HPLC法測祛瘀止痛膠囊中姜黃素的含量

2012-09-12 11:34:56黎潭輝羅淑芳

中國實用醫(yī)藥 2012年19期

黎潭輝羅淑芳

祛瘀止痛膠囊是惠東縣中醫(yī)院研發(fā)的醫(yī)院制劑，由姜黃、三七、紅花、桃仁等15味中藥組成，具有活血祛瘀、消腫止痛。用于跌打損傷之瘀腫疼痛。姜黃具有破血行氣、通經(jīng)止痛之功，用于跌撲腫痛［1］，而姜黃素是姜黃中的主要成分，因此建立祛瘀止痛膠囊中姜黃素的含量測定方法加以控制質(zhì)量具有實際意義。本文通過文獻研究，采用HPLC 法測定樣品中姜黃素的含量［2］，建立祛瘀止痛膠囊中姜黃素的含量測定方法，為更加有效的控制祛瘀止痛膠囊的質(zhì)量提供了參考。

1 儀器與試藥

日本島津LC-10AT高效液相色譜儀，日本島津SPD-10A紫外檢測器。姜黃素對照品(購于中國藥品生物制品檢定所，批號:110823-200603);祛瘀止痛膠囊(惠東縣中醫(yī)院自制)。水為屈臣氏純凈水，乙腈為色譜純(默克公司)，其余為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件色譜柱為Kromasil C18柱(250 mm×4.6 mm);流動相:乙腈-4%冰醋酸溶液(48∶52);檢測波長為430 nm;柱溫30℃;流速1.0 ml/min;進樣量5 μL。理論板數(shù)按姜黃素峰計算大于5000。

2.2 對照品貯備液的制備稱取姜黃素對照品0.01052 g，置10 ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密吸取1 ml對照品溶液置100 ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.3 供試品溶液的制備取本品內(nèi)容物，研細，稱取約0.1 g，精密稱定，精密加甲醇10 ml，密塞，稱定重量，超聲處理20 min，放冷，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液，即得。

2.4 線性關(guān)系考察分別精密吸取上述對照品溶液2.5、5、7.5、10、15、20 μl，注入液相色譜儀，測定，以姜黃素進樣量(X)對峰面積(Y)進行線性擬合，得回歸方程為:Y=43661±s410.99，r=0.9994。結(jié)果表明姜黃素在 0.0263 μg ～ 0.2104 μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.5 精密度考察精密吸取對照品溶液5 μl，按上述色譜條件連續(xù)重復(fù)進樣6次，結(jié)果相對標準偏差(RSD)為0.99%。表明該儀器的精密度好。

2.6 穩(wěn)定性考察取供試品溶液于制備后1、2、4、8、12、24 h分別進樣5 μl，峰面積值的RSD=1.33%，表明樣品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.7 重復(fù)性考察取同一批樣品(批號:20110504)6份，照“2.3”項下方法制備供試品溶液，按“2.1”項下色譜條件測定，測定其姜黃素含量。結(jié)果RSD:1.28%(n=6)，表明本品含量測定方法重復(fù)性較好。

2.8 回收率考察精密稱取已知含量的樣品(批號:20110504)6份，每份約0.05 g，精密加入姜黃素對照品溶液(濃度為 0.792 mg/ml)2 ml，再精密加入甲醇 10 ml，按“2.3”項下方法制備供試品溶液，按“2.1”項下色譜條件測定，計算加樣回收率，結(jié)果平均回收率為98.0%，RSD為1.58%(見表1)。