張玲玲 廖慧麗 劉明平 黃海洋 張煒華 陳斯泰 單麗囡 李 耿
1.廣州中醫藥大學,廣東廣州 510006;2.廣東省潮州市鳳凰山保健品有限公司,廣東潮州 521000
老姜茶顆粒治療空調病藥效學研究
張玲玲1廖慧麗1劉明平1黃海洋1張煒華1陳斯泰2單麗囡1李 耿1
1.廣州中醫藥大學,廣東廣州 510006;2.廣東省潮州市鳳凰山保健品有限公司,廣東潮州 521000
目的研究老姜茶顆粒的發汗、鎮痛、腸推進作用,探討其防治空調病的藥效機制 。 方法 通過汗液著色實驗觀察藥物對正常小鼠足跖汗液分泌的影響;通過醋酸扭體實驗觀察給藥后小鼠的扭體潛伏期和15min內的扭體次數;通過小腸炭末推進實驗觀察其對正常小鼠小腸運動的影響。 結果老姜茶顆粒高劑量可顯著增加小鼠足跖部汗點密度(P<0.05),顯著抑制醋酸所致小鼠扭體次數(P<0.05),高、中、低各劑量對小鼠的腸推進均有顯著的促進作用(P<0.05或P<0.01)。 結論 老姜茶顆粒具有促進汗液分泌和腸運動、鎮痛的作用,與其防治空調病的中醫治則相符。
老姜茶顆粒;發汗;鎮痛;腸推進;空調病
隨著人們生活水平的提高,空調病逐漸成為一種現代疾病,常表現出鼻塞、頭昏、打噴嚏、食欲減退等感冒癥狀。中醫認為,夏天暑濕之氣彌漫,在空調房內因冷而汗孔緊閉,體內的濕熱不能通過出汗散發,郁積體內,形成“寒冷外束肌表,濕熱內蘊脾胃之征”。
老姜茶顆粒是廣東潮汕地區傳統的飲品,它采用鳳凰山地區特色產品百日姜和老春茶等,尊古法炮制而成。功效散寒發汗、和胃止嘔,為治療空調病鼻塞頭昏、嘔吐泄瀉之佳品。本研究試圖從空調病的中醫病機入手,探討其防治空調病的藥效機制。
1.1 藥品及試劑
1.1.1 藥品 老姜茶顆粒(規格每包12 g,由潮州市鳳凰山保健品有限公司提供,生產許可證:QS445106010878,批號:20120228);阿司匹林腸溶片(規格50 mg/片,湖南新匯制藥有限公司,批號:110805);西沙比利(規格5mg/片,浙江京新藥業股份有限公司生產,生產批號:1108132);麻黃飲片(購于廣州中醫藥大學采芝林藥店,經廣州中醫藥大教授賴小平鑒定為麻黃科植物草麻黃Ephedrasinica Stapf的干燥草質莖)。
1.1.2 試劑 固體碘(天津市大茂化學試劑廠,批號:110907);無水乙醇(天津市百世化學試劑廠,批號:110808);可溶性淀粉(天津市大茂化學試劑廠,批號:110914);水合氯醛(天津市大茂化學試劑廠,批號:090228);冰醋酸(天津市福晨化學試劑廠,批號);氯化鈉 (天津市福晨化學試劑廠,批號:20090410)。
1.1.3 麻黃水提液制備 取麻黃粗粉12.75 g,置于250mL圓底燒瓶中,精密加入用醋酸調PH至3.5后的酸水150mL,電熱套加熱回流2次,每次1 h,過濾,合并2次濾液,減壓濃縮至適當濃度[1-2],即得供試品溶液。
1.2 實驗動物
SPF級昆明小鼠,體質量18~22 g,均雌性。由廣州中醫藥大學實驗動物中心提供,合格證號:SCXK(粵)2008-0020。動物飼養于廣州中醫藥大學中藥學院實驗動物觀察室 (國家中醫藥管理局中醫藥科研實驗室三級認證),喂以標準的顆粒鼠料。
1.3 儀器
OlympusSZX7體視鏡 (廣州明美光電公司);YLS-6A智能熱板儀(山東醫學科學院設備站);XJ-613D1秒表(信佳電子有限公司);SX-7001D電子天平 (順德拓普域電子有限公司);BSIIOS萬分之一分析天平(香港佳立國際有限公司);卷尺(3m,光輝,量制豫字 03000036號)。
1.4 實驗方法
1.4.1 對小鼠足跖汗液分泌的影響(著色法)取昆明小鼠60只,體重18~22 g,雌性,隨機分為五組,即空白組、麻黃水提液組、老姜茶顆粒高、中、低劑量組,每組12只。連續灌胃給藥6 d,每日1次。給藥體積均為10 mL/kg,空白組給予等體積生理鹽水,其它組給藥劑量見表1。末次給藥后將小鼠用水合氯醛麻醉,用橡皮筋仰位固定,暴露雙后肢。到給藥后30min時用棉簽蘸取無水乙醇輕輕地將足跖部污物及原有汗液拭去,再用干棉簽擦干。然后在足跖部皮膚涂上和田-高垣氏試劑A液,待充分干燥后,再薄薄涂上B液,隨后每隔10 min用體視鏡觀察1次小鼠左側足跖部深紫色著色點 (即汗點)的密集程度并進行評分,共觀察3次,分別為10、20、30 min內汗點密集程度(以開始觀察計時)。評分標準:無汗點出現0分;出現零星稀疏汗點1分;汗點出現較多且分布較為密集5分;汗點極多而且連成片10分[1-3]。
1.4.2 對醋酸所致小鼠扭體反應的影響 取昆明小鼠60只,體質量18~22 g,雌性,隨機分為五組,即空白組、阿司匹林腸溶片組、老姜茶顆粒高、中、低劑量組,每組12只。連續灌胃給藥6 d,每日1次。給藥體積均為10mL/kg,空白組給予等體積生理鹽水,其他組給藥劑量見表2。末次給藥前禁食12 h,給藥3min后,每只小鼠腹腔注射新鮮配制的0.8%醋酸溶液(按0.1mL/10 g計算)[4],記錄小鼠注射醋酸溶液后開始出現扭體的時間(潛伏期)和15 min內出現扭體反應的次數(以小鼠出現腹部內凹成“S”形、軀干與后肢伸張蠕行等,臀部高起為扭體反應)[5-7]。
