3種植物提取劑對(duì)土蝸殺滅效果的初步研究

呂中芳，林守敏，史建南，汪彥愔

（福建師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，福建 福州 350108）

土蝸（Galla）屬軟體動(dòng)物門（Mollusca）、腹足綱（Gastropoda）、肺螺亞綱（Pulmonata）、基眼目（Basommatophora）、椎實(shí)螺科（Lymnaeidae）、土蝸屬（Galla）［1］。它和椎實(shí)螺科的另一個(gè)屬蘿卜螺屬（Radix）是大多數(shù)動(dòng)物血吸蟲的中間宿主。土蝸屬的小土蝸（Galbapervia）和截口土蝸（G.ttruncatula）是牛、羊肝片吸蟲（Fasciola hepatica）、東畢屬（Orientobilharize）吸蟲以及包氏毛畢吸蟲（Trichobilharziapaoi）等人、畜、魚類寄生吸蟲的中間宿主，對(duì)傳播寄生吸蟲病起著極其重要的作用，危害極大［2－3］。因此消滅這些中間宿主成為防治這些寄生吸蟲病的重要措施。

大蒜是百合科植物蒜（AlliumSativumL.）的鱗莖，其主要生物活性成分大蒜素（Allicin），含多種烯丙基有機(jī)硫化物，具有殺菌抗癌的作用［4－5］，也有較強(qiáng)的殺滅釘螺（Oncomelaaniahupensis）的作用［6］。落葉喬木植物苦楝（MeliaazedarachL.）的皮、葉及果實(shí)中都還有的四環(huán)三萜類殺蟲成分苦楝素［7］。苦參堿（matrine，MAT）是豆科植物苦參（SophoraflavescensAit）所含的主要生物堿之一，具有抗菌殺蟲的作用［8］。本研究選取這3種植物的有效成分提取物對(duì)土蝸進(jìn)行室內(nèi)浸殺試驗(yàn)，初步確定這3種植物的滅螺效果。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 滅螺植物提取劑 3種植物提取劑均購自陜西昂盛生物醫(yī)藥科技有限公司，分別為1%的大蒜素粉末，2.5%的苦楝素和4%的苦參堿的浸膏。

1.1.2 土蝸 采自福建省福州市閩侯縣大學(xué)城福建工程學(xué)院校園內(nèi)。

1.2 方法

1.2.1 滅螺植物提取劑 取2g 1%的大蒜素粉末、2g 2.5%的苦楝素、1.7g 4%的苦參堿分別溶于100mL的去氯水，配成200mg／L（以有效成分大蒜素計(jì)）的大蒜提取液、500mg／L（以有效成分苦楝素計(jì)）的苦楝提取液、680mg／L（以有效成分苦參堿計(jì)）的苦參提取液，作為母液備用。將母液分別稀釋成0.5mg／L、1mg／L、2mg／L、4mg／L、8mg／L的大蒜素稀釋液，5mg／L、10 mg／L、20mg／L、40mg／L、80mg／L的苦楝素稀釋液，以 及 2.8mg／L、5.6g／L、11.2mg／L、22.4mg／L、44.8mg／L的苦參堿稀釋液，并分別進(jìn)行滅螺試驗(yàn)，以無氯清水浸泡為對(duì)照。

1.2.2 浸殺試驗(yàn) 將采集回來的土蝸在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)用去氯水飼養(yǎng)一周，選取活力較強(qiáng)的成螺每10只為1組，裝入自制的尼龍小網(wǎng)袋中。放置于盛有1L不同濃度的稀釋液和無氯清水（CK）的玻璃鋼中，每個(gè)濃度處理組另設(shè)2個(gè)平行實(shí)驗(yàn)組，每組各分別放入4袋，分別于24h、48h、72h、96h各取出一袋。將每次取出的螺用無氯清水清洗3次再放入盛有無氯清水的燒杯中復(fù)蘇24h，鑒定死亡情況，分別記錄各平行組死亡數(shù)，取其平均值計(jì)算死亡率。

1.2.3 土蝸死活的鑒別方法 參照文獻(xiàn) ［9］中的方法，將復(fù)蘇24h后的土蝸用鑷子輕輕夾出置于玻璃培養(yǎng)皿中，有明顯爬動(dòng)行為的判斷為活，無動(dòng)靜的用鑷子觸其厴部放在解剖鏡下觀察有無反應(yīng)，若其足部變白且軟體部分無任何反應(yīng)的即為死亡。

1.2.4 數(shù)據(jù)處理 用Microsoft Excel 2010測(cè)算3種植物提取液的滅螺效果，并用SPSS 17.0計(jì)算LC50。

