多沙唑嗪對兔食餌性高脂血癥作用

趙靜惠 楊梅 閆勝敏 段保湘

作為一種長效、高選擇性α1受體阻斷劑，以往的研究更多地關(guān)注多沙唑嗪(doxazosin，DOX)治療良性前列腺增生(benign prostatic hyperplasia，BPH)合并下尿路癥狀(lower urinary tract symptoms，LUTS)(BPH/LUTS)和高血壓病方面。近年來越來越多的實驗證據(jù)表明DOX對血脂代謝具有良好影響，是臨床抗高血壓治療中的一種有益的輔助用藥［1］。因此，本研究擬采用高脂飲食建立兔餌食性高脂血癥，觀察DOX對兔血脂水平的影響，為DOX的臨床應(yīng)用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 動物分組及模型制備 選取健康雄性新西蘭大耳白兔(體重1.5～2.5 kg，河北省實驗動物中心提供)80只，給予普通飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后隨機(jī)選取10只飼以普通飼料，另外70只飼以高脂飼料(每100 g普通兔飼料中含7.5 g蛋黃粉、1 g膽固醇和8 g豬油)。喂養(yǎng)4周時，高脂飼料組兔死亡22只。第4周末經(jīng)耳緣靜脈取空腹血測定血清總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)和低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)，高脂飼料組48只兔中，血清TC水平超過10 mmol/L 40只，隨機(jī)分為4組，并隨機(jī)選取2組納入該實驗：DOX治療組(10只)和高脂飲食組(10只)。正常飲食組10只動物存活良好，全部納入實驗。

1.2 動物飼養(yǎng)及給藥 正常飲食組：喂普通兔飼料，4周后每日定時給予無菌雙蒸水1 ml/kg，腹腔注射。高脂飲食組：每日給予高脂飲食，4周后在高脂飲食的基礎(chǔ)上每日定時給予雙蒸水1 ml/kg腹腔注射。DOX治療組：高脂飲食4周后，在高脂飲食基礎(chǔ)上每日定時予DOX 1 ml/kg，腹腔注射。各組均連續(xù)給予無菌雙蒸水或DOX 9周。實驗期間各組動物分籠喂養(yǎng)，自由飲水，每只動物給予飼料量為100 g/d。每周動物稱重1次，根據(jù)新的體質(zhì)量調(diào)整給藥劑量。

1.3 藥液配制 精確稱取一定量的DOX(華北制藥集團(tuán)新藥研究開發(fā)公司)干燥粉末，加適量雙蒸水配制成1 mg/ml溶液。為了確保藥物完全溶解，以雙蒸水定容后均超聲20 min;溶液儲存于棕色瓶中，置陰暗、干燥處保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4 血脂測定 分別于實驗開始時(0周)、第4周末、第7周末、第10周末經(jīng)耳緣靜脈抽取空腹血標(biāo)本約2 ml，注入促凝生化管中，常溫靜置3 h，置-4℃冰箱保存24 h后，離心15 min，分離血清。使用全自動生物化學(xué)分析儀(日本日立公司)采用酶法測定3組血清TC、TG和LDL-C的水平。實驗結(jié)束(第13周末)處死動物前抽取空腹動脈血標(biāo)本測定上述指標(biāo)。

1.5 統(tǒng)計學(xué)分析 應(yīng)用GraphPad Prism 5.0和Instat-3軟件，計量資料以±s表示，組間各對應(yīng)時間點的血脂參數(shù)采用雙因素方差分析，P＜0.05時，進(jìn)一步采用Bonferroni’s test比較兩對應(yīng)點間的效應(yīng)，同一組內(nèi)不同時間點間的數(shù)據(jù)分析采用單因素方差分析和Dunnett’s test檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

