HPLC法測祛瘀止痛膠囊中姜黃素的含量

2012-09-12 11:34:56黎潭輝羅淑芳

中國實用醫藥 2012年19期

黎潭輝羅淑芳

祛瘀止痛膠囊是惠東縣中醫院研發的醫院制劑，由姜黃、三七、紅花、桃仁等15味中藥組成，具有活血祛瘀、消腫止痛。用于跌打損傷之瘀腫疼痛。姜黃具有破血行氣、通經止痛之功，用于跌撲腫痛［1］，而姜黃素是姜黃中的主要成分，因此建立祛瘀止痛膠囊中姜黃素的含量測定方法加以控制質量具有實際意義。本文通過文獻研究，采用HPLC 法測定樣品中姜黃素的含量［2］，建立祛瘀止痛膠囊中姜黃素的含量測定方法，為更加有效的控制祛瘀止痛膠囊的質量提供了參考。

1 儀器與試藥

日本島津LC-10AT高效液相色譜儀，日本島津SPD-10A紫外檢測器。姜黃素對照品(購于中國藥品生物制品檢定所，批號:110823-200603);祛瘀止痛膠囊(惠東縣中醫院自制)。水為屈臣氏純凈水，乙腈為色譜純(默克公司)，其余為分析純。

2 方法與結果

2.1 色譜條件色譜柱為Kromasil C18柱(250 mm×4.6 mm);流動相:乙腈-4%冰醋酸溶液(48∶52);檢測波長為430 nm;柱溫30℃;流速1.0 ml/min;進樣量5 μL。理論板數按姜黃素峰計算大于5000。

2.2 對照品貯備液的制備稱取姜黃素對照品0.01052 g，置10 ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密吸取1 ml對照品溶液置100 ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.3 供試品溶液的制備取本品內容物，研細，稱取約0.1 g，精密稱定，精密加甲醇10 ml，密塞，稱定重量，超聲處理20 min，放冷，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續濾液，即得。

2.4 線性關系考察分別精密吸取上述對照品溶液2.5、5、7.5、10、15、20 μl，注入液相色譜儀，測定，以姜黃素進樣量(X)對峰面積(Y)進行線性擬合，得回歸方程為:Y=43661±s410.99，r=0.9994。結果表明姜黃素在 0.0263 μg ～ 0.2104 μg范圍內線性關系良好。

2.5 精密度考察精密吸取對照品溶液5 μl，按上述色譜條件連續重復進樣6次，結果相對標準偏差(RSD)為0.99%。表明該儀器的精密度好。

2.6 穩定性考察取供試品溶液于制備后1、2、4、8、12、24 h分別進樣5 μl，峰面積值的RSD=1.33%，表明樣品溶液在24 h內穩定。

2.7 重復性考察取同一批樣品(批號:20110504)6份，照“2.3”項下方法制備供試品溶液，按“2.1”項下色譜條件測定，測定其姜黃素含量。結果RSD:1.28%(n=6)，表明本品含量測定方法重復性較好。

2.8 回收率考察精密稱取已知含量的樣品(批號:20110504)6份，每份約0.05 g，精密加入姜黃素對照品溶液(濃度為 0.792 mg/ml)2 ml，再精密加入甲醇 10 ml，按“2.3”項下方法制備供試品溶液，按“2.1”項下色譜條件測定，計算加樣回收率，結果平均回收率為98.0%，RSD為1.58%(見表1)。