Zn-DDC羥丙基β環糊精包合物的制備與鑒定

劉俠 王思玲

[摘要] 目的 制備Zn-DDC羥丙基β環糊精包合物并進行鑒定。方法 分別以研磨法、攪拌法、超聲波法制備，用熱分析法、粉末X-射線衍射法、紅外光譜法鑒定。結果 鑒定顯示Zn-DDC羥丙基β環糊精包合物已形成，包合物的穩定常數為3 451.57 L/mol，且以溶液攪拌法制備更合適。 結論 羥丙基β環糊精可以顯著增加Zn-DDC的溶解度。

[關鍵詞] Zn-DDC；羥丙基β環糊精；包合物；鑒定

[中圖分類號] R943.4；R927.2???[文獻標識碼] A???[文章編號] 2095-0616（2012）15-102-02

Preparation and characterization of zinc diethyldithiocarbmate HPβCD inclusion complexes

LIU?Xia1??WANG?Siling2

1.Department of Pharmacy, Hainan Medical College, Hainan Provincial Key Laboratory of R&D; of Tropical Herbs, Haikou 571101, China; 2.School of Pharmacy, Shenyang Pharmaceutical University, Shenyang 110016, China

[Abstract] Objective To prepare and characterize zinc diethyldithiocarbmate HPβCD inclusion complexes. Methods Zn-DDC-HPβCD inclusion complexes was prepared by milling method, agitating method and ultrasound method separately and identified by DSC, X-ray and IR method respectively. Results The inclusion complexes were abtained. the stable constant of Zn-DDC-HPβCD was 3 451.57 L/mol. Conclusion The solubility of Zn-DDC was increased greatly by HPβCD.

[Key words] Zn-DDC; HPβCD ; Inclusion complexes; Identify

據報道，二乙氨荒酸（DDC）為抗白內障藥物雙硫倫（DSF）的代謝產物，能與鋅形成金屬螯合物Zn-DDC，Zn-DDC的抗氧化作用更強[1]。經筆者研究發現：Zn-DDC在正辛醇/水中的分配系數為（94.9±0.7），有利于角膜透過，但Zn-DDC在水中溶解度僅為4.79 μg/mL，需要采取適宜的方法增加其水中溶解度以達到滴眼液所需要的劑量要求。據文獻報道在制劑中加入羥丙基β環糊精可起到多種作用：增加難溶性藥物的溶解度、提高生物利用度、增加藥物的穩定性、降低藥物刺激性等[2-3]。筆者以研磨法、攪拌法和超聲波法制備Zn-DDC羥丙基β環糊精的包合物，分別采用DSC、粉末X-Ray與IR進行驗證。

1?資料與方法

1.1?儀器與試劑

JY92-Ⅱ超聲波細胞粉碎機（寧波新芝科器研究所），LG-3型多用冰凍干燥機（寧波生化儀器廠），791磁力攪拌器（上海南匯電訊器材廠），D/max-γA型X-ray衍射儀（日本理學Rigaru株氏會社），DSC60差動熱分析儀（日本 Shimadzu株氏會社），IFS-55紅外分光光度計（德國Bruker公司），Zn-DDC（自制），羥丙基β環糊精（日本和光工業株氏會社），其他試劑均為分析純。

1.2?Zn-DDC羥丙基β環糊精包合物的制備方法

1.2.1?研磨法?按重量比（4︰1、8︰1、12︰1、16︰1、20︰1）稱取羥丙基β環糊精與Zn-DDC，在研缽中加少量氯

仿溶解Zn-DDC，將羥丙基β環糊精用適量的純化水溶解后加到研缽中，充分研磨后低溫干燥，將所得物用適量純化水溶解，過濾，濾液在-25℃條件下冷凍干燥，HPLC法測定包合物中Zn-DDC含量。結果表明羥丙基β環糊精與Zn-DDC的最佳投料量為主客體重量比是16︰1，包合物中Zn-DDC的含量為2.24%（w/w）。

1.2.2?超聲波法?將定量過量Zn-DDC細粉加至含10% 羥丙基β環糊精的純化水溶液中，超聲（功率400 W）5 min，過濾，濾液在-25℃條件下冷凍干燥，測定包合物中Zn-DDC含量為0.27%（w/w）。

1.2.3?溶液攪拌法?將定量過量的Zn-DDC細粉加至含10% 羥丙基β環糊精的純化水溶液內，室溫攪拌24 h后濾過，濾液于-25℃凍干，測得包合物中Zn-DDC含量為2.10%（w/w）。