正常飲食組TC、TG和LDL-C雖有上下波動，但無逐漸升高趨勢，而高脂飲食組TC、TG和LDL-C均呈逐漸升高，DOX治療組在第7周后升高趨勢變平緩。與正常飲食組相比，高脂飲食組和DOX治療組在第4～13周時，兔血清TC、TG、LDL-C水平顯著升高(P ＜0.01)。DOX治療組兔血清TC、TG、LDL-C水平與高脂飲食組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。與給藥之前(第4周末)相比，正常飲食組家兔在第7～13周血清TG、LDL-C顯著降低(P＜0.05或＜0.01)，高脂飲食組在第10～13周時，兔血清TC水平顯著升高(P＜0.01)，而DOX治療組血清TC水平未進(jìn)一步升高;高脂飲食組在第7～13周、DOX治療組在第10周時兔血清LDL-C水平顯著升高(P＜0.05和＜0.01)但是，DOX治療組在第13周時兔血清LDL-C水平的上升程度無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。見表1。

表1 多沙唑嗪對兔血脂的影響mmol/L，±s

表1 多沙唑嗪對兔血脂的影響mmol/L，±s

注：與正常飲食組比較，*P ＜0.01;與第4周比較，#P ＜0.05，△P ＜0.01

組別 0周 第4周 第7周 第10周 第13周正常飲食組(n=9)TC 1.41±0.27 1.53±0.38 1.44±0.66 0.98±0.60 1.13±0.47 TG 1.86±0.81 1.25±0.29 0.78±0.51# 0.55±0.28△ 0.75±0.32△LDL-C 0.52±0.21 0.74±0.34 0.23±0.16△ 0.24±0.12△ 0.23±0.14△高脂飲食組(n=6)TC 1.73±0.57 28.63±7.65* 35.26±7.88* 41.16±4.11＊△ 40.83±3.90＊△TG 1.76±0.81 3.87±2.49* 3.87±1.08* 4.67±2.97* 5.71±2.50*LDL-C 0.74±0.38 16.21±9.59* 24.64±8.55*# 25.39±4.19*# 28.46±3.81＊△DOX治療組(n=9)TC 1.24±0.45 29.36±7.94* 35.58±11.58* 38.41±6.84* 37.59±6.09*TG 1.87±0.56 4.10±2.43* 3.60±2.06* 3.95±1.42* 4.88±1.91*LDL-C 0.67±0.29 17.66±8.84* 18.45±8.21* 26.93±6.38*# 25.50±6.70*

3 討論

α1受體廣泛分布于人體多種組織內(nèi)，起著調(diào)節(jié)血壓、胰島素分泌以及脂類代謝的作用。DOX是一種長效、高選擇性α1受體阻斷劑，臨床常使用其消旋體(racemic-doxazosin，rac-DOX)。在自主神經(jīng)系統(tǒng)中，它抑制去甲腎上腺素與腎上腺素能受體結(jié)合，導(dǎo)致平滑肌細(xì)胞血管緊張素釋放減少，降低外周血管阻力，從而達(dá)到有效的降壓目的［2］，它還可以降低膀胱頸平滑肌的張力，使前列腺擴(kuò)張，從而緩解尿路梗阻癥狀［3］。DOX可作為二線或三線抗高血壓藥物，同時也是治療良性前列腺增生的一線用藥［4］。有研究發(fā)現(xiàn)用于降血壓治療時它甚至能夠逆轉(zhuǎn)其他降血壓藥物如利尿劑、β受體阻斷劑等對血脂代謝的不利影響［5］。BPH是老年男性常見疾病，發(fā)病率隨年齡而迅速增長，同時老年患者常常合并有脂質(zhì)代謝異常。因此對于BPH合并脂代謝異常的患者，應(yīng)考慮到DOX改善BPH患者的排尿癥狀和尿流率及降低血脂的雙重作用。

