高效液相色譜法測定藥用輔料麥芽糖的含量探討

中國食品藥品檢定研究院（100050）王穎 欒琳

麥芽糖（maltose）是一種二糖，廣泛用于食品和藥物制劑中，在注射用產(chǎn)品中，麥芽糖可用作糖源，尤其適用于糖尿病患者[1]。本品在制劑中可作為等滲調(diào)節(jié)劑，粘合劑、保護劑（生物制品）、穩(wěn)定劑（生物制品）、賦形劑等[2]。日本藥局方ⅩⅣ版及USP30均已收載該品種，并采用強酸性陽離子交換柱測定。但這種填料的色譜柱價格昂貴、保存難度較大、柱效易降低，檢測器溫度過高，研究成本較高。本研究嘗試采用氨基鍵合硅膠色譜柱，建立了經(jīng)濟可行、快速、靈敏且專屬性較強的HPLC測定方法。

1 儀器與試藥

Waters 2695液相色譜儀，Waters 2414示差檢測器。

麥芽糖樣品：①北京索寶來科技有限公司，批號為D8110；②定康藥業(yè)有限公司，批號為8A-09。

麥芽糖對照品為USP對照品，含量為94.7%；麥芽三糖對照品和D-無水葡萄糖對照品為中檢院對照品。

附圖 系統(tǒng)適用性試驗的HPLC色譜圖

2 方法與結(jié)果

2.1 溶液的制備 對照品溶液：精密稱取麥芽糖對照品適量，加水溶解，稀釋制得10mg/ml的對照品溶液。

供試品溶液：精密稱取本品適量，加水溶解，稀釋制得10mg/ml的供試品溶液。

2.2 色譜條件 色譜柱：Alltech Amino色譜柱（4.6×250mm，5μm）；流動相：乙腈—水（75:25）；示差折光檢測器；流速：1ml/min；進樣量：20μl；柱溫：35℃；檢測器溫度：30℃。

2.3 系統(tǒng)適用性試驗 與麥芽糖結(jié)構(gòu)相似的葡萄糖、麥芽三糖結(jié)構(gòu)式

取麥芽糖、麥芽三糖和D-無水葡萄糖對照品適量，加水溶解，制成混合溶液，搖勻。取上述混合溶液50μl進樣，記錄色譜圖，見附圖。結(jié)果表明，上述3種成分的保留時間分別為7.0、9.8和14.4min，分離度均大于1.5。

2.4 線性范圍 精密稱取麥芽糖對照品2g，置于100ml量瓶中，加水溶解，搖勻。分別精密量取上述溶液1、2、4、6和8ml，各置10ml量瓶中，加水溶解，搖勻。以峰面積A對濃度c作線性回歸，測得回歸方程為y=18450x-25980，r=0.999。濃度為2～16mg/ml時，線性關系良好。

2.5 精密度 吸取對照品溶液20ul注入液相色譜儀，連續(xù)進樣6次，計算RSD為0.19%，精密度良好。

2.6 回收率試驗 分別精密稱取麥芽糖對照品適量至100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，制成濃度約為1.0mg/ml的對照品母液，分別取0.3、0.5、0.7ml，各3份，各置100ml量瓶中，分別加入已知含量的同一批號濃度為0.1mg/ml的供試品溶液1ml，加水稀釋至刻度。進樣測定，計算得平均回收率為100.5%，RSD為1.8%(n=9)。

2.7 樣品測定 精密量取供試品溶液和對照品溶液，分別進樣測定，按外標法以峰面積計算含量，測得2批樣品中麥芽糖含量分別為99.3%、101.2%。

3 討論

本文采用了示差折光檢測器測定麥芽糖藥用輔料的含量，與USP、JP及部頒標準等相比,該法具有出峰時間快、分離效果較好、結(jié)果準確、重現(xiàn)性好的特點，可作為麥芽糖質(zhì)量控制的有效方法。本研究采用了常用的氨基鍵合硅膠色譜柱，替代硅膠型強酸性陽離子交換柱，使成本降低易操作。同時該法有效分離了單糖、二糖和三糖多種糖類化合物，可以作為多種糖類分離的檢測方法[3～5]。