MB病毒滅活新鮮冰凍血漿中部分有效成分的探討

盤國雄 謝中興 李淑英

MB病毒滅活新鮮冰凍血漿中部分有效成分的探討

盤國雄 謝中興 李淑英

目的探討經(jīng)過病毒滅活的新鮮冰凍血漿中部分有效成分的質(zhì)量變化。方法采集50袋新鮮血漿，分成A、B兩組，分別對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)，內(nèi)容包括PT，TT，APTT，F(xiàn)g，TP、ALB及凝血因子FⅧ、FⅤ。結(jié)果病毒滅活冰凍血漿中的TP、凝血因子FⅧ、FⅤ和Fg等的含量均有不同程度的降低。但大都在30%以內(nèi)，在可接受的范圍內(nèi)。結(jié)論采用MB光化學(xué)法病毒滅活血漿不影響臨床應(yīng)用，其利大于弊。

病毒滅活冰凍血漿;凝血因子;因子活性;血漿蛋白

新鮮冰凍血漿內(nèi)含有各種凝血因子及各種血漿蛋白，由于血漿及其制品的病毒檢測(cè)方法有一定的局限性及病毒“窗口期”的存在，新鮮冰凍血漿和全血一樣，具有傳播艾滋病、乙型肝炎等輸血傳播疾病的危險(xiǎn)［1］，因此輸血的危險(xiǎn)性依然存在。為使廣大患者能更安全有效地使用血漿，我?guī)堁緦?duì)血漿開展了亞甲藍(lán)(MB)光化學(xué)法病毒滅活項(xiàng)目。MB光化學(xué)法病毒滅活技術(shù)應(yīng)用于血漿病毒的滅活，其有效性和安全性已被證實(shí)，但MB光化學(xué)法病毒滅活的過程對(duì)新鮮血漿中的凝血因子及血漿蛋白等有效成分的質(zhì)量會(huì)產(chǎn)生怎樣的變化，仍有待確認(rèn)。為此我們通過實(shí)驗(yàn)檢測(cè)血漿中的部分有效成份的變化并作一分析探討。

1 材料與方法

1.1 樣本來源隨機(jī)抽取50份常規(guī)血液，按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程制備新鮮血漿。每人份一分為二，分兩組，A組為不滅活病毒新鮮血漿，立即進(jìn)行檢測(cè)。另一組為B組，進(jìn)行MB光化學(xué)法病毒滅活后的新鮮冰凍血漿從采集到制備完畢6 h內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。

1.2 材料一次性無菌試管，德國BE-1500自動(dòng)血凝分析儀，CL-800生化分析儀。嚴(yán)格按照儀器與試劑操作說明的要求進(jìn)行檢測(cè)。

1.3 資料①PT(凝血酶原時(shí)間)用于外源性凝血因子(Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ、Ⅰ)凝血功能的篩查。②APTT(活性部分凝血酶原時(shí)間)用于檢測(cè)內(nèi)源性凝血因子(Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ)凝血功能。③TT(凝血酶時(shí)間)，快速評(píng)定止血和血栓形成的有效方法。④Fg(纖維蛋白原)。檢測(cè)PT，TT，APTT，F(xiàn)g能間接反映血漿中的因子活性水平。

血漿蛋白的測(cè)定;①TP(總蛋白)。②ALB(白蛋白)

1.4 方法A組為新鮮冰凍血漿，不滅活直接進(jìn)行測(cè)定，B組為滅活冰凍血漿，先對(duì)其進(jìn)行MB(亞甲藍(lán))光化學(xué)病毒滅活后再測(cè)定。在血漿進(jìn)行病毒滅活后進(jìn)行熱封口時(shí)留樣檢驗(yàn)。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS 16.0作t檢驗(yàn)分析。

2 結(jié)果

2.1 兩種血漿實(shí)驗(yàn)測(cè)定結(jié)果(見表1)。

表1 兩種血漿各指標(biāo)均值的實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果

2.2 各項(xiàng)指標(biāo)的統(tǒng)計(jì)結(jié)果比較(見表2，3)。

表2 MB滅活血漿各項(xiàng)指標(biāo)與正常范圍比較的可信區(qū)間

表3 新鮮冰凍血漿與MB滅活新鮮冰凍血漿各項(xiàng)指標(biāo)結(jié)果的比較()

表3 新鮮冰凍血漿與MB滅活新鮮冰凍血漿各項(xiàng)指標(biāo)結(jié)果的比較()

比較指標(biāo)PTTTAPTTFgTPALBFⅤFⅧ對(duì)照組13.20±2.7913.40±2.6938.81±2.912.60±0.4070.02±5.9344.22±3.6298.40±10.30 108.20±7.05 MB組15.20±2.2416.60±1.9152.12±3.641.51±0.2363.60±5.8040.11±2.3968.90±4.3577.80±4.95 t值－12.76－10.60－22.1915.9428.8112.3319.0924.35 P值＜0.05＜0.05＜0.05＜0.05＜0.05＜0.05＜0.05＜0.05

