氨基比林原料藥含量測定方法的研究

溫敏 劉景彬 劉永臣

氨基比林原料藥含量測定方法的研究

溫敏 劉景彬 劉永臣

氨基比林屬吡唑酮類解熱鎮(zhèn)痛藥，其通過選擇性的抑制下丘腦前部前列腺合成酶，減少前列腺素的生物合成，使體溫恢復(fù)正常，而實現(xiàn)療效。目前現(xiàn)行法定標準是用容量分析法來測定氨基比林的含量，但該法終點無明顯突躍，難以準確判斷。本實驗通過紫外分光光度法直接測定氨基比林原料藥中氨基比林的含量，其操作簡便、快速、可行，通過對兩種方法的簡單比較說明紫外分光光度法測得的結(jié)果準確度較高。

氨基比林;含量測定;紫外分光光度法;容量分析方法

1 氨基比林簡介

通用名稱：氨基比林(又名匹拉米洞，氨基吡啉)化學(xué)結(jié)構(gòu)：

化學(xué)名稱：

1-苯基-2，3-二甲基-4-二甲胺基-5-吡唑酮

氨基比林屬吡唑酮衍生物，其最初是人們在合成抗瘧藥奎寧基本母核時意外得到的，然后再對它進行結(jié)構(gòu)改造，于1884年合成了安替比林，用于臨床，但毒性較大，受嗎啡結(jié)構(gòu)改造中有甲氨基的啟發(fā)，在安替比林結(jié)構(gòu)中4位上引入二甲氨基既為氨基比林，其解熱、鎮(zhèn)痛作用持久，且對胃無刺激性，曾應(yīng)用廣泛，但由于能引起白細胞減少及粒細胞缺乏癥等副作用，現(xiàn)在主要用其復(fù)方制劑如復(fù)方氨基比林(即安痛定)。目前為降低其毒性進一步改造將氨基比林的4-位氨基氮上的兩個氫分別用甲基和次甲基磺酸鈉取代，得到安乃近，其解熱鎮(zhèn)痛作用迅速而強大，尤其對頑固性發(fā)熱有效，毒性降低，水溶性增大可供注射，但仍引起粒細胞缺乏癥，為了增強療效降低毒性還合成了許多吡唑酮衍生物，如尼芬那宗與氨基比林相比較，鎮(zhèn)痛效果好、作用持久，且毒性僅有氨基比林的八分之一。氨基比林為吡唑酮類解熱鎮(zhèn)痛藥，盡管其解熱鎮(zhèn)痛作用較強，緩慢而持久，消炎抗風(fēng)濕作用與阿司匹林相似，但因本品能引起骨髓抑制以及能形成亞硝胺致癌物質(zhì)，故單用制劑已淘汰，現(xiàn)臨床常用其復(fù)方制劑而且當(dāng)氨基比林劑量達到5 g時為人體致死劑量。其作用機制主要通過抑制下丘腦前列腺素的合成和釋放，恢復(fù)體溫調(diào)節(jié)中樞感受神經(jīng)元的反應(yīng)性而起退熱作用;通過抑制環(huán)氧化酶，選擇性抑制下丘腦體溫調(diào)節(jié)中樞前列腺素的合成，導(dǎo)致外周血管擴張、出汗而達到解熱的作用，其解熱作用強度與阿司匹林相似;通過抑制前列腺素等的合成和釋放，提高痛閾而起到鎮(zhèn)痛作用，屬于外周性鎮(zhèn)痛藥，作用較阿司匹林弱，僅對輕、中度疼痛有效［3］。此外，氨基比林還可抑制局部炎癥組織中的前列腺素等炎性介質(zhì)的合成和釋放，穩(wěn)定溶酶體膜，抑制吞噬細胞的吞噬作用而起到抗炎作用。臨床用藥劑型一般為片劑、注射劑，復(fù)方制劑。

2 儀器、試藥及試劑

2.1 儀器

酸式滴定管、Agilent UV紫外-可見分光光度計、移液管、量筒、AL104型電子分析天平、錐形瓶、容量瓶(100 ml、250 ml)、膠頭滴管、玻璃棒。

2.2 試藥

氨基比林標準品(中國藥品生物制品檢定所)批號：100503-200301、氨基比林原料藥(山東新華制藥有限公司)批號：0806484、0806485、0806486。

