楊梅中硒含量測定的消化方法

蔣步云，柴振林，呂愛華，尚素微，朱杰麗

(浙江省林產品質量檢測站，浙江 杭州 310023)

楊 梅 (Myrica rubra Sieb) 是 楊 梅 科(Myricaceae)楊梅屬 (Myrica L.)中的一個種，是我國南方特產果樹之一［1］，深受廣大消費者的喜愛。楊梅營養價值豐富，且有藥用價值，含有碳水化合物、有機酸、蛋白質及多種維生素等成分，具有生津止渴、和胃消食、益腎利尿和解暑止瀉之功效，同時也具有抗氧化和抗衰老的作用［2-3］。硒是人體必不可少的微量元素之一，具有抗氧化、保護心血管、解毒、防癌和提高免疫力等作用［4-5］。隨著科技的進步，人們生活水平的提高，富硒楊梅開始日益走俏。但何謂富硒，楊梅中硒含量究竟有多少等等都是重點關注的問題，因此，準確、快速地測定楊梅中硒的含量顯得尤為重要。

目前，測定硒的方法主要有原子光譜法、吸光光度法、熒光光度法、電化學法及色譜法等，各種聯用技術也已經用于硒的測定及形態分析［6］。本實驗使用的是氫化物原子熒光光譜法。原子熒光法測定的范圍寬，具有方法簡單、靈敏度高、準確性好的特點［7］。應用氫化物原子熒光光譜法測定必須對樣品進行消解，為提高測定結果的正確性和效率，進行了微波消解法和濕法消解 (電熱板加熱消解)法對測定結果影響的實驗。現將有關結果報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器

AFS-930 型雙道原子熒光光度計 (北京吉天儀器有限公司)，Multiwave3000 微波消解儀 (奧地利安東帕公司)，可控式電爐，硒空心陰極燈等。

1.1.2 試劑

硝酸，高氯酸，鹽酸 (優級純)，過氧化氫(分析純)，硼氫化鉀溶液10 g·L-1，硒標準儲備液100 mg·L-1，硒標準使用液0.1 mg·L-1，載流5%鹽酸溶液，10 g·L-1鐵氰化鉀溶液 (掩蔽劑:可明顯消除Pb、Cu 的干擾［8］)，標準茶葉對照樣 (國家標準物質，樣品編號GSB-7)。

1.2 方法

1.2.1 原理

樣品經酸加熱消化后，在6 mol·L-1鹽酸介質中，將試樣中的六價硒還原成四價硒，用硼氫化鉀作還原劑，將四價硒在鹽酸介質中還原成硒化氫，由載氣(氬氣)帶入原子化器中進行原子化，在硒空心陰極燈照射下，基態硒原子被激發至高能態，在去活化回到基態時，發射出特征波長的熒光，其熒光強度與硒含量成正比。與標準系列比較定值［9］。

1.2.2 樣品制備

取楊梅可食用部分打成勻漿后備用，余樣放冷柜冰凍儲藏。

1.2.3 樣品前處理

濕法消解 (電熱板加熱消解)。參考 GB 5009.93—2010 食品中硒的測定中第1 法 (氫化物原子熒光光譜法)，準確稱取處理好的待測試樣1～2.000 g 于消化瓶中，加入混合酸 (硝酸∶高氯酸4∶2)10 mL，蓋上表面皿冷消化過夜，于次日電爐上加熱。當溶液變為澄清透明并伴有白煙時，再繼續加熱至剩余體積2 mL 左右，不可蒸干。冷卻，再加5 mL 6 mol·L-1鹽酸，繼續加熱至溶液變為澄清透明并伴有白煙出現，將六價硒還原成四價硒。冷卻，用去離子水定容到25 mL 容量瓶中，待測，同時做試劑空白。

微波消解法。準確稱取處理好的待測試樣0.5～2.000 g 于微波消解罐內，加混合酸為4 mL硝酸+3 mL 過氧化氫，放置過夜，次日置于微波消解儀器內按設定程序進行消解。當室內溫度低于10℃時，應先放于趕酸架上40℃預熱10 min 左右，以便微波消解儀能正常啟動。程序運行結束后取出反應罐冷卻一段時間，放置于趕酸架上120℃趕酸至剩余2 mL 左右時取下，冷卻后加入5 mL 6 mol·L-1鹽酸溶液，繼續放回趕酸架上消化至剩余溶液澄清透明，將六價硒還原成四價硒。取下冷卻至室溫，0.5%硝酸溶液定容到25 mL 容量瓶中，待測，同時做試劑空白。32 位微波消解儀設置條件經多次試驗摸索得到最佳化條件。

