自體骨髓干細胞肝內移植對失代償期肝硬化患者肝臟生化及纖維化指標的影響

呂明磊 劉琴 賈秋龍 甄増國

自體骨髓干細胞肝內移植對失代償期肝硬化患者肝臟生化及纖維化指標的影響

呂明磊 劉琴 賈秋龍 甄増國

目的觀察自體骨髓干細胞肝內移植對失代償期肝硬化肝臟生化及纖維化指標的影響，為臨床治療提供新方法。方法選擇我院失代償期肝硬化住院患者80例，隨機分為2組:對照組40例，給予常規對癥支持治療、護肝治療及必要的抗病毒治療。治療組40例，在對照組常規治療方法基礎上，采取經肝動脈途徑自體骨髓干細胞肝內移植。觀察術后臨床癥狀改善及不良反應情況，并于術后2、4、8、12周進行肝功能、凝血功能檢測，術后12周進行肝纖維化指標檢測。將術后12周時檢測結果進行比較。結果治療組術后第1周全部患者(100%)乏力、納差癥狀改善，35例(87.5%)腹脹減輕，而對照組只有2例(5.0%)乏力、納差癥狀改善，6例(15%)腹脹減輕，兩組間差異有統計學意義(P＜0.05);治療后12周，治療組和對照組血清ALB水平分別為(38.5±8.2)g/L和(25.4±7.5)g/L，ALT和AST水平分別為(36.3±13.5)U/L，(33.6±14.5)U/L和(70.2±13.3)U/L，(68.6±13.8)U/L，TBIL水平分別為(28.3±12.4)μmol/L和(42.3±16.3)μmol/L，PTA分別為(63.0±11.4)%和(37.2± 12.5)%，治療組肝纖維化指標明顯改善。兩組治療后肝臟生化及纖維化指標比較，差異有統計學意義(P＜0.01)。治療組2例在治療后第2天出現低熱，未發現其他不良反應及并發癥。結論自體骨髓干細胞肝內移植治療失代償期肝硬化安全有效，在肝功能、凝血功能及肝纖維化指標改善方面均有顯著作用。

骨髓干細胞;移植;肝硬化

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2009年6月至2011年6月間在我院住院的失代償期肝硬化患者80例，男52例，女28例，年齡22～72歲，平均48歲，其中包括乙型肝炎肝硬化58例，丙型肝炎肝硬化l7例，酒精性肝硬化5例。治療前均存在肝硬化常見癥狀和體征，包括納差、乏力、腹脹，同時經腹部B超或CT檢查，明確診斷肝硬化，部分并合并腹水。實驗室檢查包括血常規，凝血酶原活動度(PTA)，甲胎蛋白(AFP)，肝功能包括血清谷丙轉氨酶(ALT)、谷草轉氨酶(AST)、總膽紅素(TBIL)、白蛋白(ALB)，肝纖維化指標包括透明質酸(HA)、Ⅲ型前膠原(PCⅢ)和四型膠原(ⅣC)等。肝功能分級屬Child-Pugh B/C級。無感染和原發性肝癌等并發癥。將患者隨機分為兩組，治療組40例，對照組40例，兩組間差異無統計學意義(P＞0.05)。

1.2 治療方法 對照組給予內科支持治療，包括保肝、利膽、利尿及對癥治療等。酌情給予肝水解肽100 mg、還原性谷胱甘肽1.2 g，或促肝細胞生長素120 mg、復方甘草酸苷120 mg等分別加入5%葡萄糖或0.9%氯化鈉注射液100 ml中靜脈滴注，1次/d，同時適當限鈉限水。療程4～6周。對乙肝病毒復制活躍的乙肝肝硬化患者，給予必要的抗病毒治療。治療組在對照組上述治療的基礎上采取經肝動脈途徑行自體骨髓干細胞肝內移植治療。

1.3 術前準備 干細胞移植術前1 d房間消毒、行碘過敏試驗、雙側腹股溝備皮、消除其緊張情緒;移植術當日簽署知情同意書，隔離患者。

1.4 骨髓干細胞采集及分離 取兩側髂后上棘為穿刺點，局部消毒麻醉，在無菌條件下，以l8號骨髓穿刺針穿刺，抽取骨髓200 ml，以7500 U肝素抗凝，然后采用密度離心法進行骨髓干細胞的體外分離及純化，將得到的干細胞用0.9%氯化鈉溶液稀釋成骨髓干細胞懸液10 ml。

