杜鵑素對大鼠離體主動脈的舒張作用及機制1）

秦小江，侯曉敏，李青山

杜鵑素（DJS）又名法爾杜鵑素，是一種特殊結構的二氫黃酮類物質，天然存在于杜鵑花科植物興安杜鵑（Rhododendron dauricum L）的葉等植物，其主要用于治療慢性支氣管炎［1］。杜鵑素可以明顯地舒張支氣管平滑肌，而支氣管平滑肌與血管平滑肌的收縮及舒張機制有很多共同的特點，推測杜鵑素具有舒張血管的作用，但其是否也可以舒張血管平滑肌和舒張血管的確切機制目前仍不清楚。因此，本實驗采用大鼠離體主動脈環張力測定法，觀察杜鵑素對血管的直接作用，并初步探討其機制。

1 材料與方法

1.1 藥品與試劑 杜鵑素，為山西醫科大學藥學院藥物化學合成實驗室合成（純度≥99%）。乙酰膽堿（Ach）、L-N-硝基精氨酸甲酯（NG-nitro-L-arginine-methyl ester，L-NAME）均購自美國Sigma公司。其余試劑均為國產分析純。

1.2 動物 雄性SD大鼠，體重200g～250g，由山西醫科大學實驗動物中心提供。

1.3 儀器 Powerlab生物信號采集分析系統和張力換能器為澳大利亞埃德儀器國際貿易有限公司產品。血管平滑肌浴管實驗系統為自制。HSS-1B數字式超級恒溫水浴泵為成都儀器廠產品。

1.4 大鼠主動脈環的制備與基本實驗程序 將大鼠斷頭后，立即開胸取出主動脈，置于4℃的PSS液中，PSS液具體成分：KCl 5.8mmol／L，NaCl 144mmol／L，MgCl24.2mmol／L，CaCl22.5mmol／L，HEPES 5mmol／L，Glucose 11.1mmol／L。血管環的制備、張力的記錄及血管反應性的檢測方法同文獻［2］。

1.5 DJS對大鼠離體主動脈血管環張力的影響 DJS在KCI預收縮離體大鼠離體主動脈環的作用：取內皮完整或去內皮血管環，加入6×10-2mol／L KCl，達到收縮平臺后，采用累積加藥法逐步加入 DJS（106mol／L，3×10-6mol／L，10-5mol／L，3×10-5mol／L，104mol／L），觀察血管張力的變化。

DJS在L-NAME孵育的大鼠了離體主動脈環中的作用：內皮完整的大鼠主動脈環用一氧化氮合酶阻斷劑L-NAME（10-4mol／L）孵育10min后，累積加藥法逐步加入DJS，觀察DJS引起的血管張力變化。

1.6 統計學處理 計量資料以均數±標準差（x±s）表示。應用SPSS17.0作統計分析，兩樣本進行t檢驗。

2 結 果

2.1 DJS對KCl預收縮大鼠離體主動脈環的影響 在內皮完整和去除內皮的大鼠離體主動脈環上，DJS可使大鼠離體主動脈環呈濃度依賴性舒張。DJS對內皮完整的主動脈環的舒張作用明顯強于其對去內皮的主動脈環的舒張作用，二者相比差異有統計學意義（P＜0.001）。詳見表1。

表1 DJS對KCl預收縮大鼠離體主動脈環舒張作用（x±s）

2.2 L-NAME對DJS舒張大鼠離體主動脈環作用的影響 將內皮完整的大鼠離體主動脈環用一氧化氮合酶阻斷劑LNAME（10-4mol／L）孵育10min后，DJS引起的血管舒張作用明顯減弱（P＜0．05或P＜0.001）。詳見表2。

表2 L-NAME預處理對DJS舒張大鼠離體主動脈環的影響（x±s）

3 討 論

DJS可以濃度依賴性地舒張KCL預收縮的大鼠離體的內皮完整和去內皮的血管環，說明DJS具有顯著的舒張血管作用，并且這種作用與血管內皮有關來發揮舒張血管的藥理作用。

在本實驗中，使用了內皮完整和去除內皮的血管環，雖然DJS對二者都存在舒張作用，但二者的舒張強度差異有統計學意義。DJS在內皮完整的血管環上的舒張強度明顯高于在去除內皮的血管環上的舒張強度。在內皮完整的血管環上，使用一氧化氮合酶阻斷劑L-NAME預處理后，DJS的舒張強度明顯降低。血管內皮細胞通過一氧化氮合酶催化L-精氨酸與氧結合后釋放 NO［3］。NO通過激活鳥苷酸環化酶，使環磷腺苷（cGMP）含量升高，細胞內鈣水平降低，促使肌球蛋白輕鏈脫磷酸化，平滑肌松弛，血管舒張［4］。因此，推測DJS能夠舒張血管可能與其激發內皮細胞釋放NO有關。

本實驗對DJS舒張血管的機制有了初步了解，證實DJS能夠濃度依賴性地舒張血管，舒張作用部分與內皮有關，這一機制的發現對DJS在心血管系統的藥理作用進一步開發及發現有良好血管活性的新的衍生物有很重要的指導意義。

［1］ Commitee of Jiangsu New Medical Cortege.Encyclopedia of traditional Chinese medicine［M］.Shanghai：Shanghai Science and Technology Press，1995：Preface.

［2］ Xue WX，Zhang MS，Li J，et al.Effects of taurine on aortic rings isolated from fructose-fed insulin resistance and normal rat aortic rings are different［J］.Cardiovasc Drug Ther，2008，22：461-468.

［3］ Guo SL，Zhang YF，Liu Y，et al.Effect of 15-KETE on rat isolated pulmonary arterial rings［J］.Chin Pharmacol Bull，2006，22（11）：1339-1343.

［4］ Yoshio Tanaka，Katsuo Koike，Ligia Tore.MaxiK channel roles in blood vessel relaxations induced by endothelium-derived relaxing factors and their molecular mechanisms［J］.Smooth Muscle Res，2004，40（4）：125-153.