產地和采收時間對梔子中梔子苷含量的影響△

朱琦，吳炳忠，沈曉霞

（1.浙江省中藥研究所有限公司，浙江 杭州 310023；2.浙江大學醫學院附屬第二醫院，浙江 杭州 310023）

產地和采收時間對梔子中梔子苷含量的影響△

朱琦1*，吳炳忠2，沈曉霞1

（1.浙江省中藥研究所有限公司，浙江 杭州 310023；2.浙江大學醫學院附屬第二醫院，浙江 杭州 310023）

目的：考察不同產地和采收時間對梔子中梔子苷含量的影響。方法：采用高效液相色譜法測定不同產地、不同采集時間梔子中梔子苷含量。色譜柱：Diamonsil C18柱（250mm×4.6mm，5μm），流動相：乙腈－水（15∶85），流速：1.0mL·min－1，柱溫：30℃，波長：238nm。結果：各產區同一時間采集的梔子中梔子苷含量從高到低排列：安吉＞縉云東渡＞麗水蓮都＞溫州泰順＞淳安楓樹嶺。收集樣品中梔子苷含量在9月中旬剛結果時最高。

梔子；高效液相色譜法；梔子苷；含量

梔子Gardenia jasminoidesEllis為茜草科常綠灌木，以成熟果實入藥，又稱山梔、生山梔子，屬常用中藥，在我國臨床應用已有1 600多年歷史。《中國藥典》2010版規定梔子藥材的含量測定成分為梔子苷［1］?！吨袊幍洹芬幎d子的采收時間是9～11月果實成熟呈黃色時，但產地調查發現9月大部分梔子均剛剛結果，梔子為青色果實，10月大部分為青色果實，小部分為半紅半青果實，11、12月為全紅成熟果實；梔子產區梔子采摘期均在11月左右。本文對不同產地、對《中國藥典》規定的不同采收期的梔子進行了梔子苷含量的測定，綜合研究兩種因素對梔子苷含量的影響，為梔子確定適宜采收時間提供了理論依據。

1 儀器與材料

Agilent 1100高效液相色譜儀，Senco R-501旋轉蒸發儀，KQ-100DB數控超聲波清洗器，DHG-9140電熱恒溫鼓風干燥箱，AB 204-S電子天平；乙腈（色譜純）、甲醇（分析純）、梔子苷對照品（含量測定用，中國食品藥品檢定研究院，批號：110749-200613）；無水乙醇（分析純），95%乙醇（分析純）。

實驗用的梔子干燥成熟果實采于安吉、縉云東渡、麗水蓮都、溫州泰順、淳安楓樹嶺，經浙江省中藥研究所俞旭平教授鑒定為梔子GardeniajasminoidesEllis的干燥成熟果實。

2 方法與結果

2.1 供試品溶液制備

2.1.1 對照品溶液的制備 精密稱取梔子苷對照品適量，加甲醇制成每1mL含40μg的溶液，即得。

2.1.2 供試品溶液的制備 收集各產地不同時間新鮮梔子各1kg，切片烘干后，各取100 g粉碎備用。

取藥材粉末（過四號篩）約0.1 g精密稱定，置錐形瓶中，精密加入甲醇25mL，稱定重量，超聲處理20 min，放冷，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過。精密量取濾液10mL，置25mL容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。

2.2 色譜條件

色譜柱：Diamonsil C18鍵合硅膠柱（250mm×4.6mm，5μm），流動相：乙腈 －水（15∶85），流速：1.0mL·min－1，柱溫：30℃，檢測波長：238nm。

2.3 繪制梔子苷標準曲線

精密稱取梔子苷對照品12 mg，用甲醇（色譜純）定容于100mL容量瓶中，即得120μg·mL－1得梔子苷對照品溶液，梔子苷對照品色譜圖見圖1。梔子苷在20～120μg峰面積A與其質量M呈現良好的線性關系，其回歸方程為：A＝312.2M＋17.95，r＝0.999 4，n＝6。

圖1 梔子苷對照品圖譜

2.4 精密度試驗

精密吸取梔子苷對照品溶液（40μg·mL－1）10μL，連續進樣5次，測定峰面積，結果RSD＝1.62%，表明該方法測定梔子苷，儀器精密度符合要求。

2.5 穩定性試驗

精密吸取剛配好梔子苷對照品溶液1.5mL，24 h內不定期測定其峰面積，結果 RSD＝1.20%（n＝7），表明梔子苷用該方法在該儀器24 h內測定結果較穩定，符合要求。

精密吸取上述梔子苷對照品溶液10μL，每隔一定時間段測定兩次，其積分面積RSD＝2.81%（n＝3），表明梔子苷用該方法在該儀器2009-09-01～2010-05-31測定結果較穩定，符合要求。