2.3 試劑

鹽酸(天津市化學(xué)試劑三廠)批號：090200、硫酸(天津市翔宇化工工貿(mào)有限責(zé)任公司)批號：071220、甲基橙-亞甲藍混合指示液。

3 含量測定

3.1 容量分析法［1］

3.1.1 對照液的制備 取水50 ml，加甲基橙-亞甲藍混合指示液0.15 ml與鹽酸溶液(0.5 mol/L)0.05 ml，搖勻即得。

3.1.2 樣品含量測定 取各批號的氨基比林原料藥約1.0000 g，精密稱定，加水40 ml，溫?zé)崛芙夂螅爬洌蛹谆?亞甲藍混合指示液0.15 ml，用0.5 mol/L鹽酸溶液滴定，至溶液的顏色與對照液一致(30秒不褪色為終點)，自消耗鹽酸溶液(0.5 mol/L)的體積中減去0.05 ml，即為樣品消耗鹽酸(0.5 mol/L)的體積。

注：每1 ml的鹽酸溶液(0.5 mol/L)相當(dāng)于115.6 mg的 C13H17N3O

3.1.3 試驗結(jié)果及數(shù)據(jù)處理 見表1。

表1 容量分析法測定的相關(guān)數(shù)據(jù)

計算公式：

注：滴定液F值為1.029。空白試驗消耗滴定液體積(V0)為0.05 ml

圖1 標準曲線繪制

3.2 紫外分光光度法

3.2.1供試品的制備 精密稱取氨基比林標準品0.1510 g，以20 mlH2SO4溶液(0.005 mol/L)微熱溶解后移至100 ml量瓶中，加蒸餾水至刻度搖勻做為備用液。

3.2.2 測定波長的選擇 精密量取備用液1 ml至100 ml量瓶中，用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻，即得濃度約為15 μg/ml氨基比林溶液.用蒸餾水作參比在200～320 nm波長范圍內(nèi)掃描，結(jié)果表明，氨基比林在260 nm波長處有最大吸收。故選擇260 nm為其測定波長。

3.2.3 標準曲線的建立 精密吸取備用液各1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 m1分別置250 ml量瓶中，加蒸餾水至刻度，搖勻。在260 nm波長處測其吸收度，并得標準曲線(見圖1)。且經(jīng)計算R2=0.99994，符合線性要求。

3.2.4 樣品的制備及測定 精密稱取樣品約0.5000 g，置250 ml量瓶中，以 20 mlH2SO4溶液(O.005 mol/L)，微熱溶解，加蒸餾水至刻度，再精密量取2 ml置250 ml量瓶中，用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液.以蒸餾水為空白溶液，將適量的供試品置1 cm吸收池中在260 nm波長處測其吸收度即可。

3.2.5 試驗結(jié)果及數(shù)據(jù)處理 試驗結(jié)果及數(shù)據(jù)見表2。

表2 紫外分光光度法測定的相關(guān)數(shù)據(jù)

計算公式：

注：D值為250×250/2

3.2.6 紫外方法回收率實驗 精密稱定4.00 mg標準品置250 ml容量瓶中，以20 mlH2SO4溶液(0.005 mol/L)微熱溶解，加水稀釋至刻度，在260 nm波長下測得結(jié)果，數(shù)據(jù)如表3。

表3

實驗結(jié)果表明：紫外方法測得回收率結(jié)果較好。

3.2.7 紫外方法穩(wěn)定性實驗 取含量測定相下樣品溶液室溫放置 1 h、2 h、4 h、16 h、24 h 后，分別用紫外分光光度計在260 nm波長下測得數(shù)據(jù)結(jié)果見表4。

表4

實驗結(jié)果表明：24 h內(nèi)吸收度基本無變化，紫外方法測得樣品穩(wěn)定性良好。

3.2.8 紫外方法重復(fù)性實驗 精密稱取批號為0806485的氨基比林原料藥樣品0.5000 g，各平行稱取6份，置250 ml量瓶中，以20 mlH2SO4溶液(0.005 mol/L)，微熱溶解，加蒸餾水至刻度，再精密量取2 ml置250 ml量瓶中，作為供試品溶液.在260 nm波長處測其吸收度，測得數(shù)據(jù)如表5。

