PSE-GC法同時(shí)測定餅干中兩種抗氧化劑

林太鳳，張淑芬，王惠琴，鄭大威

（1.北京工業(yè)大學(xué)生命科學(xué)與生物工程學(xué)院，北京100124；2.北京市飲料及食品添加劑質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)站，北京100124）

PSE-GC法同時(shí)測定餅干中兩種抗氧化劑

林太鳳1，2，張淑芬1，2，王惠琴1，2，鄭大威1，2

（1.北京工業(yè)大學(xué)生命科學(xué)與生物工程學(xué)院，北京100124；2.北京市飲料及食品添加劑質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)站，北京100124）

建立測定餅干中的2種抗氧化劑叔丁基對羥基茴香醚（BHA）和二丁基羥基甲苯（BHT）的加壓溶劑萃取-氣相色譜法（PSE-GC法）。采用PSE法進(jìn)行樣品萃取，萃取液經(jīng)中性氧化鋁凈化后，進(jìn)行GC分析。PSE-GC法測定餅干中BHT和BHA的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為0.5%～3.1%，并且在2.0 μg/mL～200.0 μg/mL范圍內(nèi)色譜峰面積與組分濃度均有很好的線性相關(guān)性（r≥0.9994），檢出限為 0.5 μg/mL，回收率為 94.68%～96.80%。PSE-GC 法簡便、快速、效率高，方法的重現(xiàn)性、線性相關(guān)性以及檢出限理想，適用于餅干中BHT和BHA含量的同時(shí)快速檢測。

加速溶劑萃取；氣相色譜；抗氧化劑；餅干

Abstract:To establish a new method for determining tow antioxidants butylated hydroxyanisole (BHA)and butylated-hydroxytoluene(BHT)in food using pressurized solvent extraction(PSE)and HPLC.The sample was extracted by PSE and the extract was analyzed by GC after clear-up with neutral aluminium oxide.The recoveries of this method ranged from 94.68%to 96.80%with RSDs ranged from 0.5%to 3.1%.The developed method was linear over the range 2.0 μg/mL-200.0 μg/mL with correlation coefficients(r≥0.9994)and the detection limit of the method was 0.5 μg/mL.this method is simple,fast,affective,and has good repetition.It can be used for the simultaneous determination of BHA,BHT in biscuit.

Key words：pressurized solvent extraction;GC;antioxidant;biscuit

叔丁基對羥基茴香醚與二丁基羥基甲苯是2種具有持久抗氧化能力并廣泛用于油脂類食品中的添加劑。目前國標(biāo)方法對BHA及BHT檢測的前處理方法比較繁瑣費(fèi)時(shí)，無法應(yīng)對突發(fā)事件的快速檢測。快速壓力溶劑萃取法具有快速、萃取效率高、重復(fù)性和精密度好等特性，已在藥物分析[1-4]、環(huán)境分析[5-9]、食品質(zhì)量安全控制[10-13]等都有了廣泛的應(yīng)用，氣相色譜分析法輔以PSE能很好實(shí)現(xiàn)抗氧化劑的快速檢測。本文對PSE-GC法快速檢測餅干中的兩種抗氧化劑（BHA和BHT）進(jìn)行了研究。

1 材料和方法

1.1 儀器與試劑1.1.1 儀器

6890N型氣相色譜儀（附氫火焰離子化檢測器F ID）：美國Agilent公司；快速壓力溶劑萃取系統(tǒng)：美國應(yīng)用分離公司；DryVap全自動定量濃縮系統(tǒng)：美國Horizon公司。

1.1.2 試劑

BHA標(biāo)準(zhǔn)品：德國Aμgsburg公司；BHT標(biāo)準(zhǔn)品：美國Supelco公司；甲醇（色譜純）、乙腈（色譜純）、中性氧化鋁（分析純）：以上所用試劑均為國產(chǎn)試劑。

1.2 方法

1.2.1 色譜條件

氣相色譜柱為HP-5毛細(xì)管柱（30 m×0.32 mm，0.25μm,Aglient）。程序升溫：初溫為130℃，以10℃/min的升溫速率升至200℃。進(jìn)樣口溫度和檢測器溫度分別為250℃和270℃；載氣為N2，流速為1.2 mL/min，分流比為 10∶1，進(jìn)樣量為 1 μL。

1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

精確稱取BHA、BHT標(biāo)準(zhǔn)物各0.1000 g，用甲醇溶解并定容至100.00 mL，此為BHA與BHT的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，各組分質(zhì)量濃度均1.0 mg/mL。然后分別定量吸取BHA和BHT混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，采用甲醇逐級稀釋的方式，得到 2.0、5.0、10.0、20.0、50.0、100.0、200.0 μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液。然后分別吸取1 μL樣品進(jìn)行GC色譜分析，并以BHA和BHT的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，對應(yīng)的峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線并進(jìn)行線性回歸。

