多沙唑嗪對兔食餌性高脂血癥作用

趙靜惠 楊梅 閆勝敏 段保湘

作為一種長效、高選擇性α1受體阻斷劑，以往的研究更多地關注多沙唑嗪(doxazosin，DOX)治療良性前列腺增生(benign prostatic hyperplasia，BPH)合并下尿路癥狀(lower urinary tract symptoms，LUTS)(BPH/LUTS)和高血壓病方面。近年來越來越多的實驗證據表明DOX對血脂代謝具有良好影響，是臨床抗高血壓治療中的一種有益的輔助用藥［1］。因此，本研究擬采用高脂飲食建立兔餌食性高脂血癥，觀察DOX對兔血脂水平的影響，為DOX的臨床應用提供依據。

1 材料與方法

1.1 動物分組及模型制備 選取健康雄性新西蘭大耳白兔(體重1.5～2.5 kg，河北省實驗動物中心提供)80只，給予普通飼料適應性喂養1周后隨機選取10只飼以普通飼料，另外70只飼以高脂飼料(每100 g普通兔飼料中含7.5 g蛋黃粉、1 g膽固醇和8 g豬油)。喂養4周時，高脂飼料組兔死亡22只。第4周末經耳緣靜脈取空腹血測定血清總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)和低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)，高脂飼料組48只兔中，血清TC水平超過10 mmol/L 40只，隨機分為4組，并隨機選取2組納入該實驗：DOX治療組(10只)和高脂飲食組(10只)。正常飲食組10只動物存活良好，全部納入實驗。

1.2 動物飼養及給藥 正常飲食組：喂普通兔飼料，4周后每日定時給予無菌雙蒸水1 ml/kg，腹腔注射。高脂飲食組：每日給予高脂飲食，4周后在高脂飲食的基礎上每日定時給予雙蒸水1 ml/kg腹腔注射。DOX治療組：高脂飲食4周后，在高脂飲食基礎上每日定時予DOX 1 ml/kg，腹腔注射。各組均連續給予無菌雙蒸水或DOX 9周。實驗期間各組動物分籠喂養，自由飲水，每只動物給予飼料量為100 g/d。每周動物稱重1次，根據新的體質量調整給藥劑量。

1.3 藥液配制 精確稱取一定量的DOX(華北制藥集團新藥研究開發公司)干燥粉末，加適量雙蒸水配制成1 mg/ml溶液。為了確保藥物完全溶解，以雙蒸水定容后均超聲20 min;溶液儲存于棕色瓶中，置陰暗、干燥處保存備用。

1.4 血脂測定 分別于實驗開始時(0周)、第4周末、第7周末、第10周末經耳緣靜脈抽取空腹血標本約2 ml，注入促凝生化管中，常溫靜置3 h，置-4℃冰箱保存24 h后，離心15 min，分離血清。使用全自動生物化學分析儀(日本日立公司)采用酶法測定3組血清TC、TG和LDL-C的水平。實驗結束(第13周末)處死動物前抽取空腹動脈血標本測定上述指標。

1.5 統計學分析 應用GraphPad Prism 5.0和Instat-3軟件，計量資料以±s表示，組間各對應時間點的血脂參數采用雙因素方差分析，P＜0.05時，進一步采用Bonferroni’s test比較兩對應點間的效應，同一組內不同時間點間的數據分析采用單因素方差分析和Dunnett’s test檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

正常飲食組TC、TG和LDL-C雖有上下波動，但無逐漸升高趨勢，而高脂飲食組TC、TG和LDL-C均呈逐漸升高，DOX治療組在第7周后升高趨勢變平緩。與正常飲食組相比，高脂飲食組和DOX治療組在第4～13周時，兔血清TC、TG、LDL-C水平顯著升高(P ＜0.01)。DOX治療組兔血清TC、TG、LDL-C水平與高脂飲食組比較，差異無統計學意義(P＞0.05)。與給藥之前(第4周末)相比，正常飲食組家兔在第7～13周血清TG、LDL-C顯著降低(P＜0.05或＜0.01)，高脂飲食組在第10～13周時，兔血清TC水平顯著升高(P＜0.01)，而DOX治療組血清TC水平未進一步升高;高脂飲食組在第7～13周、DOX治療組在第10周時兔血清LDL-C水平顯著升高(P＜0.05和＜0.01)但是，DOX治療組在第13周時兔血清LDL-C水平的上升程度無統計學意義(P＞0.05)。見表1。