表5

實驗結(jié)果表明：紫外方法測得樣品重復(fù)性良好。

3.2.9 兩種方法的比較

表6

實驗結(jié)果表明：兩種方法比較有一定的相對偏差，但兩種方法的結(jié)果基本符合。

4 實驗討論

4.1 實驗證明氨基比林在6～30 mg/ml范圍內(nèi)吸收度均符合朗伯-比爾定律，線性、回收率、穩(wěn)定性、重復(fù)性均較穩(wěn)定。

4.2 現(xiàn)行法定標準是采用酸堿滴定法測定氨基比林含量，容量分析法測定時一般所用儀器廉價易得，操作簡便，快速，方法耐用性高，通常情況下其相對誤差在0.2%以下，但其專屬性較差，實驗的終點不易掌握，因為在用甲基橙-亞甲藍混合指示液指示終點時，若按理論上與對照品的顏色一致時實際經(jīng)驗得知滴定液已過量，且突躍不明顯，導(dǎo)致測定的氨基比林的含量準確度較差。

4.3 紫外分光光度法的測定結(jié)果與地方標準的測定結(jié)果基本一致或更好。且紫外分光光度法操作簡便、快速、準確，說明紫外分光光度法測定氨基比林是一種簡便可行的方法。另外，標準對照液和樣品液一次性配制，測定結(jié)果數(shù)據(jù)同時測出省時、省力、省藥品。標準數(shù)據(jù)可用計算機長期保存，在實驗條件相同時，尤其適合多種批號的樣品測定，對生產(chǎn)中藥品的質(zhì)量控制有一定的應(yīng)用價值。

［1］《中國藥典》2010.

［2］劉文英.《藥物分析》第六版.北京人民衛(wèi)生出版社，2008，4：87-88.

［3］王瑋瑛.《藥物化學(xué)》北京人民衛(wèi)生出版社，2003，3：73-74.

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Amidopyrine drug study on the determination of the capacity

WENG Min，LIU Jing-bin，LIU Yong-cheng.

The Fourth Hospital affiliated with Medical College of Inner Mongolia，Hohht 010059，China

Amidopyrine is the antipyretic analgesics of pyrazole ketones，which through selective inhibition of prostate anterior hypothalamus synthase to reduce the biosynthesis of prostaglandins.So the body temperature returned to normal and achieve the effect.At present，the existing legal standards of capacity analysis is used to determine the content of aminopyrine，but the end of the act no significant jump，it is difficult to determine accurately.This experiment with the use of Amidopyrine reductive to Fe3+reduced to Fe2+，and Fe2+can be with the o-phenanthroline to form a red complex，followed by direct determination Absorptiophotometry drug in its content of aminopyrine，and two ways to make a simple comparison.

Aminopyrine;Determining content;UV spectrophotometry;The capacity analysis method

014032 內(nèi)蒙古醫(yī)學(xué)院第四附屬醫(yī)院(一機醫(yī)院)(溫敏 劉景彬 劉永臣);河北鋼鐵集團礦業(yè)有限公司龍煙礦山分公司職工醫(yī)院(溫敏)

目前測定氨基比林的方法主要有化學(xué)發(fā)光法、滴定法、高效液相色譜法、薄層色譜法等［1，2，3］。檢驗依據(jù)衛(wèi)生部藥品標準《化學(xué)藥品及制劑》第一冊第123頁(1989年)其含量測定一般采用水溶液中和滴定法，因氨基比林屬弱堿性藥物(pH=9)，相對強酸強堿滴定來說反應(yīng)完成程度較低，滴定突躍不太明顯，往往存在較大的滴定誤差。經(jīng)過眾多學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，以及在雙波長法測定安痛定注射液中氨基比林的含量的兩種方法研究的基礎(chǔ)上，用紫外分光光度法對原料藥氨基比林含量的測定進行了研究，發(fā)現(xiàn)可用吸光光度法測定原料藥氨基比林的含量，此法只需測定一個最大吸收波長處的吸收度值即可，方法簡便，結(jié)果滿意［4，5，6，7］。所以本次實驗通過容量分析法和紫外分光光度法兩種方法測定氨基比林的含量，并對兩種方法做一簡單比較。