1.4.3 對正常小鼠小腸運動的影響[8-11]取昆明小鼠60只,體質量18~22 g,雌性,隨機分為五組,即空白組、西沙必利組、老姜茶顆粒高、中、低劑量組,每組12只。連續灌胃給藥5 d,每日1次。給藥體積均為20mL/kg,空白組給予等體積生理鹽水,其他組給藥劑量見表4。末次給藥前禁食、禁水12 h,給藥30min后,各鼠灌胃碳末懸濁液0.1mL/10 g,20min后脫頸椎處死,剖開腹腔,迅速取出整個胃腸道于紙上,輕輕剝離,鋪直后測量幽門至回盲部全長以及幽門至碳末前沿距離,以幽門至碳末前沿的距離占幽門至回盲部全長的百分率為碳末推進百分率。根據下面公式計算小鼠的推進百分率:
1.5 統計學方法
各組實驗數據采用SPSS 17.0 for windows統計軟件,計量資料數據以均數±標準差()表示,采用單因素方差分析(ANOVA),兩兩比較采用LSD-t檢驗。計數資料以率表示,采用χ2檢驗。以P<0.05為差異有統計學意義。
2.1 對小鼠足跖汗液分泌的影響
表1結果顯示,與空白組比較,陽性藥麻黃液水提液在涂完和田-高垣氏試劑后10、20、30 min各時間點均可顯著增加小鼠足趾部汗點密度(P<0.01)。提示造模成功,實驗方法可行。與空白組比較,老姜茶顆粒高劑量組在涂完和田-高垣氏試劑后10、20、30 min各時間點均可顯著增加小鼠足趾部汗點密度(P < 0.05),且在 10、20、30 min內汗點密度有遞增趨勢。與空白組比較,中劑量具有增加汗液分泌量的趨勢,但差異無統計學意義(P>0.05)。
表1 老姜茶顆粒對小鼠足跖汗液分泌作用的評分(,分,n=12)
表1 老姜茶顆粒對小鼠足跖汗液分泌作用的評分(,分,n=12)
注:與空白組比較,*P<0.05,**P<0.01
組別 給藥劑量(g/kg)10 min內汗點密度20min內汗點密度30min內汗點密度空白組麻黃水提液組老姜茶高組老姜茶中組老姜茶低組-17 48 24 12 0.42±0.51 1.92±1.88**1.67±1.56*1.42±1.73 0.25±0.45 1.17±1.27 4.50±3.18**3.75±2.80**2.33±1.97 0.75±0.45 1.58±1.62 7.17±3.16**5.25±3.33**3.00±2.09 1.50±1.68
2.2 對醋酸所致小鼠扭體反應的影響
表2結果顯示,與空白組比較,陽性藥阿司匹林腸溶片可顯著延長醋酸所致小鼠扭體反應的潛伏期 (P<0.01),并顯著減少小鼠15min內的扭體次數(P<0.01),提示造模成功,實驗方法可行。在潛伏期影響方面,與空白組比較,老姜茶顆粒各劑量組差異均無統計學意義(P>0.05)。在15min內扭體次數方面,老姜茶顆粒高劑量可顯著抑制小鼠15min內的扭體次數(P<0.05),中、低劑量組小鼠扭體次數有一定程度地減少,但差異無統計學意義(P>0.05)。
表2 老姜茶顆粒對醋酸所致小鼠扭體反應的影響(,n=12)
表2 老姜茶顆粒對醋酸所致小鼠扭體反應的影響(,n=12)
注:與空白組比較,*P<0.05,**P<0.01
組別 給藥劑量(g/kg) 潛伏期(s) 15min內扭體次數(次)空白組阿司匹林腸溶片組老姜茶顆粒高劑量組老姜茶顆粒中劑量組老姜茶顆粒低劑量組-0.3 48.0 24.0 12.0 272.1±59.6 399.9±85.3**272.1±60.2 269.9±40.8 252.2±26.5 32.8±12.8 20.2±9.4**24.9±9.3*27.3±8.8 30.6±5.1
2.3 對正常小鼠小腸運動的影響
表3結果顯示,與空白組比較,西沙必利可顯著提高小鼠小腸推進率(P<0.05),提示造模成功,實驗方法可行。與空白組比較,老姜茶高、中、低各劑量均可顯著增加小鼠小腸推進率(P<0.05或P<0.01)。
表3 老姜茶顆粒對正常小鼠小腸運動的影響(,n=12)
表3 老姜茶顆粒對正常小鼠小腸運動的影響(,n=12)
注:與空白組比較,*P<0.05,**P<0.01
組別 給藥劑量(g/kg) 小腸推進率(%)空白組西沙必利組老姜茶顆粒高劑量組老姜茶顆粒中劑量組老姜茶顆粒低劑量組-0.05 48.00 24.00 12.00 49.61±9.13 59.68±7.84*63.42±12.32*66.50±6.94**65.16±8.65**