20世紀(jì)80年代首次有研究表明抗高血壓藥物多沙唑嗪具有調(diào)節(jié)脂質(zhì)和脂蛋白水平的作用，它可使血漿TC、LDL-C、TG濃度降低，LDL-C、HDL-C/TC升高［6-8］。有學(xué)者探索了 DOX改善血脂水平的可能作用機(jī)制：(1)DOX可增加肝臟LDL受體活性［9］，使肝臟攝取、分解LDL增加。(2)減少細(xì)胞內(nèi)TC的合成［10］。(3)增加脂蛋白脂酶活性和 VLDL分解［11］。(4)增加磷脂酰膽堿-膽固醇脂肪酰轉(zhuǎn)移酶活性，有助于提高HDL-ch的濃度和HDL轉(zhuǎn)運(yùn)肝外組織TC的能力。(5)DOX通過抑制激活因子2α(AP2α)，從而促進(jìn)ATP結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)子 A1(ABCA1)的表達(dá)和 HDL的生物合成［12］。(6)可有效減少直徑小于25.5 mm的低密度脂蛋白顆粒。

本實驗中，在相同的高膽固醇飲食條件下，對形成高脂血癥兔模型進(jìn)行9周的DOX治療，結(jié)果：與高脂飲食對照組相比，DOX連續(xù)腹腔注射給藥3周、6周和9周對高血脂兔的血清TC、TG、HDL-C和LDL-C水平無顯著影響。但是，當(dāng)以給藥前的高血脂參數(shù)作為對照組時，高脂飲食組兔隨高脂飼養(yǎng)的時間延長，血清TC和LDL-C水平進(jìn)一步顯著升高;而DOX治療組兔的血清LDL-C水平未顯著升高。研究結(jié)果提示，DOX對高血脂兔血清TC和LDL-C紊亂具有輕度的改善作用。同時實驗中，我們還發(fā)現(xiàn)正常飲食組家兔在3個月的飼養(yǎng)過程血清TG和LDL-C水平隨著飼養(yǎng)時間延長出現(xiàn)輕度但顯著的降低的現(xiàn)象，我們尚未見相關(guān)報道，其生理學(xué)意義有待探討。

1 楊學(xué)敏，趙艷，任雪嬌.不同劑型多沙唑嗪在降壓治療中的應(yīng)用.臨床薈萃，2010，25：638-641.

2 Ohta Y，Tsuchihashi T，Onaka U，et al.Usefulness of the alpha1-blocker doxazosin as a third-line antihypertensive drug.Hypertens Res，2007，30：301-306.

3 Alberti C.Apoptosis induction by quinazoline-derived alpha1-blockers in prostate cancer cells：biomolecular implications and clinical relevance.Eur Rev Med Pharmacol Sci，2007，11：59-64.

4 Steers WD，Kirby RS.Clinical ease of using doxazosin inBPH patients with and without hypertention.Prostate Cancer Prostatic Dis，2005，8：152-157.

5 王駿，王鳴和.α1阻滯劑和高血壓的治療.世界臨床藥物，2003，2：280-285.

6 Rabkin SW，Huff MW，Newman C，et al.Lipids and lipoproteins during antihypertensive drug therapy.Comparison of doxazosin and atenolol in a randomized，double-blind trial：the Alpha Beta Canada Study.Hypertension，1994，24：241-248.

7 Grimm RH Jr，F(xiàn)lack JM，Grandits GA，et al.Long-term effects on plasma lipids of diet and drugs to treat hypertension.Treatment of Mild Hypertension Study(TOMHS)Research Group.JAMA，1996，275：1549-1556.

8 Leren TP.Doxazosin increases low-density lipoprotein receptor activity.Acta Pharmacol Toxicol，1985，56：269-272.

9 Jansen H，Lammers R，Baggen MG，et al.Inhibition of hepatic cholesterol synthesis by the alpha 1-adrenoceptor blocker doxazosin in the hypercholesterolemic golden hamster.Life Sci，1989，44：1013-1017.

10 Pool JL.Effects of doxazosin on serum lipids：a review of the clinical data and molecular basis for altered lipid metabolism.Am Heart J，1991，121：251-259.

11 Remaley AT.Old drug，new tricks the unexpected effect of doxazosin on high-density lipoprotein.Circ Res，2007，101：116-118.

12 Hirano T，Yoshino G，Kashiwazaki K，et al.Doxazosin reduces prevalence of small dense low density lipoprotein and remnant-like particle cholesterol levels in nondiabetic and diabetic hypertensive patient.Am J Hypertens，2001，14：908-913.