表1 多沙唑嗪對兔血脂的影響mmol/L，±s

表1 多沙唑嗪對兔血脂的影響mmol/L，±s

注：與正常飲食組比較，*P ＜0.01;與第4周比較，#P ＜0.05，△P ＜0.01

組別 0周 第4周 第7周 第10周 第13周正常飲食組(n=9)TC 1.41±0.27 1.53±0.38 1.44±0.66 0.98±0.60 1.13±0.47 TG 1.86±0.81 1.25±0.29 0.78±0.51# 0.55±0.28△ 0.75±0.32△LDL-C 0.52±0.21 0.74±0.34 0.23±0.16△ 0.24±0.12△ 0.23±0.14△高脂飲食組(n=6)TC 1.73±0.57 28.63±7.65* 35.26±7.88* 41.16±4.11＊△ 40.83±3.90＊△TG 1.76±0.81 3.87±2.49* 3.87±1.08* 4.67±2.97* 5.71±2.50*LDL-C 0.74±0.38 16.21±9.59* 24.64±8.55*# 25.39±4.19*# 28.46±3.81＊△DOX治療組(n=9)TC 1.24±0.45 29.36±7.94* 35.58±11.58* 38.41±6.84* 37.59±6.09*TG 1.87±0.56 4.10±2.43* 3.60±2.06* 3.95±1.42* 4.88±1.91*LDL-C 0.67±0.29 17.66±8.84* 18.45±8.21* 26.93±6.38*# 25.50±6.70*

3 討論

α1受體廣泛分布于人體多種組織內，起著調節血壓、胰島素分泌以及脂類代謝的作用。DOX是一種長效、高選擇性α1受體阻斷劑，臨床常使用其消旋體(racemic-doxazosin，rac-DOX)。在自主神經系統中，它抑制去甲腎上腺素與腎上腺素能受體結合，導致平滑肌細胞血管緊張素釋放減少，降低外周血管阻力，從而達到有效的降壓目的［2］，它還可以降低膀胱頸平滑肌的張力，使前列腺擴張，從而緩解尿路梗阻癥狀［3］。DOX可作為二線或三線抗高血壓藥物，同時也是治療良性前列腺增生的一線用藥［4］。有研究發現用于降血壓治療時它甚至能夠逆轉其他降血壓藥物如利尿劑、β受體阻斷劑等對血脂代謝的不利影響［5］。BPH是老年男性常見疾病，發病率隨年齡而迅速增長，同時老年患者常常合并有脂質代謝異常。因此對于BPH合并脂代謝異常的患者，應考慮到DOX改善BPH患者的排尿癥狀和尿流率及降低血脂的雙重作用。

20世紀80年代首次有研究表明抗高血壓藥物多沙唑嗪具有調節脂質和脂蛋白水平的作用，它可使血漿TC、LDL-C、TG濃度降低，LDL-C、HDL-C/TC升高［6-8］。有學者探索了 DOX改善血脂水平的可能作用機制：(1)DOX可增加肝臟LDL受體活性［9］，使肝臟攝取、分解LDL增加。(2)減少細胞內TC的合成［10］。(3)增加脂蛋白脂酶活性和 VLDL分解［11］。(4)增加磷脂酰膽堿-膽固醇脂肪酰轉移酶活性，有助于提高HDL-ch的濃度和HDL轉運肝外組織TC的能力。(5)DOX通過抑制激活因子2α(AP2α)，從而促進ATP結合轉運子 A1(ABCA1)的表達和 HDL的生物合成［12］。(6)可有效減少直徑小于25.5 mm的低密度脂蛋白顆粒。

本實驗中，在相同的高膽固醇飲食條件下，對形成高脂血癥兔模型進行9周的DOX治療，結果：與高脂飲食對照組相比，DOX連續腹腔注射給藥3周、6周和9周對高血脂兔的血清TC、TG、HDL-C和LDL-C水平無顯著影響。但是，當以給藥前的高血脂參數作為對照組時，高脂飲食組兔隨高脂飼養的時間延長，血清TC和LDL-C水平進一步顯著升高;而DOX治療組兔的血清LDL-C水平未顯著升高。研究結果提示，DOX對高血脂兔血清TC和LDL-C紊亂具有輕度的改善作用。同時實驗中，我們還發現正常飲食組家兔在3個月的飼養過程血清TG和LDL-C水平隨著飼養時間延長出現輕度但顯著的降低的現象，我們尚未見相關報道，其生理學意義有待探討。

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