2 結(jié)果與分析

2.1 3種植物提取劑對(duì)土蝸的浸殺效果

大蒜、苦參和苦楝提取劑對(duì)土蝸的浸殺效果見圖1～圖3。無氯清水對(duì)照組的死亡率均為0，處理24h的殺滅效果也不是很明顯，但隨著處理時(shí)間的延長土蝸的死亡率也越來越高，如濃度為8 mg／L的大蒜提取液48h的殺螺率達(dá)70%，濃度為80mg／L的苦楝提取液浸殺土蝸48h的死亡率達(dá)90%，而經(jīng)濃度為44.8mg／L的苦參提取液處理72h后土蝸的死亡率也達(dá)到60%，這3種植物提取物對(duì)土蝸都有一定的殺滅效果。

圖1 大蒜提取物的滅螺效果

圖2 苦參提取物的滅螺效果

圖3 苦楝提取物的滅螺效果

2.2 3種植物提取劑的滅螺效果比較

大蒜提取液浸殺土蝸48h和96h的LC50分別為4.96mg／L和1.62mg／L（表1），而苦參提取液為45.60mg／L和10.09mg／L，苦楝提取液則為37.46mg／L和12.45mg／L，由此可以得出大蒜對(duì)土蝸的殺滅效果最好，苦楝次之，苦參最弱。但是96h的苦參比苦楝殺滅土蝸效果好。

表1 3種植物提取物滅螺效果比較

3 小結(jié)與討論

已有研究表明，大蒜對(duì)釘螺有較強(qiáng)的殺滅作用［6］，本研究結(jié)果證實(shí)了大蒜對(duì)土蝸具有較強(qiáng)的殺滅作用，48h浸殺土蝸的LC50為4.96mg／L。同時(shí)，本研究結(jié)果也表明苦楝和苦參對(duì)土蝸也有較好的殺滅作用，苦楝96h浸殺土蝸的LC50為10.09 mg／L，苦參96h浸殺土蝸的LC50為12.45mg／L。3種植物提取劑中大蒜的滅螺效果較苦楝和苦參好，其中苦楝24h、48h、72h的浸殺效果都比苦參要好，但浸殺96h以上的效果不及苦參，這可能是苦參提取物中的有效殺螺成分隨著浸泡時(shí)間的增長作用效果越來越明顯。但就目前而言，采用植物有效成分提取液進(jìn)行滅螺還有制約因素，比如成本較高、毒殺作用慢等［10］。

已有研究顯示，大蒜對(duì)釘螺的酯酶同工酶有一定的影響［6］，而苦楝和苦參的滅螺機(jī)理還有待進(jìn)一步研究，因?yàn)橹苯佑眯迈r滅螺植物的水浸液易造成環(huán)境污染［10］，本研究直接采用3種植物的提取劑進(jìn)行滅螺試驗(yàn)，且結(jié)果相對(duì)于直接用植物的水浸液效果要好，更具參考意義，在一定程度上能夠?qū)M(jìn)一步研究這些植物的滅螺機(jī)理提供參考。

［1］劉月英，張文珍，王耀先 .醫(yī)學(xué)貝類學(xué) ［M］.北京：海洋出版社，1993.

［2］吉林醫(yī)科大學(xué)稻田皮炎研究組 .稻田皮炎 ［J］.國外醫(yī)學(xué)動(dòng)態(tài)，1966，7（3）：1.

［3］蔣錫仕，扎西平措，黃孝玢 .氯硝柳胺控釋劑殺滅椎實(shí)螺實(shí)驗(yàn)［J］.四川動(dòng)物，2002，3：60－61.

［4］蘇美瓊，楊柏崇，成密紅，等 .大蒜的功效及綜合利用研究進(jìn)展 ［J］.西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2003，12（4）：151－156.

［5］鞠秀蘭，禹海波，荊曉薇，等 .大蒜素的研究與應(yīng)用 ［J］.衛(wèi)生職業(yè)教育，2010，28（7）：153.

［6］嚴(yán)志春，胡建國，朱冬至，等 .大蒜籽液浸殺滅螺實(shí)驗(yàn) ［J］.中國血吸蟲病防治，2004，16（3）：210－211.

［7］汪文陸，趙善歡 .苦楝果實(shí)中化學(xué)成分進(jìn)一步研究及生物活性測(cè)定 ［J］.華南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，1993，14（3）：64－69.

［8］單廣夷，盛玉文 .苦參堿抑制腫瘤細(xì)胞生長作用的研究進(jìn)展［J］.遼寧醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2009，30（1）：85－87.

［9］李兵，趙平，陳娟，等 .紫莖澤蘭浸泡液對(duì)椎實(shí)螺殺滅效果觀察 ［J］.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009，37（9）：4069－4070.

［10］馬安寧，王萬賢，楊毅，等 .滅螺植物資源的開發(fā)利用研究［J］.自然資源學(xué)報(bào)，2000，15（1）：40－45.