1.2.4 測定方法

原子熒光光度計儀器工作條件設置。光電倍增管負高壓270 V，屏蔽氣流量800 mL·min-1，原子化器溫度200℃，讀數時間7 s，原子化器高度8 mm，延遲時間1.5 s，燈電流80 mA，測量方式Std.Curve，載氣流量400 mL·min-1，讀數方式Peak.Area。

標準曲線繪制。取硒標準使用液0.1 mg·L-12.5 mL 到25 mL 容量瓶中，用5%鹽酸溶液稀釋，加入1 mL 鐵氰化鉀溶液為掩蔽劑，定容到刻度線，搖勻作為硒的標準工作溶液。儀器設置為自動進樣，標準系列分別為1.000，2.000，4.000，6.000 和10.000 μg ·L-1。得出標準系列濃度(x)與熒光強度 (y)的關系式:y=15.225 1x-0.871 1，R2=0.999 8。

樣品測定。向2種消化方法 (微波消解法和濕法消解法)消化好后定容到25 mL 容量瓶中的樣品溶液內加入1 mL 10 g·L-1鐵氰化鉀溶液作為掩蔽劑，搖勻，同標準曲線一樣上機測定含量。載流為5%鹽酸溶液，還原劑為10 g·L-1硼氫化鉀溶液。

2 結果與分析

2.1 測定值

標準茶葉對照樣GSB-7 經過原子熒光光譜法測定后，2種消化方法對結果的影響見表1。

表1 微波消解法和濕法消解法測定標準茶葉對照樣的結果

從表1 可知，微波消解法的測定平均值高于濕法消解法 (電熱板加熱法)的測定平均值，兩者都在標準值范圍內。微波消解法的相對標準偏差較低，說明微波消解標樣更完全更徹底，硒含量損失較少且平行性良好。

從2種消化方法處理后得到的待測楊梅樣品測定結果 (表2)來看，同樣可得出微波消解法優于濕法消解法。

表2 微波消解法和濕法消解法測定楊梅樣品的結果

2.2 加標回收率

對微波消解法作為消化方法的標準茶葉對照樣進行加標回收試驗，3個加標濃度得到的回收率為90%～110% (表3)，符合加標回收的要求，說明微波消解法消解楊梅樣品是可行有效的。

表3 微波消解法的加標回收率

通過加標回收試驗評估樣品預處理產生的不確定度。18個加標樣品的平均回收率99.33%，標準偏差S 為2.91%，標準不確定度設為U (R)，有U (R)=0.008 774，則其相對標準不確定度為U (R)/R=0.008 833。

2.3 精密度

對微波消解法消化標準茶葉對照樣進行11 次精密度試驗，相對標準偏差為5.11%，說明其符合要求。

3 小結

在楊梅中硒含量測定的過程中，通過2種消化方法的比較，可以看出微波消解相對于濕法消解，具有消耗樣品和試劑少、消解徹底、快速簡便、準確度高、精密度好等優點，是一種較理想的前處理方法，且污染少更利于操作者的安全［10-11］。因此，楊梅中硒含量測定的消化方法可采用微波消解法。

［1］謝小波，求盈盈，邱立軍，等.堿性土壤對楊梅生長結果的影響［J］.浙江農業學報，2008，20 (4):261-265.

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［3］張澤煌，盧新坤，林旗華，等.10個楊梅品種果實糖和氨基酸含量分析［J］.浙江農業學報，2011，23 (7):18-20.

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［5］余光輝，溫琰茂，何樹悠，等.廣州市26種水果中硒含量特征分析［J］.食品科學，2007，28 (8):344-347.

［6］劉興艷，馬建華，朱靜平，等.食品中硒的分析進展［J］.微量元素與健康研究，2005，22 (1):26-28.

［7］袁菊，洪濤，陳鳳凰，等.微波消解一氫化物發生原子熒光法測定土壤中硒［J］.貴州工業職業技術學院學報，2011，6 (1):54-56.

［8］彭新元，朱攀.原子熒光光譜測定土壤中硒的方法研究［J］.實用預防醫學，2008，15 (5):1599.

［9］GB 5009.93—2010，食品中硒的測定［S］.

［10］侯曉芳，遲忠云，王悅霞.氫化物發生原子吸收法測定保健食品中硒含量［J］.海峽預防醫學雜志，2009，15(1):55-56.

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