黃龍通絡膠囊對大鼠心肌缺血再灌注心律失常的影響

趙 濤，盧 露，謝 偉，張曉紅

臨床上黃龍通絡膠囊主要用于治療中風病中經絡病癥，具有療效顯著、毒性低、副反應小等特點。但在長期臨床應用中發現，其對中風伴有心律失常患者有著獨特的療效，這方面具體的作用機制研究甚少。因此，本試驗以期通過建立心肌缺血再灌注心律失常模型，探討其作用于心律失常的機制。

1 材料與方法

1.1 藥物與試劑 黃龍通絡膠囊，由山東步長制藥有限公司出品；鹽酸普羅帕酮片，每片50mg，由上海三維制藥有限公司提供；烏拉坦，國藥集團化學試劑有限公司提供。

1.2 儀器 BL-420E+生物機能實驗系統；HX-300動物呼吸機，成都泰盟儀器廠。

1.3 實驗動物 SPF級大鼠80只，180g～220g，雌雄各半。

1.4 實驗方法

1.4.1 分組及給藥 將大鼠分為假手術組、模型組、普羅帕酮組、黃龍通絡膠囊高劑量組（高劑量組）、黃龍通絡膠囊中劑量組（中劑量組）、黃龍通絡膠囊低劑量組（低劑量組），除假手術組10只外，其余各組分別為12只。按15mL／kg的體積，灌胃給予黃龍通絡膠囊高劑量（10.0g／kg）、中劑量（5.0g／kg）、低劑量（2.5g／kg），每天1次，連續15d。陽性藥（27mg／kg）從第13天開始灌胃給藥，每天1次，連續3d。

1.4.2 造模方法［1］末次給藥1h后，經腹腔注射20%的烏拉坦（1.2g／kg）麻醉大鼠，行氣管插管，連接 HX-300動物呼吸機，記錄Ⅱ導聯心電圖和心率。在心尖搏動最明顯處，剪開皮膚，用止血鉗鈍性分開肋間肌，打開胸壁，用止血鉗撐斷第五肋骨，即可看到跳動的心臟。用鑷子輕輕撕開心包膜，擠出心臟，迅速在左心耳下緣1mm處用醫用帶線彎針穿過心肌淺表，穩定5min后，在兩條線之間穿過一直徑為3mm×3mm的橡皮管，共同結扎于冠狀動脈左前降支，引起冠脈閉塞造成心肌缺血，30min后剪斷結扎線取出橡皮管，恢復冠脈再灌注15min。假手術組開胸穿線，不結扎。全實驗過程連續觀測Ⅱ導聯心電圖和心率變化。

1.4.3 取材及檢測指標 實驗結束后，取出每只大鼠的心臟，用冷生理鹽水沖洗血液，稱取0.5g心肌組織，加入5mL生理鹽水，制成10%的心肌組織勻漿液，按照ATP酶試劑盒說明書測定組織Na+、K+-ATP酶、Mg2+-ATP酶、Ca2+-ATP酶［2］。

1.5 統計學處理 用SPSS統計軟件中Independent T檢驗進行統計分析實驗結果。

2 結 果

2.1 對缺血再灌注心律失常大鼠模型心電圖的影響 與假手術組相比，模型組在缺血及再灌注的狀態下，其P-R間期和QRS時限明顯縮短，ST段顯著抬高（P＜0．01或P＜0.001），提示造模成功。與模型組相比，高、中劑量及陽性藥有明顯穩定P-R間期和QRS時限、降低ST段的作用，尤其在缺血再灌注后作用更顯著。低劑量組雖有此趨勢，但無統計學意義（P＞0.05）。詳見表1、表2。

表1 黃龍通絡膠囊對結扎后缺血大鼠心電圖的影響（x±s）

表2 黃龍通絡膠囊對缺血再灌注大鼠心電圖的影響（x±s）

2．2 對心律失常大鼠模型ATP酶的影響 模型組的ATP酶明顯降低（P＜0．01或P＜0.001）。而中藥各劑量組及陽性藥組ATP酶顯著升高（P＜0．001），各劑量組之間無統計學意義（P＞0.05）。詳見表3。

表3 黃龍通絡膠囊對模型大鼠ATP酶的影響（x±s）

3 討 論

黃龍通絡膠囊由黃芪、雞血藤、當歸、川芎等十二味藥材精制而成，具有益氣養血、祛風痰活血絡功效。本實驗采用結扎大鼠冠狀動脈前降支引起心肌缺血再灌注所致心律失常模型，進一步探討黃龍通絡膠囊的抗心律失常作用機制。

有研究提示［3］，心肌細胞的活動幾乎全依賴于有氧代謝，即主要由ATP供細胞生存及做功所需能量，而ATPase的活性在維持心肌細胞，及鈉、鈣、鎂的穩定狀態中也起著重要的作用。心肌缺血缺氧時，線粒體中鈉、鈣、鎂的含量出現不同程度的改變。Mg2+含量的減少以及Na+、Ca2+含量增多均可引起能量代謝障礙，從而使Ca2+-Mg2+-ATPase活性下降；心肌細胞膜Ca2+-Mg2+-ATPase是將鈣離子主動泵出細胞外的主要途徑，其活力下降將會導致細胞內出現高鈣。同時，由于膜Na+-K+-ATPase活力下降可致胞內高Na+，從而增加Na+-Ca2+交換使胞內鈣濃度再次升高。另外，心肌缺血后一旦再灌注，開始時由于兒茶酚胺活性增加，Ca2+內流進一步增加，心肌細胞內鈣超負荷觸發了心律失常。由此可見，當缺血缺氧-再灌注心律失常時，心肌細胞內能量代謝障礙，主要表現為胞內和線粒體內Ca2+大量堆積、線粒體膜ATPase活性顯著降低。

本實驗通過結扎大鼠冠狀動脈前降支，引起心肌缺血再灌注所致心律失常模型，經統計分析證實該模型科學、穩定可靠。通過本試驗研究結果發現，該膠囊劑能明顯穩定P-R和QRS間期，降低抬高的ST段，說明該膠囊劑有降低心肌損傷程度的作用；同時該膠囊劑還能顯著提高線粒體膜Na+-K+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPase的活性。據推測黃龍通絡膠囊可能就是通過提高ATPase的活性，而穩定缺血損傷心肌細胞膜，減輕線粒體內Ca2+堆積，改善心肌缺血程度等作用，以發揮其抗心律失常的顯著作用。

［1］ 陳奇.中藥藥理研究方法學［M］.北京：人民衛生出版社，2000：885.

［2］ 殷惠軍，羅蘭，蔣躍絨，等.地精子皂甙抗缺血再灌性心律失常的作用機制研究［J］.中西醫結合心腦血管病雜志，2005，3（1）：39-41.

［3］ 秦緒光，趙煥宗，王大通，等.缺血再灌注性心律失常電生理機制及硫氮唑酮對其作用機理的研究［J］.中國醫藥導刊，2003，1（5）：54-57.