1.2.3 樣品處理

準(zhǔn)確稱取10 g（精確至0.01 g）粉碎后的餅干樣品于22 mL萃取釜中進(jìn)行萃取。按設(shè)定的萃取條件進(jìn)行PSE萃取。萃取液濃縮至1 mL左右，用甲醇-乙腈溶液（1∶1）定容至5.00 mL，作為樣品溶液。吸取1.0 mL樣品溶液，加入0.5 g中性氧化鋁，振蕩，靜置，吸取上清液經(jīng)0.22 μm微孔濾膜過濾，進(jìn)行GC分析。

1.2.4 PSE萃取條件

萃取溫度：90℃；萃取壓力：120 bar；萃取時(shí)間：5 min；萃取釜：22 mL；循環(huán)次數(shù)：3 次；氮?dú)獯祾撸? min；萃取溶劑：甲醇：乙腈=1∶1。

2 結(jié)果與討論

2.1 色譜條件的選擇

圖1為在給定的色譜條件下的標(biāo)準(zhǔn)樣品色譜圖。

圖1 標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖Fig.1 Chromatogram of standard solution

從圖1可以看出組分BHA和BHT具有較好的分離度，并在5 min內(nèi)就能完成一次樣品分析，具有較高的分析效率。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線和檢出限

將系列標(biāo)準(zhǔn)工作液注入氣相色譜儀進(jìn)行測定，以峰面積為縱坐標(biāo)，質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，信噪比（S/N）為3對應(yīng)的BHA和BHT的濃度為檢出限。結(jié)果表明 BHA 和 BHT 在 2.0 μg/mL～200.0 μg/mL濃度范圍內(nèi)均有很好的線性相關(guān)性，回歸方程、相關(guān)系數(shù)和檢出限見表1。

表1 BHA與BHT的回歸方程、相關(guān)系數(shù)及檢出限Table 1 Regression equations and correlation coefficients and detect limit

2.3 萃取液凈化方法的選取

采用PSE萃取方法萃取BHA和BHT的同時(shí)，會有少量油脂被萃取出來，如果樣品液經(jīng)過濃縮后直接進(jìn)入氣相色譜儀中，容易污染色譜柱，影響色譜柱的使用壽命。在國家標(biāo)準(zhǔn)方法[14]中采用過柱方法對樣品溶液進(jìn)行進(jìn)化，但是這種方法的比較復(fù)雜且耗時(shí)較長，采用中性三氧化二鋁直接凈化樣品，同樣能達(dá)到很好的油脂去除效果，很好地保護(hù)色譜系統(tǒng)。

2.4 加標(biāo)回收率分析

在本實(shí)驗(yàn)的分析條件下，分3個(gè)添加水平2平行進(jìn)行回收率試驗(yàn)，加入量及回收率結(jié)果見表2。

方法的回收率為 BHA 94.32%～97.10%、BHT 94.92%～97.20%。對每個(gè)樣品連續(xù)進(jìn)樣6次進(jìn)行精確度測試實(shí)驗(yàn)，RSD在0.5%～3.1%范圍內(nèi)，由此可見方法的回收率高，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差小，重現(xiàn)性好。

表2 BHA和BHT的回收率試驗(yàn)結(jié)果Table 2 Recoveries for BHA and BHT at three levels

2.5 市售樣品的測定

按實(shí)驗(yàn)建立的方法對兩種市售樣品進(jìn)行檢測，這2種食品檢測出了BHA和BHT，但單項(xiàng)和總量均未超過《中華人民共和國食品添加劑使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》的規(guī)定量[14]，結(jié)果見表 3。

表3 餅干中BHA和BHT的測定結(jié)果Table 3 Analytical results of BHA and BHT in biscuit

3 結(jié)論

采用PSE方法對餅干中的2種抗氧化劑BHA和BHT進(jìn)行提取，萃取液經(jīng)中性氧化鋁凈化后，利用GC進(jìn)行分析測定，從而建立了餅干中兩種抗氧化劑的PSE-GC新方法。比較國家標(biāo)準(zhǔn)方法[15]，采用PSE萃取食品中的BHA和BHT，大大縮短了樣品前處理所需時(shí)間，還可以進(jìn)行批量檢測。此外，采用中性氧化鋁對萃取液直接進(jìn)行凈化，同樣能達(dá)到去除萃取液中油脂，提高測定效率的目的。該方法簡便快速、效率高，方法的重現(xiàn)性、線性相關(guān)性以及檢出限理想，能滿足目前食品安全快速檢測的要求。

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Determination of Two Antioxitants in Biscuit by Pressurized Solvent Extraction and GC

LIN Tai-feng1,2,ZHANG Shu-fen1,2,WANG Hui-qin1,2,ZHENG Da-wei1,2
（1.College of Life Science and Bio-engineering,Beijing University of Technology,Beijing 100124,China;2.Quality Supervision and Inspection Station of Beverages and Food Additives of Beijing,Beijing 100124,China）

2011-12-11

林太鳳（1978—），男（漢），助理研究員，碩士研究生，主要從事食品質(zhì)量與安全分析研究。