肝炎患者一氧化氮異常及其臨床意義

陳仁洪 張經(jīng)良

肝炎患者一氧化氮異常及其臨床意義

陳仁洪 張經(jīng)良

目的探討急慢性肝炎患者一氧化氮異常及抗氧化能力改變的臨床價(jià)值。方法收集31例急性肝炎(AH)、28例慢性肝炎(CH)患者的血清，分別檢測(cè)其一氧化氮(NO)水平及抗氧化能力(TAO)。結(jié)果患者血清NO在AH、CH中的異常表達(dá)與對(duì)照組有顯著差異。AH組和CH組的TAO平均水平明顯高于對(duì)照組。結(jié)論急慢性肝炎患者血清NO的濃度明顯高于對(duì)照組，可能系NO對(duì)肝細(xì)胞其保護(hù)作用所致;慢性肝炎的TAO明顯低于急性肝炎，可能是因?yàn)槁愿窝谆颊吒渭?xì)胞能量匱乏和大量自由基產(chǎn)生而死亡的緣故。

肝炎;一氧化氮;異常

NO促進(jìn)或加重內(nèi)毒素及細(xì)胞因子介導(dǎo)的肝細(xì)胞損傷，肝組織中NO含量增加可改變微循環(huán)，可能對(duì)肝細(xì)胞具有保護(hù)作用。因此，NO的改變與肝損傷的關(guān)系密切，而且備受臨床關(guān)注。本文分析急慢性肝炎患者總抗氧化能力(TAO)和NO水平，以探討其在肝病中的臨床價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料收集2002年1月至2003年6月本院傳染科住院患者血清59例。其中慢性肝炎28例(其中男23例、女5例)，平均年齡(50±10)歲;急性肝炎31例(其中男25例、女6例)，平均年齡(46±12)歲。肝炎患者的診斷按2000年(西安)全國(guó)第十屆全國(guó)傳染病及寄生蟲(chóng)病學(xué)分會(huì)、肝病分會(huì)聯(lián)合修訂的標(biāo)準(zhǔn)［1］，排除其他疾病，均為單純性急慢性肝病。所有患者于入院第二天清晨采集空腹靜脈血，于1 h內(nèi)分離血清于-80℃保存?zhèn)溆?。另宏聲集團(tuán)健康體檢人群50份血清(ALT＜30U/L，排除脂肪肝及各型肝炎病毒肝炎)NO和TAO檢測(cè)做對(duì)照組。各組間性別和年齡分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.2 血清NO和TAO定量分析方法血清NO采用硝酸還原酶法檢測(cè)。血清TAO測(cè)定采用化學(xué)比色法，用分光光度計(jì)在520nm波長(zhǎng)處比色測(cè)其吸光度，根據(jù)在37℃時(shí)每ml血清每分鐘使反應(yīng)體系的吸光度增加的能力，求出肝病患者的抗氧化能力單位(U/ml)。所有實(shí)驗(yàn)室檢查均由我院檢驗(yàn)科檢測(cè)。

2 結(jié)果

急慢性肝炎組織患者血清NO的平均濃度均非常顯著地高于正常對(duì)照組(P＜0.01);急慢性肝炎患者之間無(wú)顯著差異。急性肝炎患者TAO顯著地高于正常對(duì)照組(P＜0.01);慢性肝炎患者的TAO明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);急性肝炎患者的TAO高于慢性肝炎患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見(jiàn)表1。

表1 肝炎患者NO、TAO濃度(±s)變化

表1 肝炎患者NO、TAO濃度(±s)變化

組別例數(shù)NO(μmol/ml)TAO(U/ml)急性肝炎5057.0±0.919.7±2.4 3189.0±36.931.2±2.2慢性肝炎2888.0±48.825.2±11.6正常對(duì)照

