非小細胞肺癌抗-Survivin抗體陽性與陰性患者術后生存期比較的臨床研究

鄒亞峰 劉桂舫 王國臣 曹俊華 劉桂華

Survivin作為凋亡抑制蛋白(inhibitor of apoptosis proteins，IAP)家族的重要成員，在腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用。Survivin幾乎表達于所有的惡性腫瘤，但在人體正常終末分化的組織細胞中不表達或低表達。腫瘤自身抗體產生的機制雖然還不明確，但同腫瘤相關抗原一樣，其與腫瘤的發(fā)生發(fā)展存在密切的聯(lián)系。據研究顯示在多種癌癥血清中可以檢測到Survivin自身抗體的存在，如頭頸癌、卵巢癌以及消化系統(tǒng)腫瘤胃癌、結腸直腸癌、肝癌等［1-4］。在肺癌患者血清中同樣可以檢測到Survivin自身抗體［3，5］，本實驗通過用 ELISA法對非小細胞肺癌患者手術前血清中抗-Survivin抗體的測定，觀察非小細胞肺癌抗-Survivin抗體陽性與陰性患者術后生存期差異。

1 材料與方法

1.1 實驗材料 選擇河北聯(lián)合大學附屬醫(yī)院胸外科和河北省遷安市人民醫(yī)院胸外科2005年1月至2006年3月260例非小細胞肺癌患者血清標本，經ELISA法檢測后證實抗-Survivin抗體陽性患者134例，陰性患者126例，其中抗-Survivin抗體陽性患者69例手術治療(陽性組)，陰性患者62例手術治療(陰性組)。術前1周采血離心后的血清標本，經ELISA法以高于對照組均值2個標準差作為確定非小細胞肺癌抗存活素抗體陽性的診斷標準：1.3946+2×0.0846=1.56 U/ml。抗存活素抗體陽性的69例及抗-Survivin抗體陰性62例手術患者術后隨訪，獲得69例抗-Survivin抗體陽性患者及62例抗-Survivin抗體陰性患者的術后生存資料，隨訪率為100%。術后生存期從手術之日開始計算，以d為單位，直至術后死亡為止。臨床行為狀態(tài)評分依據美國腫瘤東方合作標準(ECOG)。

1.2 實驗試劑 人抗存活素抗體/生存蛋白(SurvAb)酶聯(lián)免疫分析試劑盒(上海麥莎生物科技有限公司，產品編號：E1814h)檢測范圍1.56～100 U/ml。

1.3 檢測方法 血清抗存活素抗體濃度測定采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)，嚴格按說明書實驗步驟操作，450 nm光波檢測吸光度。

1.4 計算以標準物的濃度為橫坐標(對數坐標)，OD值為縱坐標(普通坐標)，在半對數坐標紙上繪出標準曲線根據樣品的OD值，由標準曲線查出相應的濃度，再乘以稀釋倍數;或用標準的濃度與OD值計算出標準曲線的回歸方程，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品的濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。

1.5 統(tǒng)計學分析應用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件，計量資料以±s表示，采用t檢驗，計數資料采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 術前抗-Survivin抗體測量結果 69例抗-Survivin抗體陽性非小細胞肺癌術前抗-Survivin抗體水平(2.1009±0.7342)U/ml，鱗癌(2.4352 ± 0.5045)U/ml，腺癌(2.3792 ±0.5610)U/ml，抗-Survivin抗體陰性患者62例，抗-Survivin抗體水平(1.3946 ±0.0646)U/ml，鱗癌(1.3656 ±0.0568)U/ml，腺癌(1.434 ±0.0873)U/ml。見表1。

表1 肺癌手術患者術前抗-survivin抗體測量結果U/ml，±s

表1 肺癌手術患者術前抗-survivin抗體測量結果U/ml，±s

病理類型 陽性 抗survivin 陰性 抗survivin u值 P值鱗癌69 2.1009±0.7342 62 1.3946±0.0646 33 2.4352±0.5045 32 1.3656±0.0568腺癌 36 2.3792±0.5610 30 1.4340±0.0873 7.96 ＜0.05鱗癌+腺癌

2.2 抗-Survivin抗體陽性與陰性比較 以抗-Survivin抗體陽性和陰性為2組，統(tǒng)計分析2組患者與各臨床特點的相關性，發(fā)現抗-Survivin抗體陽性與陰性組之間比較顯，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。陽性組與陰性組與腫瘤分化程度相關，陽性組中低分化多于高分化，陰性組高分化多于中低分化，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。陽性組與陰性組比較與淋巴結轉移無相關。抗-Survivin抗體陽性組生存期短于抗-Survivin抗體陰性組，差異有有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。血清抗-Survivin抗體二水平組與其他臨床特點差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。見表2。

表2 NSCLC患者各臨床特點與血清抗-Survivin抗體二水平組的比較

3 討論

Survivin蛋白的組織分布特征有明顯的細胞選擇性，它表達于胚胎和發(fā)育的胎兒組織，不見于終末分化的正常成人組織(胸腺和生殖腺除外)，但在體內外的分化組織、人類大多數腫瘤組織內有Survivin蛋白的表達。該蛋白可被自身固有T細胞所識別，具有抗原性，血清中其抗體稱為抗-Survivin抗體。癌細胞的存活素過表達可導致抗存活素抗體和細胞毒性T-淋巴細胞抗癌反應［6，7］。2004 年 Joseph等［8］報道對頭頸癌獲得癌癥治療前連續(xù)294人的血液進行了抗存活素抗體的檢測，標準治療是對早期患者行根治性手術，研究結果顯示抗存活素和腫瘤侵襲性相關，表明血清自身抗體可以代表細胞的狀態(tài)。這些結果提示檢測循環(huán)血液中的抗存活素抗體可以作為檢測確定頭頸癌狀態(tài)的一種有用的非侵襲性標志物。

我們的研究結果顯示：抗-Survivin抗體陽性組與陰性組之間比較，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。陽性組與陰性組與腫瘤分化程度相關，陽性組中低分化多于高分化，陰性組高分化多于中低分化，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。陽性組與陰性組比較與淋巴結轉移無相關，說明即使是同一種腫瘤，且組織中均有Survivin蛋白的聚集，有的病例表達抗存活素抗體，有的病例不表達，提示抗存活素抗體的表達可能和宿主的免疫狀態(tài)有關。Atsuhito等［9］在其研究中亦報道抗存活素的抗體反應并不是在那些表達存活素癌癥患者的所有患者中表現的。抗-Survivin抗體陽性組生存期短于抗-Survivin抗體陰性組，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。血清抗-Survivin抗體二水平組與其他臨床特點差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。存活素表達和侵襲性疾病的相關性已在很多癌癥中被發(fā)現［10-12］，在此項研究中，抗存活素抗體和腫瘤侵襲性相關，抗-Survivin抗體陰性組的生存期明顯長于陽性組，因此術前檢測NSCLC患者血清中抗-Survivin抗體對判斷患者預后有一定的指導作用。

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