029)
高效液相色譜法測定番茄及其制品中番茄甙的含量
張 玉1,吳慧明2,王 偉1,徐麗紅1,王建清1
(1.浙江省農業科學院農產品質量標準研究所,浙江杭州310021;2.浙江大學農藥與環境毒理研究所,浙江杭州310029)
建立了固相萃取-高效液相色譜(HPLC)測定番茄及番茄制品中番茄甙的方法。樣品中的番茄甙經過甲醇提取,PCX固相萃取法凈化,乙酰化后,采用高效液相色譜法進行測定。以乙腈和水(90∶10)為流動相,經過C18色譜柱分離,紫外檢測器檢測。結果表明:番茄甙的檢出限為 0.5mg/kg,方法回收率為90.5%~93.5%,相對標準差為1.7%~3.2%。該方法準確、靈敏、適用于番茄及番茄制品中番茄甙的測定。
番茄甙,測定,HPLC
Abstract:A method was developed for determination of tomatine in tomato and its processed products by high performance liquid chromatography(HPLC).The tomatine in sample was extracted by methanol,cleaned up with PCX solid-phase extraction cartridge,then acetylated by acetic anhydride and determined by HPLC.The mobile phase consisted of 90%acetonitrile and 10%water.The tomatine was separated on C18column and determined with UV detector at 205nm.The results showed:the detection limit of tomatine was 0.5mg/kg,the average recoveries were from 90.5%to 93.5%,and the relative standard deviations(RSDs)was from 1.7%to 3.2%.This method was accurate,sensitive and effective for determination of tomatine in tomato and its processed products.
Key words:tomatine;determination;HPLC
番茄甙又名番茄素、番茄堿,是存在于番茄葉和果實中的次生代謝產物,是一種含有D-木糖、D-半乳糖及兩分子葡萄糖的甾體類糖苷生物堿,具有抗菌和驅蟲的作用,其含量隨著番茄成熟而降低[1]。番茄甙高濃度下具有一定的毒性[1],因此美國規定新選育的番茄品種必須檢測番茄甙的含量。但也有研究發現,一定含量的番茄甙具有降低膽固醇含量,提高免疫力,抗菌等生物活性[1-4],鑒于其毒性及生物活性,測定番茄及其制品中番茄甙的含量就尤為重要。目前國內外的測定方法有分光光度法[5],高效液相色譜法(HPLC)[6-8]、氣相色譜-質譜聯用法[9]等。但分光光度法易受樣品中的雜質干擾,而使測定結果不準;氣相色譜-質譜聯用法需將糖苷水解才能測定,不能直接定量;而高效液相色譜法相對比較簡單、準確,但由于番茄甙的紫外吸收較低,用紫外檢測器檢測靈敏度不高,且易受雜質干擾。……