中性粒細胞VCS參數在細菌感染性疾病早期診斷及療效中的應用價值

張家明，黃 勝，盧 粵，陳意穩，楊 蕾

(廣東醫學院附屬湛江中心醫院檢驗科，廣東 湛江 524037)

急性細菌感染是引起白細胞總數及中性粒細胞增高的最常見病因，但如感染程度很局限且輕微，WBC總數仍可正常，只見中性粒細胞百分率增高，隨著感染逐漸加重，WBC總數不斷增高，嚴重時可高達20×109/L以上，中性粒細胞百分率也明顯增高，并伴有明顯的核象左移，出現中毒顆粒、空泡、大小不均等病理性改變[1]。Beckman Coulter LH 750全自動血液分析儀采用VCS技術，可分析NE體積大小、細胞漿和細胞核的比例、細胞漿內顆粒的大小及密度。我們檢測了細菌感染性疾病患者體積(V)、電導率(C)及激光散射值(S)等參數及中性粒細胞百分率和WBC總數的變化規律，旨為臨床診斷及有效治療細菌感染提實驗室依據。

1 材料與方法

1.1 研究對象 急性細菌性感染組：2010年10月至2011年9月在本院收治的根據臨床表現、血常規檢查、細菌培養結果及其他輔助檢查確診為細菌性感染患者108例，其中男67例，女41例，年齡16～85歲。96例健康對照組為本院臨床體檢正常的健康人員，男59例，女37例，年齡18～76歲。兩組人員在年齡、性別等比較，差別無統計學意義(P＞0.05)。

1.2 實驗方法 使用美國 Beckman Coulter公司生產的LH 750型全自動血液分析儀及配套試劑。操作方法：在空腹條件下，取健康組與感染組受試者靜脈血，共2ml，于乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝真空采血管內搖勻，在采集后2h內完成測定。對照組患者治療前空腹抽血1次，開始治療后，每隔1d空腹抽血1次進行連續觀察，直至WBC恢復正常后停止觀察。每個樣本檢測后均收集WBC總數、NE絕對值及NE的V、C、S值。每d測試前均做本底及質控，檢測指標在控后再進行標本測試。

1.3 統計學處理 采用SPSS 13.0統計軟件包進行分析，先對數據進行正態性分析，如數據符合正態性分布，數據以±s表示，兩組間均數比較采用t檢驗，多組間均數比較采用單因素方差分析。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 細菌感染組與健康對照組NE的VCS結果比較

與健康對照組比較，細菌感染患者的WBC總數、NEV、NDW 顯著增高 (P＜0.01)；NES 顯著降低(P＜0.01)；NEC有所下降，但差別無統計學意義(P＞0.05)。 詳見表1。

表1 感染組與對照組NE的VCS參數比較(±s)

表1 感染組與對照組NE的VCS參數比較(±s)

與對照組比較，*P＜0.01。

組別 n WBC NEV NEC NES NDW對照組感染組96 108 6.0±1.8 11.8±5.6*140.2±5.0 149.9±13.6*148.8±1.4 147.6±1.2 146.6±3.8 141.4±3.5*19.5±1.7 24.6±4.3*

2.2 WBC總數與NE的VCS參數結果關系分析

將108例細菌感染患者根據白細胞總數分為3 組，A 組：WBC(4～9.9)×109/L，B 組：WBC(10～15)×109/L，C 組：WBC>15×109/L； 在 A、B、C 3 組中，NEV、NDW值均明顯高于健康對照組 (P＜0.05，P＜0.01)，且NEV、NDW值隨著WBC總數的升高而上升；NES 值則比對照組明顯下降 (P＜0.05，P＜0.01)，并隨著WBC總數的升高而下降.詳見表2。

表2 三組細菌性感染患者WBC、NE的VCS與對照組的比較(±s)

表2 三組細菌性感染患者WBC、NE的VCS與對照組的比較(±s)

與對照組比較，#P＜0.05，##P＜0.01。

組別 n WBC NEV NEC NES NDW對照組A組B組C組96 33 52 23 6.0±1.8 6.9±2.4 12.5±2.1##21.4±5.8##140.2±5.0 142.9±5.5#150.7±5.9##160.2±6.1##148.8±1.4 147.2±3.0 148.0±2.6 147.7±2.3 146.6±3.8 144.7±3.5#138.9±3.4##132.4±3.9##19.5±1.7 22.6±3.3##24.4±4.4##27.5±3.6##

2.3 中性粒細胞的百分比與VCS參數結果關系分析。

以中性粒細胞百分率80%為臨界值將108例細菌感染患者分為NE≤80%組和NE＞80%組。NE≤80%組的NEV、NDW結果明顯高于對照組(P＜0.01)， 但明顯低于 NE＞80%組；NE≤80%組的NES則明顯低于對照組(P＜0.01)，但明顯高于NE＞80%組。詳見表3。

2.4 細菌感染組患者治療前、后NE的VCS參數變化

75例細菌感染患者經抗感染治療后，WBC總數及NEV、NDW明顯下降，NES明顯上升，與治療前比較差異有統計學意義(P＜0.01)；與對照組比較差異無統計學意義(P＞0.05)，見表4。

表3 兩組細菌感染組患者WBC、NE的VCS與對照組的比較(±s)