1.5 骨髓干細胞移植 在DSA下經股動脈穿刺插管，置管于肝固有動脈進行造影，觀察肝內血管情況。將待用的骨髓干細胞懸液10 ml于0.5 h內經左右肝動脈緩慢注入;術畢拔管，穿刺點加壓包扎后返回病房，穿刺側下肢制動24 h。

1.6 觀察指標 全部病例治療前均查血常規、PTA、AFP，肝功能、肝纖維化指標等，術后2、4、8、12周復查血常規、PTA、AFP、肝功能，術后12周復查肝纖維化指標。

1.7 統計學方法 計量資料采用均數±標準差(x±s)表示，組間比較采用成對資料的t檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 臨床癥狀的改善情況 干細胞移植術后第1周開始本組全部患者(100%)乏力、納差癥狀有明顯的改善，面色有光澤，35例(87.5%)腹脹減輕，而對照組患者只有2例(5.0%)乏力、納差癥狀明顯改善，6例(15%)腹脹減輕，兩組間差異有統計學意義(P＜0.05)。

2.2 肝臟生化指標及凝血功能的改善情況 治療組自術后第2周血清白蛋白水平開始上升，第4周PTA有明顯改善。術后第12周時，TBIL下降水平顯著高于對照組;兩組肝功能指標及凝血酶原活動度變化比較，差異有統計學意義(P＜0.01)，詳見表1。兩組治療后血清AFP及外周血紅細胞、白細胞和血小板計數無明顯的變化(具體數據未列出)。

2.3 肝纖維化指標改善情況 術后第12周時，兩組肝纖維化指標變化情況比較，差異有統計學意義(P＜0.01)，詳見表2。

表1 兩組患者術后第12周時肝功能指標和PTA變化情況比較±s)

組別 例數 ALB(g/L) ALT(U/L) AST(U/L) TBIL(μmol/L) PTA(%)治療組 40 38.5±8.2 36.3±13.5 33.6±14.5 28.3±12.4 63.0±11.4對照組 40 25.4±7.5 70.2±13.3 68.6±13.8 42.3±16.3 37.2±12.5 t值 7.456 -11.315 -11.058 -4.324 9.645 P值 ＜0.01 ＜0.01 ＜0.01 ＜0.01 ＜0.01

表2 兩組患者術后第12周時肝纖維化指標變化情況比較(x±s)

2.4 不良反應 治療組中除2例術后第2天出現低熱，第3天恢復正常外，未發現其他不良反應及并發癥。

3 討論

肝硬化是各種慢性病因導致肝細胞壞死、纖維組織增生、結構破壞、形成假小葉、肝質地變硬的常見疾病，治療重點在于有效促進肝細胞再生并代替纖維組織。研究發現，在各種原因導致的肝細胞急慢性損傷的修復過程中，肝細胞再生起重要作用。骨髓干細胞是一種具有向某些成體細胞進行分化潛能的細胞，是肝細胞的重要肝外來源［2］。由骨髓干細胞定向分化而來的肝細胞能夠很好地替代已損傷的肝細胞而發揮正常的生理代謝作用，進而使得肝臟解毒、合成等諸多功能得到較大程度的恢復，而且可以逆轉肝纖維化過程［3］。國內姚鵬等［4］首先采用自體骨髓干細胞治療慢性肝衰竭，發現其在癥狀改善和降低病死率方面效果明顯;金波等［5］證實自體骨髓干細胞肝內移植后，肝臟的合成功能可以很快提升，且能更快地改善肝臟的解毒及儲備功能，在恢復殘余肝功能容量方面與常規治療比較顯出更強的療效優勢。自體骨髓干細胞肝內移植治療有以下優點［6］:①骨髓干細胞源于自體，取材方便。②療效較明顯。③費用較低。④風險性小。骨髓抽取過程簡單，采用的介入微創技術目前也已經很成熟。術后患者大多恢復良好。

我們對40例失代償期肝硬化進行自體骨髓干細胞肝內移植治療，發現全部患者消化道癥狀有不同程度的改善，并于治療后第2周血清白蛋白水平開始顯著提升，第4周時凝血酶原活動度有明顯改善，第12周時TBIL下降水平顯著高于對照組，肝纖維化指標明顯改善，更進一步證實了該項治療在肝功能、凝血功能及肝纖維化指標改善方面均有顯著作用。治療組除2例術后第2天出現低熱，第3天恢復正常外，未發現其他不良反應及并發癥，表明該療法是安全的。

自體骨髓干細胞肝內移植治療失代償期肝硬化患者療效顯著，可明顯改善患者的臨床癥狀和體征，抑制病情發展速度，提高患者生存質量。但骨髓干細胞移植的研究目前仍然存在很多問題，如干細胞是否需要在體外進行擴增、干細胞經不同途徑進行移植的優勢比較、干細胞移植數量和移植手術次數的多少對臨床治療效果的影響等，有待以后進一步探討。

［1］姚鵬，胡大榮，王帥，等.重型肝炎的自體骨髓干細胞移植治療評估.傳染病信息，2009，22(5):288-290.