2.3 表1 結(jié)果顯示，經(jīng)MB病毒滅活處理后的血漿其Fg含量及PT、TT、APTT的活性均有不同程度下降，尤其是凝血因子FⅧ和FⅤ，其活性成份分別降低了28.1%和29.9%，導(dǎo)致APTT和PT的凝血時(shí)間延長(zhǎng)。TP和ALB的含量也有所減少，但仍在國家標(biāo)準(zhǔn)允許的范圍內(nèi)。

2.3.1 經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析，可認(rèn)為MB病毒滅活血漿中TP、ALB、FV、FⅧ的均值仍落在國家標(biāo)準(zhǔn)允許的范圍內(nèi)(均差的95%可信區(qū)間范圍內(nèi)包含0)，說明經(jīng)MB病毒滅活后這些活性成分雖然有損失但仍可接受。而PT、TT、APTT、Fg已經(jīng)偏離正常范圍內(nèi)(均差的95%可信區(qū)間范圍內(nèi)不包含0)，表示這些指標(biāo)經(jīng)MB病毒滅活后受影響較大(見表2)。

2.3.2 新鮮冰凍血漿與MB病毒滅活血漿比較(見表3)，各指標(biāo)均存在差異(P均＜0.05)，兩種處理方法得出的各指標(biāo)的水平不同。

3 討論

MB光化學(xué)法病毒滅活血漿中的PT、TT、APTT凝血時(shí)間延長(zhǎng)，凝血因子及血漿蛋白含量偏低的原因是血漿在進(jìn)行MB光化學(xué)法病毒滅活技術(shù)處理的過程中吸附、過濾導(dǎo)致了部分凝血因子和血漿蛋白的損失，同時(shí)也會(huì)對(duì)凝血因子的活性成分造成損傷，導(dǎo)致凝血時(shí)間的延長(zhǎng)，從而影響血漿的應(yīng)用效果。尤其是因子FⅧ和FⅤ，雖然其檢測(cè)結(jié)果仍然符合國家標(biāo)準(zhǔn)，但對(duì)比新鮮冰凍血漿而言其活性降低較顯著，這說明凝血因子FⅤ和FⅧ不穩(wěn)定，在離體后進(jìn)行的病毒滅活技術(shù)處理過程中容易受時(shí)間、溫度等諸多因素的影響。相關(guān)專家［2］亦證實(shí)血漿經(jīng)MB法滅活后因子FⅤ和FⅧ的活性顯著降低。而血漿中的TP、ALB、Fg等含量也有不同程度的下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與肖澤斌［3］的研究結(jié)果大體一致。雖然血漿在進(jìn)行MB病毒滅活處理的過程中被吸附或?yàn)V掉部分血漿蛋白，但其含量受損較少，仍然符合國家標(biāo)準(zhǔn)，大都在30%以內(nèi)，對(duì)臨床療效影響不大，在可接受的范圍之內(nèi)［4］。

由此可見，MB光化學(xué)法病毒滅活技術(shù)會(huì)對(duì)新鮮血漿(FFP)中的APTT、PT、TT、及Fg產(chǎn)生一定程度的影響，對(duì)凝血因子FⅤ和FⅧ的影響也較大，而對(duì)TP和ALB成分的削減不大。相對(duì)于輸注新鮮血漿而引起的各種輸血風(fēng)險(xiǎn)而言使用MB病毒滅活血漿利大于弊值得臨床推廣應(yīng)用。

［1］Abdel-wahaboI，Healy B，Dzik WH.Effect of fresh-frozen plasma transfusion on prothrombin time and bleeding in patients with mild coagulation abnormalities．Tr-ansfusion，2006，46(8):1279-1285．

［2］于建華，孫庶麗，王明靜，等.病毒滅活血漿中有效成分及亞甲藍(lán)殘留量的研究.中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2010，20(6):1541．

［3］肖澤斌.亞甲藍(lán)光化學(xué)病毒滅活法對(duì)血漿質(zhì)量指標(biāo)的影響.國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2010，31(4):390-391．

［4］魏延民，王憬惺.新鮮冰凍血漿的臨床應(yīng)用及其安全性研究進(jìn)展．中國輸血雜志，2007，20(5):432-434．

The discussion of virus inactivated frozen plasma and fresh frozen plasma part of effective ingredients of quality changes

PAN Guo-xiong，XIE Zhong-xing，LI Shu-ying．Clinical Laboratory，Guangdong Zhaoqing second Poeple’s Hospital，Zhaoqing 526060，China

ObjectiveTo explore virus inactivated frozen plasma and fresh frozen plasma part of effective ingredients of quality changes.MethodsTo gather 50 bags fresh plasma，A and B is divided into two groups，detected PT，TT，APTT，F(xiàn)g，TP，ALB，F(xiàn)Ⅷ，F(xiàn)Ⅴrespectively.ResultsThe content of TP，F(xiàn)Ⅷ，F(xiàn)Ⅴand Fg in virus inactivated frozen plasma with a certain degree of reduced，but mostly within 30%，in the acceptable range.ConclusionThe MB virus inactivated plasma did not influence the clinical application，it did More good than harm．

Virus inactivated frozen plasma;Clotting factor;Factor activity;Plasma protein

526060廣東省肇慶市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科