三種方法聯(lián)合檢測尿液有形成分的比較和評價

王蕾

(肥城礦業(yè)中心醫(yī)院檢驗科，山東 肥城 271608)

目前應(yīng)用于臨床的尿液檢測方法主要有尿沉渣鏡檢、干化學(xué)法和尿沉渣分析儀三種方法。尿液干化學(xué)分析儀由于檢測速度較快、使用方便，可以對尿液標(biāo)本進行篩選，提高了臨床檢驗工作的效率，但可導(dǎo)致假陽性和假陰性結(jié)果。尿沉渣分析儀具有操作簡單、靈敏度高、重復(fù)性好、標(biāo)本不需離心等優(yōu)點，可對鏡檢報告中的紅細(xì)胞、白細(xì)胞、管型等進行計數(shù)，定量報告，有助于血尿、尿路感染病人的療效監(jiān)控[1-3]，適用于大批量標(biāo)本檢測，尿液干化學(xué)分析儀與尿沉渣分析儀流水線已廣泛應(yīng)用于實驗室。但傳統(tǒng)的尿沉渣鏡檢仍然是檢測尿中有形成分的金標(biāo)準(zhǔn)，然而該方法精密度較差，勞動強度大，在大中型醫(yī)院難以對每個尿液標(biāo)本進行鏡檢。為了探討三種方法聯(lián)合檢測尿液有形成分的應(yīng)用價值和影響因素，我們對640份我院住院及門診病人的尿液標(biāo)本，同時用三種方法聯(lián)合檢測，并對檢測結(jié)果進行比較和評價，現(xiàn)報告如下。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑 UF-50尿沉渣分析儀 (日本Sysmex公司生產(chǎn))與配套試劑、液體質(zhì)控(批號S0006)；迪瑞H-500尿干化學(xué)分析儀及配套11項試紙、液體質(zhì)控品(批號20100817)；人工顯微鏡、離心機。

1.2 標(biāo)本 隨機收集我院2011年3月門診及住院患者尿液標(biāo)本640份，患者年齡4～81歲，男性標(biāo)本396例，女性標(biāo)本244例。

1.3 實驗方法

1.3.1 標(biāo)本采集方法 用潔凈一次性尿杯囑患者留取中段尿約30ml，混勻后分裝三個試管，每管10ml，其中一管按儀器操作程序在UF-50上機測定，一管進行尿干化學(xué)測定，另一管離心后進行尿沉渣鏡檢，接收標(biāo)本后2h內(nèi)完成所有檢測。

1.3.2 UF-50及H-500檢測 對UF-50及H-500進行校準(zhǔn)，每天檢測前用質(zhì)控品做室內(nèi)質(zhì)控且結(jié)果在控，UF-50及H-500均按儀器說明嚴(yán)格操作。

1.3.3 顯微鏡檢測 取刻度離心管，倒入混合均勻的新鮮尿液 10ml，用 1500r/min轉(zhuǎn)速，離心 5min，棄去上清液，留下0.2ml沉渣，輕搖離心管，使尿沉渣有形成份充分混勻。取尿沉渣0.02ml，滴在載玻片上，用18mm×18mm蓋玻片覆蓋。首先用低倍鏡觀察尿沉渣分布情況后，再轉(zhuǎn)高倍鏡計數(shù)10個視野所見細(xì)胞數(shù)目[4]。

1.4 結(jié)果判斷 三種方法都按各自的說明書或SOP文件進行操作，尿沉渣鏡檢結(jié)果參考值范圍[4-5]：WBC：0～5 個/HP，RBC：0～3 個/HP，CAST：＜0/LP，超出參考值上限為陽性；UF-50尿沉渣結(jié)果判定：RBC：男性為 0～10/μl，女性為 0～20/μl；白細(xì)胞：男性為 0～12/μl，女性為 0～22/μl，CAST：男性為0～0.9 個/μl；女性 0～0.7/μl，檢查結(jié)果以超出參考值上限為陽性。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法 數(shù)據(jù)資料利用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件進行處理，三種方法間結(jié)果的比較用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