2.6 重復性試驗

取縉云東渡同一批梔子藥材，分別制備6份供試品溶液，在上述色譜條件下分別進樣10μL，測得梔子苷平均含量為4.71%，RSD＝2.1%，結果表明方法重復性較好。

2.7 回收率試驗

精密稱定已知含量的縉云東渡梔子藥材粉末6份，每份0.05 g，再分別精密加入濃度為0.235 5 mg·mL－1的對照品10mL，之后分別精密加入15mL的50%甲醇。按2.1.2項下方法制備供試品溶液，取10μL在上述色譜條件下測定梔子苷的含量，結果表明該方法的回收率良好，見表1。

表1 梔子苷加樣回收率試驗

2.8 不同產地及不同采集時間梔子中梔子苷含量測定

2.8.1 不同產地梔子藥材的梔子苷含量測定 取2009年11月14日各地采集的樣品，按上述條件測定梔子苷含量，結果見表2。按梔子藥材中梔子苷含量從高到低排序，分別為安吉、縉云、麗水、溫州泰順、淳安楓樹嶺。

表2 同一采集時間不同產地梔子中梔子苷含量

2.8.2 成熟期梔子的不同采收時間藥材的含量測定 結果見表3。2009年11月14日為首摘時間。由表3中可看出，成熟果實早期采摘的含量較高。

表3 不同采集時間梔子中梔子苷含量比較

2.8.3 不同成熟度梔子新鮮藥材中梔子苷含量 結果見表4?？煽闯鰲d子苷含量在梔子剛結果時較高，梔子果實由青變紅時和完全成熟時含量較低。隨著成熟度提高含量逐漸降低。

表4 不同采集時間相同產地梔子（鮮）中梔子苷含量（2010年）／%

3 討論

本實驗對磐安楓樹嶺、臨安於潛等地所采梔子，均采用50℃干燥8 h［2］進行干燥。并測定梔子苷折干率，其值均在32%～40%，干燥過程對梔子苷含量未產生影響。

經采集比較安吉、縉云東渡、麗水蓮都、溫州泰順、淳安楓樹嶺等地采摘期的成熟梔子，曬干后梔子中梔子苷含量均達到了《中國藥典》規定的1.8%的標準，證實其均為質量優良的梔子藥材，其中尤以安吉產的梔子（干貨）中梔子苷含量最高，為6.07%，在實驗過程收集2010年樣品（相同時間段不同產地的梔子）中，以9月中旬剛結果梔子中梔子苷含量最高。

本實驗詳細研究梔子苷在果實發育過程中的累積規律，可以為梔子的采收提供更加科學的依據。《中國藥典》僅規定了梔子苷的含量作為有效成分的指標，本實驗所采梔子中梔子苷的含量均符合《中國藥典》規定。因此，在實際應用中若純粹提取梔子苷，建議采摘梔子青果提取。

［1］國家藥典委員會.中國藥典［S］.一部.北京：中國醫藥科技出版社，2010：231.

［2］黃銳，唐燦，姚建，等.梔子果實干燥工藝優選研究［J］.中國實驗方劑學雜志，2011，17（7）：37-39.

Influences of Different Origins and Collection Time on Content of Geniposide in Gardeniae Fructus

ZHU Qi1，SHEN Xiao-xia1WU Bing-zhong2
（1.Zhe Jiang Resrrch Institute Of Trrditiionrl Chinese Medicin Co.Ltd，Hangzhou 310023，China；2.Second Affiliated Hospital Zhejiang University School of Medicine，Hangzhou 310023，China）

Objective：Investigate the influence of different origins and collection time on content of geniposide in Gardeniae Fructus.Methods：HPLC was used to determine content of geniposide in Gardenia from different origins and different collection time.Diamonsil C18chromatographic column（250mm ×4.6mm，5μm）was used with themobile phase being acetonitrile-water（15∶85），the column temperature being 30℃，the flow rate being 1.0mL·min－1，the detection wavelength being 238nm.Results：Geniposide contents in Gardeniae Fructus from each region at the same collection time from high to low were Anji，DongDu（JinYun），LianDu（LiShui），TaiShun（WenZhou），XiaoHeShan），FengShuLing.The highest content of Geniposide in Gardeniae Fructus was in themiddle of September when it is just bear fruit.

Gardenia；HPLC；Gardeniae Fructus；Content

浙江省重大科技專項（2009C12091）

* ［通訊作者］朱琦，Tel：（0571）85229698，E-mail：zhuqiqi1985＠yahoo.com.cn

2011-08-30）