表3 兩組細菌感染組患者WBC、NE的VCS與對照組的比較(±s)

與對照組比較，▲P＜0.01。

組別 n WBC NEV NEC NES NDW對照組NE≤80%組NE＞80%組96 57 51 6.0±1.8 9.2±5.3▲15.8±4.5▲140.2±5.0 145.6±10.9▲155.0±13.6▲148.8±1.4 148.2±1.3 148.0±1.4 146.6±3.8 139.4±6.6▲133.1±6.2▲19.5±1.7 21.7±2.6▲25.9±5.5▲

表4 細菌感染組患者治療前、后NE的VCS參數比較(±s)

表4 細菌感染組患者治療前、后NE的VCS參數比較(±s)

*與治療前比較P<0.01，與對照組比較>0.05；**與對照組及治療前分別比較均P>0.05

組別 n WBC NEV NEC NES NDW對照組治療前治療后96 69 69 6.0±1.8 17.8±7.4 7.3±2.2*140.2±5.0 157.6±6.1 141.1±6.3*148.8±1.4 147.9±2.5**148.6±2.0**146.6±3.8 132.5±5.8 146.1±4.3*19.5±1.7 27.1±5.4 19.7±2.0*

3 討論

機體在細菌感染后,常引起反應性的WBC總數和NE增多,同時伴隨的NE核左移和中毒性改變也與疾病的療效和預后有關[1]。長期以來，血常規中的WBC和NE作為臨床判斷血液細菌感染的主要指標，但有些細菌感染患者WBC和NE并不高，以此為依據診斷可能會貽誤治療時機。目前診斷血液細菌感染的“金標準”是細菌培養，但存在耗時長、容易污染、敏感性低等缺點[2]。可見，為臨床提供客觀、快速、準確的實驗檢測指標對細菌感染性疾病患者的診斷和對癥治療尤其重要。

Backman Coulter LH 750型全自動血液分析儀采用VCS技術對WBC進行五項分類，其通過低頻電流準確分析白細胞大小(V)，高頻電流傳導分析細胞核及核質比的特性(C)，激光散射分析細胞漿內顆粒的大小和密度(S)，提供關于細胞顆粒性的信息,能很好地區分顆粒特性不同的白細胞[2-4]。急性細菌感染時，骨髓在炎癥因子刺激下不成熟粒細胞釋放增加,同時外周血邊緣池中NE在炎癥介質作用下活化，外周血中出現體積及形態不同的不成熟粒細胞、活化粒細胞和成熟粒細胞，導致細胞異質性增大、NE的體積明顯增大,細胞的漿核比和光射量明顯減小，細胞漿內復雜性增強,NE的體積、漿核比的分布寬度明顯增大。本資料觀察了108例血液細菌感染患者的VCS參數，結果顯示NEV和NDW明顯增高，NES明顯下降，與對照組比較差異均有統計學意義(P＜0.01)，與國內相關報道結果基本一致[5，6]，提示NE的VCS參數能預示感染。為了區分不同感染程度患者的VCS參數變化，本文對細菌感染患者WBC總數及NE的VCS相關參數進行統計分析發現，感染較輕的WBC＜10×109/L組和NE＜80%組患者的NEV及NDW比對照組明顯增高(P＜0.05，P＜0.01)，且隨著感染程度的加重增高更加顯著。表明NEV、NDW在指示細菌感染方面比WBC和NE百分率更為敏感，這一點對早期診斷細菌感染有重要臨床價值。NES主要反映NE漿內顆粒的大小與密度，雖然NES在感染組和對照組有差異，但NES并不是一個靈敏的指標。我們觀察到NES在NE出現中毒性顆粒時可增高，但核左移明顯時又可降低，由于有個體差異，機體對細菌感染的反應及表現往往不同，只有在骨髓被刺激釋放大量幼稚粒細胞、外周血出現嚴重左移時NES才明顯降低。NEC在各組中變化不明顯，可能與NEC隨細胞形態變化改變不明顯有關。

中性粒細胞在血液的免疫系統中起著十分重要的作用。目前，中性粒細胞及其VCS參數已經在正常人群中的調查與分析[7，8]、細菌感染診斷[9]及白血病診斷等領域進行了研究及應用，但在臨床療效中的應用報道相對較少，為了進一步了解感染患者的VCS參數變化，我們監測了69例各類細菌感染患者治療前后的WBC總數和NE的VCS參數結果變化，經比較分析發現，治療后隨著感染的好轉，NEV、NDW明顯下降，NES明顯上升，與治療前比較，差異均有統計學意義(P＜0.01)，與對照組比較差異均無統計學意義。可見NE的VCS參數在細菌性感染患者的療效觀察中也有一定參考價值。

綜上所述，中性粒細胞的VCS定量數據來源于血常規分析，具有客觀、精確、廉價、操作簡單等優點，具有良好的臨床應用前景。細菌感染可使外周血WBC(包括未升高時)的中性粒細胞VCS參數發生明顯改變，且VCS參數又能及時敏感地反映細菌感染及治療前后血液中白細胞形態學改變。由此可見，監測中性粒細胞VCS參數變化在細菌感染性疾病的早期診斷及療效觀察中有重要臨床價值。

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