640 例尿標(biāo)本三種方法檢測WBC、RBC陽性率結(jié)果見表1。以尿沉渣鏡檢結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn)，干化學(xué)與尿沉渣鏡檢之間RBC和WBC結(jié)果比較見表2。UF-50尿液WBC、RBC、CAST結(jié)果與尿沉渣鏡檢結(jié)果比較見表3。干化學(xué)法、UF-50檢測尿液WBC、RBC的陽性率與尿沉渣鏡檢陽性率比較，結(jié)果差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。UF-50檢測結(jié)果陽性率分別與尿沉渣鏡檢結(jié)果比較，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。以干化學(xué)檢測結(jié)果中白細(xì)胞、紅細(xì)胞、蛋白及亞硝酸鹽四項全陰性為過篩標(biāo)準(zhǔn)[5]，對640例尿標(biāo)本進行篩選，符合此標(biāo)準(zhǔn)的標(biāo)本共316份，其中UF-50分析WBC陽性25份 (陽性率7.91%)，RBC 陽性 24 例(陽性率 7.59%)；尿沉渣鏡檢WBC陽性21例(陽性率6.65%)，RBC陽性9例(陽性率 2.85%)。

表2 干化學(xué)法與尿沉渣鏡檢法WBC和RBC結(jié)果比較

表3 UF－50與尿沉渣鏡檢法WBC、RBC和CAST結(jié)果比較

3 討論

UF-50采用流式熒光技術(shù),具有檢測速度快、重復(fù)性好等優(yōu)點，但在臨床使用中仍然會出現(xiàn)檢測結(jié)果與尿沉渣鏡檢以及干化學(xué)不一致的情況[6-7]。干化學(xué)法是自動判定尿液中不同成分的定性或半定量結(jié)果的一種檢測方法，具有快速、簡便、準(zhǔn)確的優(yōu)點，但此法在測定尿液過程中，易受溫度、酸堿度、藥物、理化等外界因素的干擾，出現(xiàn)假陽性和假陰性，有一定局限性[8-10]。尿沉渣鏡檢雖操作繁瑣，但標(biāo)準(zhǔn)化的尿沉渣鏡檢仍是尿沉渣分析的金標(biāo)準(zhǔn)，是尿液分析中不可缺少的檢查手段，具有重要的臨床價值[8]。640例尿液標(biāo)本中，WBC陽性率以UF-50最高 (24.38%)，干化學(xué)法最低(15.31%)；干化學(xué)檢測WBC的敏感性較低，有39.55%的假陰性，這是由于干化學(xué)試紙只能檢測胞漿中含有白細(xì)胞酯酶的粒細(xì)胞，而不能測定部分缺乏酯酶的中性粒細(xì)胞、全部的淋巴細(xì)胞及大部分單核細(xì)胞。另外尿液中如含有大量先鋒霉素IV、慶大霉素或尿蛋白＞5g/L時，可導(dǎo)致結(jié)果偏低或假陰性[5,11]。因此，對于某些以尿中出現(xiàn)淋巴細(xì)胞為主的疾病(如腎結(jié)核、器官移植后等)，如果單純進行尿液干化學(xué)檢測，就會出現(xiàn)漏診[12]。UF-50和尿沉渣鏡檢法檢測的是全部WBC，故其陽性率高

表1640例尿標(biāo)本三種方式檢測RBC和WBC陽性率項目例數(shù)常規(guī)鏡檢法干化學(xué)法UF-50法陽性陽性率陽性陽性率陽性陽性率WBC RBC 640 640 134 123 20.94 19.22 98 217 15.31 33.90 156 188 24.38 29.38于干化學(xué)法。干化學(xué)法過篩四項全陰的316份尿液標(biāo)本中，UF-50檢測WBC陽性的27例，尿沉渣鏡檢WBC陽性的21例，UF-50 WBC陽性符合率為91.04%，假陽性為8.96%。檢測發(fā)現(xiàn)尿中鹽類結(jié)晶的析出、裸核、上皮細(xì)胞、精子、滴蟲等均可導(dǎo)致UF-50檢測WBC出現(xiàn)假陽性。三種方法聯(lián)合檢測尿液，UF-50可以防止干化學(xué)法檢測WBC的假陰性產(chǎn)生，尿沉渣鏡檢可排除UF-50的假陽性及假陰性產(chǎn)生。

