骨髓間質干細胞治療急性腦梗死患者60例

詹三華 張魯峰 姚衛民 楊明輝 宋曉玲 (武警河南總隊醫院神經內科，河南 鄭州 450052)

腦梗死治療后存活者多數遺留癱瘓、言語不清等嚴重功能障礙，進一步恢復極其困難。因此，如何積極有效地在急性期恢復神經功能是促進痊愈、減少殘疾的關鍵，是治療重點。近年來干細胞移植在治療腦梗死的基礎與臨床研究取得了較好效果〔1〕，給腦梗死治療帶來了突破性進展。本研究重點觀察自體骨髓干細胞移植治療急性腦梗死(ACI)的療效及安全性。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2010年1月至2010年12月我院神經內科住院的ACI患者120例，分為觀察組60例，男32例，女28例，年齡40～76(平均57.5)歲，發病時間(1.5±1.1)d;對照組60例，男35例，女25例，年齡41～75(平均57.3)歲，發病時間(1.5±1.2)d;兩組性別、年齡、病情輕重程度、病程分布均衡，無顯著差異，具有可比性。均符合2000年全國腦血管病專題研討會修訂的ACI診斷標準，發病72 h以內，并行頭顱CT及MRI檢查確診為頸內動脈系統腦梗死，且患者無意識障礙。

1.2 治療方法 觀察組在常規治療基礎上，于發病后第1周內，取自體骨髓150～200 ml，進行骨髓細胞分離，分離出的骨髓間質干細胞(BMSCs)(圖1)分成2份，其中1份干細胞當天應用，另外1份干細胞進行體外定向培養擴增7 d后應用，應用方式為通過腰椎穿刺注射到蛛網膜下腔(圖2)。對照組給予常規藥物治療，同時配合康復鍛煉。

1.3 療效評定及預后評估 分別在治療前、治療后半個月及1個月進行Barthel指數(BI)評分和中國腦卒中評分(CSS)。BI評分:0～20分極嚴重殘疾;25～45分嚴重殘疾;50～70分中度殘疾;75～95分輕度殘疾;100分為正常。CSS評分:0～15分輕度神經功能缺損，16～30分中度缺損，31～45分重度缺損。

1.4 統計學處理 計數資料用Ridit檢驗，計量資料以±s表示，組間比較用t檢驗。

2 結果

兩組在治療半個月后日常生活能力BI評分即有顯著改善(P＜0.01);治療后1個月，兩組BI評分增加，觀察組BI評分明顯優于對照組(P＜0.01)。兩組治療后半個月CSS評分均有所下降，兩組差異顯著(P＜0.01);治療后1個月，CSS評分均有所下降，兩組差別顯著(P＜0.01)。見表1。觀察組鞘內注射患者術后無明顯不適，定期復查血尿常規、肝腎功能、頭顱CT及MRI較前無明顯異常。

表1 兩組治療前后BI、CSS評分比較(± s，n=30)

表1 兩組治療前后BI、CSS評分比較(± s，n=30)

與治療前比較:1)P＜0.01;與對照組比較:2)P＜0.01

組別 BI治療前 治療后 半個月CSS治療前 治療后 半個月觀察組 34.71±7.62 68.25±6.511)2) 77.02±22.621)2) 25.31±6.21 15.21±4.241)2) 11.13±6.251)2)對照組 35.23±6.51 53.21±5.741) 61.12±15.101) 24.64±8.15 19.41±5.211) 16.67±5.431)

圖1 培養7 d后BMSCs(×200)

圖2 BMSCs經腰穿移植蛛網膜下腔

3 討論

近年來，腦梗死患者在腦卒中單元接受超早期溶栓、腦神經營養、腦保護藥物及康復理療、護理等措施取得明顯效果，但存活者仍有50%～70%遺留肢體癱瘓、言語不清等嚴重功能障礙，因此，在急性期積極有效地促進腦缺血區恢復神經功能是促進疾病痊愈、減少殘疾的關鍵，是治療的重點。

干細胞具有很強的自我復制能力、多項分化潛能、自我更新能力、對損傷和疾病反應能力。多項動物腦缺血模型實驗中，BMSCs移植在急性期應用，腦缺血區域有移植后神經元、神經膠質細胞及少突膠質細胞標志蛋白表達，神經功能均明顯恢復〔2～4〕。所以，在腦梗死急性期于神經功能損傷區補充外源性干細胞對促進神經功能恢復有重要意義。外源性干細胞可能通過重建受損神經元回路、釋放遞質或分泌多種神經營養因子、減輕腦卒中誘導的炎癥反應、誘導血管形成起作用〔5〕。多項研究顯示，干細胞具有旺盛的分泌能力，能分泌多種神經生長因子、腦源性神經營養因子、膠質細胞系神經營養因子等，可以對神經干細胞的活性、神經細胞軸突生長起顯著作用，從而改善臨床癥狀〔6，7〕。從臨床觀察看，患者移植后短期內臨床癥狀改善應該是干細胞的營養作用發揮的結果。

本研究結果表明，聯合干細胞移植治療較常規治療能明顯促進患者肌力、肌張力、語言、智力等恢復，并降低致殘率，提高患者生活質量，安全可靠，未發現毒副作用。但本次研究樣本量小，遠期療效尚無結論。干細胞移植在腦梗死急性期應用尚屬于探索階段，其應用指征、途徑、干細胞純化程度、應用數量、遠期療效等有待于臨床上進一步更大樣本研究。

1 Hennemann B，Ickenstein G，Sauerbruch S，et al.Mobilization of CD34+hematopoietic cells colony-forming cells and long-term culture-initiating cells into the peripheral blood of patients with an acute cerebral ischemic insult〔J〕.Cytotherapy，2008;10(3):303-11.

2 Zhao LR，Duan WM，Reyes M，et al.Human bone marrow stem cells exhibit neural phenotypes and ameliorate neurological deficits after grafting into the ischemic brain of rats〔J〕.Exp Neurol，2002;174(1):11-20.

3 Li Y，Chen J，Zhang CL，et al.Gliosis and brain remodeling after treatment stroke in rats with marrow stromal cells〔J〕.Glia，2005;49(3):407-17.

4 Wang L，Li Y，Chen X，et al.MCP-1，IL-8 and ischemic cerebral tissue enhance human bone marrow stromal cell migration in interface culture〔J〕.Hematology，2002;7(2):113-7.

5 葉麗莎，白 雪.神經干細胞移植治療缺血性腦卒中研究新進展〔J〕.現代診斷與治療，2010;21(1):38-40.

6 Lu P，Jones LL，Snyder EY，et al.Neural stem cells constitutively secrete neurotrophic factors and promote extensive host axonal growth after spinal cord injury〔J〕.Exp Neural，2003;181(2):115-29.

7 Pluchino S，Quattrini A，Brambilla E，et al.Injection of adult neurospheres induce recovery in a chronic model of multiple sclerosis〔J〕.Nature，2003;422(6933):688-94.