1.3?Zn-DDC羥丙基β環糊精包合物的鑒定方法

取Zn-DDC、羥丙基β環糊精、二者包合物及物理混合物以下列方法鑒定。

1.3.1?DSC法?測試條件：坩堝為鋁制；參比物為Al2O3；氣氛為氮氣；升溫速率為5℃/min。

1.3.2?粉末X線法?測試條件：靶：Cu（50 kV，100 mV）；波長：1.540 56；掃描速度：4°/min；掃描范圍：3°～50°。

1.3.3?IR法?測試條件：分別將2 mg樣品與200 mg KBr制片，掃描范圍為450～4 000/cm。

2?結果

2.1?DSC法的鑒定結果

在DSC圖譜中，Zn-DDC與羥丙基β環糊精的物理混合物分別于279.94℃和181.28℃呈吸熱峰，為二者疊加，而包合物中Zn-DDC的吸熱峰消失，只在281.61℃開始出現吸熱峰，與羥丙基β環糊精的圖譜接近一致，表明Zn-DDC被羥丙基β環糊精包合。見圖1。

2.2?粉末X線法的鑒定結果

Zn-DDC與羥丙基β環糊精物理混合物衍射圖譜為二者疊加，包合物的圖譜與羥丙基β環糊精的相似，說明Zn-DDC被羥丙基β環糊精包合。見圖2。

2.3?IR法的鑒定結果

在IR圖譜中，Zn-DDC與羥丙基β環糊精物理混合物在約2 973/cm與2 931/cm處分別呈現Zn-DDC與羥丙基-β-環糊精的特征峰，為二者疊加，而包合物的圖譜只呈現出羥丙基-β-環糊精的特征，說明Zn-DDC被羥丙基β環糊精包合。見圖3。

2.4?測定Zn-DDC羥丙基β環糊包合物常數

將羥丙基β環糊精配制成濃度為1、2、5、10、15、20、40、80、160 mmol/L的純化水溶液，將過量的Zn-DDC加入其中，于（25±1）℃下平衡24 h，取上清液過濾，取續濾液測定溶液中Zn-DDC含量，以Zn-DDC溶解度對羥丙基β環糊精濃度作圖，得相溶解度圖。見圖4。

該相溶解度圖符合HiguchiA型[4]，相圖起始部分呈直線，方程為Y=0.029 8X+0.008 9，則穩定常數Kst=斜率/截距（1-斜率）=3 451.57 L/mol。

3?討論

本研究在采用超聲波法制備的包合物中測得的Zn-DDC含量低，HPLC測定時檢測到二硫化碳峰，說明超聲會導致Zn-DDC被破壞；所采用的研磨法為手工操作，結果重現性很差；而溶液攪拌法重現性好，所制得的包合物中Zn-DDC含量為2.10%，最終確定以溶液攪拌法制備Zn-DDC-羥丙基β環糊精包合物。

據文獻報道[5-6]，人眼對18%以下羥丙基-β-環糊精很好耐受，降至12.5%時對人眼已無刺激。根據相溶解度圖計算，濃度為10%羥丙基-β-環糊精所增溶的Zn-DDC濃度（10%羥丙基β環糊精可以使Zn-DDC在水中的溶解度增大470倍）已經滿足臨床需要，所以在用超聲波法及溶液攪拌法中均選用10%羥丙基-β-環糊精。

藥物與環糊精之間相互作用的強弱可由包合物穩定常數的大小反映。對難溶性藥物來說，當環糊精包合物穩定常數介于200 ～5 000 L/mol之間時，有利于藥物生物利用度的提高 [5]，Zn-DDC-羥丙基β環糊精包合物的穩定常數為3 451.57 L/mol，將會有利于增加Zn-DDC在眼部的生物利用度。

[參考文獻]

[1] Masukawa T，Kunio Nakanishi.Protection by disulfiram and diethyldithiocarbamate against hyposia-induced lethality in mice[J].Japan J Pharmacol，1993，63（3）：279.

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[3] 李春燕.淺論β-環糊精在藥物制劑中的應用[J].中國醫藥指南，2012，10（9）：53.

[4] Higuchi T，Connors K A.Phase-solubbility techniques[J].Adv Anal Instr，1996， 4：117.

[5] Olaf Reer，Thomas K Bock，Bernd W Muller.In vitro corneal permeability of diclofenac sodium in formulation containing cyclodextrins compared to the commercial product voltaren ophtha[J].J Pharm Sci，1994，83（9）：1345.

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（收稿日期：2012-06-08）