3 討論

肝細(xì)胞、枯否氏細(xì)胞、貯脂細(xì)胞等在細(xì)胞脂多糖、白細(xì)胞介導(dǎo)素-1、腫瘤壞死因子和干擾素等誘導(dǎo)下產(chǎn)生一氧化氮合酶(NOS)，NOS催化底物L(fēng)-精氨酸生成NO［2，3］。NO在調(diào)節(jié)肝細(xì)胞白蛋白合成中起重要作用，NO示一種內(nèi)源性凋亡抑制劑，NO可通過(guò)抑制caspase-3樣蛋白酶活化，從而防止GalN +TNF-α介導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄依賴的肝細(xì)胞凋亡［4］。在急性肝臟病變時(shí)，局部升高NO能擴(kuò)張小血管調(diào)節(jié)灌流，降低肝臟酶活性，抑制肝細(xì)胞的有氧代謝及低血流下的血小板聚集，與超氧化物結(jié)合形成無(wú)毒代謝產(chǎn)物NO3ˉ，從而避免氧自由基損害細(xì)胞，有助肝臟度過(guò)應(yīng)急期，對(duì)肝細(xì)胞起保護(hù)作用。AH組CH和組的血清NO平均水平顯著高于對(duì)照組，TAO在AH組和CH組也明顯高于對(duì)照組，可能是由于NO對(duì)肝臟的不同作用主要取決于NO的濃度和細(xì)胞來(lái)源，濃度在一定范圍內(nèi)以及來(lái)源于內(nèi)皮細(xì)胞者對(duì)組織器官和細(xì)胞具有保護(hù)作用的表現(xiàn)。

將枯否氏細(xì)胞或巨噬細(xì)胞與細(xì)胞共同培養(yǎng)，肝細(xì)胞合成白蛋白明顯增加;加入內(nèi)毒素(Lipopolysaccharide LPS)后白蛋白合成減少，培養(yǎng)基上清液中NO明顯增加，而NO釋放的過(guò)程與肝細(xì)胞合成減少相一致，用NO拮抗劑能使白蛋白合成增加［5］。慢性肝病患者多伴有腸源性內(nèi)毒素血癥(Intestinal endotoxemia IETM)［6］，內(nèi)毒素(LPS)可誘導(dǎo)細(xì)胞因子的分泌、釋放，刺激肝內(nèi)誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)的過(guò)渡表達(dá)，從而產(chǎn)生大量的NO。NO可影響肝細(xì)胞蛋白質(zhì)的合成和能量代謝，與慢性肝病低蛋白血癥、低凝血因子和其他肝功能障礙有密切關(guān)系，進(jìn)而加重肝細(xì)胞的損傷，使白蛋白合成減少。高濃度的NO通過(guò)與酶的活性中心-非血紅素硫鐵復(fù)合物結(jié)合，抑制多種與線粒體電荷傳遞系統(tǒng)及檸檬酸循環(huán)有關(guān)的酶，如檸檬酸合成酶、烏頭酸酶等，使肝細(xì)胞能量匱乏或大量自由基產(chǎn)生而死亡，可能是慢性肝病比急性肝炎的TAO低的原因。

［1］中華醫(yī)學(xué)會(huì)傳染病與寄生蟲(chóng)病學(xué)會(huì)、肝病分會(huì)聯(lián)合修訂.病毒性肝炎防治方案.中華傳染病雜志，2001，19(1):56-62．

［2］Abrams GA，Trauner M，Nathanson MH.Nitric oxide and liver disease.Gastroenterologist，1995，3:220-233．

［3］邢卉春，王守義．一氧化氮在肝臟損害中的作用．中華傳染病雜志，1998，16:61-63．

［4］向曉星，王國(guó)俊，蔡雄．爆發(fā)性肝細(xì)胞凋亡的阻斷治療研究．肝臟，2001:64-65．

［5］Hibbs JB，Taintor RR，Vavrin Z，et al.Nitric oxide:a cytotoxicactivated macrophage effector molecule，Biochem Biophy Res Commun，1998，157:37．

［6］Veglio F，Pinna G，et al.Plasma endothelin levels in cirrhosis subject.J Hepatol，1992，15:85-87．

252300山東省聊城市陽(yáng)谷縣疾病預(yù)防控制中心(陳仁洪);山東省淄博市第四人民醫(yī)院(張經(jīng)良)