640例尿液標(biāo)本中，RBC以干化學(xué)法陽性率最高(33.90%)，尿沉渣鏡檢法最低(19.22%)。干化學(xué)法檢測尿中RBC是利用氧化酶法測定尿中的血紅蛋白，RBC破碎后仍能測出，且靈敏度較高。但該法易受尿中氧化型或還原型物質(zhì)(如維生素C)的影響導(dǎo)致假陽性或假陰性。表2中，干化學(xué)法測RBC假陽性19.92%，其中部分是紅細(xì)胞完全破碎后尿沉渣鏡檢的假陰性標(biāo)本。UF-50與尿沉渣鏡檢法相比有15.47%的假陽性，這80例假陽性標(biāo)本，通過鏡檢發(fā)現(xiàn)有28份尿液有大量草酸鈣結(jié)晶，有12份尿液含有大量細(xì)菌，33份標(biāo)本中含有類酵母菌，占假陽性標(biāo)本的91.25%。UF-50產(chǎn)生假陽性的原因可能是上述標(biāo)本中含有的這些顆粒與紅細(xì)胞形態(tài)相似，其染色的敏感性及散射光強度與紅細(xì)胞類似，在散點圖中與RBC交叉分布，干擾UF-50紅細(xì)胞計數(shù)而將其誤認(rèn)為紅細(xì)胞[7]。三種方法聯(lián)合檢測尿液標(biāo)本時，干化學(xué)法可以彌補尿沉渣鏡檢法和UF-50檢測不到的破碎紅細(xì)胞的不足，尿沉渣鏡檢法可以排除UF-50對尿中結(jié)晶、類酵母菌等引起的假陽性干擾，UF-50還可以通過檢測尿液中的RBC的變異性和均一性來鑒別血尿來源，有助于臨床了解泌尿系統(tǒng)出血部位[1，2，5]。

尿液中有形成分復(fù)雜，形態(tài)變化較大，管型與上皮細(xì)胞及黏液絲的形態(tài)大小，染色性有許多相似之處，當(dāng)尿標(biāo)本中含有大量上皮細(xì)胞，又同時含有非晶型鹽類、細(xì)菌等微粒附著時，儀器會將這些物質(zhì)判定為管型的內(nèi)容物而出現(xiàn)假陽性，從而造成相對較高的病理管型，出現(xiàn)假陽性結(jié)果。在實際工作中，當(dāng)UF-50尿沉渣分析儀檢出管型，尤其提示病理管型時，應(yīng)與干化學(xué)結(jié)果進行綜合分析并做尿沉渣鏡檢進行復(fù)核，減少儀器檢查帶來的誤差。

綜上所述，尿液干化學(xué)法和尿沉渣分析儀檢測只能作為尿液有形成分檢測的過篩試驗，對于干化學(xué)和UF-50兩者結(jié)果不符合及一些特殊標(biāo)本務(wù)必進行尿沉渣鏡檢復(fù)查，以保證檢驗結(jié)果的可靠性[13-14]。在尿干化學(xué)、尿沉渣分析儀法結(jié)果均為陰性時，方可免去尿沉渣鏡檢[15]。建議各實驗室根據(jù)自己的尿液分析系統(tǒng)建立室內(nèi)質(zhì)控程序和適合本檢測系統(tǒng)的尿沉渣復(fù)檢規(guī)則，只有將三種方法有機結(jié)合，互為補充，才能提高檢驗質(zhì)量，保證檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。

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