空調病以中醫病機學的角度來看是外邪入侵肺衛的表證,如果治療不及時、不徹底,外邪可循經絡內傳入里,犯入臟腑,則病情加重。一般治療原則是辛散解表,使邪氣從表而散。還可根據患者的癥狀,選擇適合的方劑配伍。中醫認為空調病是“寒冷外束肌表,濕熱內蘊脾胃之征”。老姜茶顆粒以中醫理論為指導,采用“疏散外寒,清化內濕”之法,以辛溫解表的生姜為君,輔以清熱解毒之金銀花、菊花,以及化痰止咳的羅漢果,具有散寒發汗、和胃止嘔的功效,為治療空調病鼻塞頭昏、嘔吐泄瀉之佳品。
本實驗以發汗、鎮痛、腸推進為指標,評價老姜茶顆粒防治空調病藥效。結果顯示,老姜茶顆粒高劑量可顯著增加小鼠足跖部汗腺汗液分泌量和抑制醋酸所致小鼠15 min內扭體次數,高、中、低各劑量均可促進小鼠小腸的運動。本實驗為空調病的藥效評價提供了參考,同時為老姜茶顆粒防治空調病提供了藥效學依據。
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Pharmacodynam ic study on sudation and analgesia effects of Laojiangcha Granules in treatment of air-sickness
ZHANG Lingling1 LIAO Huili1 LIU Mingping1 HUANG Haiyang1 ZHANGWeihua1 CHEN Sitai2 SHAN Li′nan1 LIGeng1
1.Guangzhou University of Chinese Medicine,Guangdong Province,Guangzhou 510006,China;2.Chaozhou Phoenix Mountain Health Care Product CO.,LTD,Guangdong Province,Chaozhou 521000,China
Objective To study the the effectof promoting sudation,analgesia and intestine propulsion for Laojiangcha Granules,and to discuss the pharmacologicalmechanisms of air-sickness prevention.MethodsThe colouration was used to observe the secretion of sweaton normalmice and verify the sudation;themethod ofwrithing by acetic acid wasmade to study the analgesic effect,through observingwrithing latency and the times ofwrithing response in 15minutes;charcoal driving in small intestinewasused to observe the role on the small intestinalmotion promoting action in normalmice.ResultsThe high dose of Laojiangcha Granules significantly increased sweat point density on the heel and sole ofmice (P<0.05);and decreased the times of twisting body caused by acetic acid inmice(P<0.05);the high,medium and low dose groups all could markedly promote intestinalmotion (P<0.05,P<0.01).ConclusionLaojiangcha Granules have a role of diaphoresis,promoting intestinalmotion and analgesic,according to the therapeutic principlesof TCM in air-sickness prevention.
Laojiangcha Granules;Promoting sudation;Analgesic action;Intestine propulsion;Air-sickness
R161
A
1673-7210(2012)12(a)-0022-03
廣東省產學研項目(項目編號:20110908);廣東省科技計劃項目(項目編號:2009B020419004)。
張玲玲(1985-),女,廣州中醫藥大學2010級在讀碩士研究生;研究方向:中藥藥理。
李耿(1983-),男,博士研究生,講師;研究方向:中藥新藥開發。
2012-09-26 本文編輯:衛 軻)