［2］胡敏.肝臟干細胞與肝臟再生.傳染病信息，2011，24(3): 129-131.

［3］Shackel N，Rockey D.In pursuit of the“Holy Grail”-stem cells，hepatic injury，fibrogenesis and repair.Hepatology，2005，41(1): 16-18.

［4］姚鵬，胡大榮，王帥，等.自體骨髓干細胞移植治療慢性肝衰竭研究.肝臟，2005，10(3):171-173.

［5］金波，孟繁平，馮宇，等.肝動脈超選灌注自體骨髓干細胞治療失代償期乙型肝炎肝硬化的臨床研究.傳染病信息，2011，24 (3):143-146.

［6］周健，劉黎，李多云，等.自體骨髓干細胞移植治療肝硬化失代償期患者的臨床效果.現代醫學，2010，38(5):467-470.

The influence of autologous bonem arrowstem cells transp lation on the indicators of biochem ical and fibrosis liver of the patients with decom pensated cirrhosis

LVMing-lei，LIU Qin，JIAQiu-long，et al.

De-partment of Liver Disease，Xinxiang Infectious Disease Hospital，Xinxiang 453000，China

ObjectiveTo provide newmethods for clinical treatment through observing the influence of autologous bonemarrowstem cells transplation on the indicators of biochemical and fibrosis liver of the patients with decompensated cirrhosis.Methods80 patients with decompensated cirrhosis in Xinxiang Infectious Disease Hospital were randomly divided in two groups:40 patients in control group were given regular symptomatic support treatment，liver protection treatment and the necessary antiviral treatment.On the basis of regular treatment of control group，40 patients in treatment group were taken the hepatic artery way autologous stem cell within the liver transplantation.Observe the postoperative clinical symptoms improvement and adverse reaction conditions of the patients;detect liver function and coagulation function in 2nd，4th，8th，12th weeks after the operation;to detecthepatic fibrosis indicators in the12thweek after the operation.At last，the test results in the 12thweek were compared.ResultsIn the 1rdweek after the operation，all patients(100%)in treatment group had improved their weakness and NaCha Symptoms，35 cases(87.5%)had reduced their abdominal distensions.While only 2 cases(5.0%)had improved their weakness and NaCha Symptoms，6 cases(15%)had reduced their abdominal distensions.The difference between two groups had a statistical significance(P＜0.05) .12 weeks after the treatment，serum ALB leverl of treatment group and control group are(38.5±8.2)g/L and(25.4±7.5)g/L.ALT level and AST level are(36.3±13.5)U/L and(33.6±14.5)U/L and(70.2± 13.3)U/L，(68.6±13.8)U/L.TBLL level are(28.3±12.4)μmol/L and(42.3±16.3)μmol/L;PTA are(63.0±11.4)%and(37.2±12.5)%.Patients in treatment group had clearly improved their hepatic fibrosis indicators.The difference between the two group in camparasion of the indicators of liver biochemistry andfibrosis has a statistical significance(P＜0.01).2 patients in treatment group suffered lowfever in the 2ndday after the treatment，no other adverse reactions and complications were found.ConclusionIt is safe and effective to use autologous bonemarrowstem cells transplation to treat the patients with decompensated cirrhosis.There are significant role in the improvementof liver function，coagulation function and the indicators of liver fibrosis.

Bonemarrowstem cell;Transportation;Liver cirrhosis

453000 河南省新鄉市傳染病醫院肝病科

失代償期肝硬化尚無理想治療方法。研究表明采用自體骨髓干細胞肝內移植，可使干細胞在肝臟中生長分化為肝細胞，使損傷的肝功能得以恢復和重構［1］。本研究采取經肝動脈插管途徑行自體骨髓干細胞肝內移植治療失代償期肝硬化，通過觀察該治療方法對患者臨床癥狀、肝臟生化及纖維化指標的影響，對其療效和安全性進行了探討和驗證。