復方板藍根噴霧劑的制備與質量控制研究

廣東嶺南職業技術學院（510663）曹智啟 羅憲堂 楊鳳瓊 李巖

復方板藍根噴霧劑處方由板藍根和大青葉組成，具有清熱解毒、涼血利咽之功能，用于治療溫毒發斑、舌絳紫暗、喉痹、爛喉丹痧、癰腫等癥[1]。目前臨床上廣泛使用的劑型是板藍根沖劑和糖漿劑。但由于含糖量高，服用量大，糖尿病和肥胖病癥者不宜服用。為此，我們在原糖漿劑的基礎上，改進制劑工藝而制成復方板藍根噴霧劑(以下稱本品)，解決了上述問題，而且有使用方便的特點。采用高效液相色譜(HPLC)法對靛玉紅的含量進行測定，結果滿意，并具有簡便、快捷、分離度高、重現性好等優點，可用于該制劑的質量控制。

1 制備工藝

1.1 處方 板藍根500g，大青葉500g。

1.2 工藝 稱取處方量的板藍根及大青葉，粉碎，混合，用6倍量的65%乙醇滲漉法提取，漉液回收乙醇后，加水放置，濾過，制成1000ml，即得。

2 質量控制

2.1 性狀 本品為噴霧劑，為棕褐色溶液，氣微，味微苦。

2.2 鑒別

2.2.1 取本品溶液1.0ml，置于濾紙上，晾干，置于紫外燈(365nm)下觀察，顯藍色熒光。

2.2.2 取本品溶液1.0ml，作為供試品溶液。另取靛玉紅對照品，分別加乙酸乙酯制成0.2mg/ml的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法制備硅膠G薄層板，取供試品溶液5ul，對照品溶液各5ul，分別點于硅膠G薄層板上，以石油醚(60～90)一醋酸乙酯一二乙胺(7.5：5：1)展開，取出晾干。供試品色譜中，在與對照品色譜相應位置上顯相同顏色的斑點。

2.3 檢查應符合噴霧劑[2]項下有關的各項規定。

2.4 含量控制

2.4.1 儀器與試藥 LC-100型高效液相色譜儀(上海伍豐公司)，包括LC-100輸液泵、7725i手動進樣器、LC-100紫外檢測器、LC-100色譜工作站；AS20500B型超聲波清洗器(功率500W，天津奧特賽恩斯儀器有限公司)。靛玉紅對照品(供含量測定用，中國藥品生物制品檢定所，批號為0717—200404)；復方板藍根噴霧劑(廣東嶺南職業技術學院藥物制劑室自制)；其它試劑均為AR級。

2.4.2 方法與結果

2.4.2.1 色譜條件 色譜柱：DiamonsiTM,C18(250mm×4.6mm，5um)；流動相：甲醇一0.1%乙酸銨一乙酸(80∶20∶1)；流速：1.0ml/min；檢測波長：286nm；理論塔板數按靛玉紅峰計算應不低于5000，在此條件下靛玉紅能達到理想的分離效果，分離度>1.5。

2.4.2.2 溶液的制備

2.4.2.2.1 對照品溶液的制備 精密稱取干燥至恒重的靛玉紅對照品約0.5mg，分別置50ml的量瓶中，用甲醇溶解并定容，即得。

2.4.2.2.2 供試品溶液的制備 移取復方板藍根噴霧劑溶液約1ml，置10ml量瓶中，加甲醇約5ml，超聲處理20min，取出，放冷，加甲醇至刻度，用0.45um微孔濾膜過濾，即得。

2.4.2.2.3 陰性對照溶液 移取按處方比例及生產工藝制備的不含板藍根和大青葉原藥材的陰性樣品，按“2.4.2.2.2”項下方法制備，即得。

2.4.2.3 空白試驗 分別精密移取靛玉紅對照品溶液、供試品溶液、陰性對照溶液各20ul，注入色譜儀。結果供試品在靛玉紅對照品相應位置處有相似的吸收峰，而陰性對照在此位置處無吸收峰，說明其他成分不干擾靛玉紅的測定。

2.4.2.4 標準曲線的繪制 精密移取靛玉紅對照品溶液0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2ml分別用甲醇稀釋，定容至10ml容量瓶，注入HPLC色譜儀，測定峰面積，以峰面積積分值 (x)為橫坐標，進樣濃度 (y)為縱坐標，繪制標準曲線，計算，得靛玉紅的回歸方程為y=7.39903e-006x+0.000744645 (r2=0.999945，n=7)。結果表明，靛玉紅的進樣量分別在0.0812～0.9745ug/ml范圍內與峰面積積分值呈良好的線性關系。

2.4.2.5 精密度試驗 每次進樣上述對照品溶液20ul，重復進樣6次，測定。結果靛玉紅峰面積的RSD=0.58%，表明儀器的精密度良好。

2.4.2.6 重現性試驗 移取復方板藍根噴霧劑樣品（批號為20110925）5ml，按“2.4.2.2.2”項下方法制備供試品溶液，每次進樣20ul，共6次。結果靛玉紅的平均含量為1.643ug/ml，RSD= 0.51%，表明試驗方法的重現性良好。

2.4.2.7 穩定性試驗 精密移取新配制的供試品溶液，按上述色譜條件分別于制備后2、4、6、8、10h內各測定1次。結果靛玉紅含量的RSD=0.55%，表明在提取后10h內供試品溶液穩定。

2.4.2.8 加樣回收率試驗 精密移取已知含量的復方板藍根噴霧劑樣品（批號為20110925）5ml共6份，精密加入已知濃度的靛玉紅對照品溶液，按樣品測定方法測定。結果詳見附表1。

2.4.2.9 樣品含量測定 按上述色譜條件和測定方法測定樣品含量。結果詳見附表2。

附表1 靛玉紅的加樣回收率試驗結果（n=6)

附表2 復方板藍根噴霧劑中靛玉紅的含量測定結果(n=3)

3 小結與討論

3.1 本品的制備工藝合理，采用醇水兩步提取，盡可能提取了其有效成分，且質量可控制，可代替沖劑和糖漿劑用于臨床。

3.2 在展開劑中加入少量二乙胺使其成堿性，可避免靛玉紅產生拖尾現象。

3.3 在選擇系統適應性條件時，流動相曾選擇甲醇-0.1%醋酸(65：35)，結果靛藍與靛玉紅分離度不好，雜質峰干擾太多，而且出峰時間長。選用文中流動相分離度大于1.5，分離效果較好。

3.4 本方法經穩定性試驗證明，結果在2h內穩定。同時進行重現性試驗和加樣回收率試驗，結果滿意，可作為本品質量控制的方法。