苷肽注射液對(duì)孕鼠致畸作用的影響

董曉慶，曲桂娟，馬紅霞

（吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，吉林 長(zhǎng)春130118）

苷肽注射液主要由胸腺肽和轉(zhuǎn)移因子配制而成，系小分子免疫活性物質(zhì)。胸腺肽和轉(zhuǎn)移因子作為免疫活性增強(qiáng)劑和免疫調(diào)節(jié)劑，已應(yīng)用于人醫(yī)臨床，取得顯著效果。苷肽注射液不但具有促進(jìn)動(dòng)物體重的增長(zhǎng)作用，而且能快速激活機(jī)體免疫功能，促進(jìn)機(jī)體的體液免疫和細(xì)胞免疫。研究表明，不同劑量的苷肽注射液一定程度上可促進(jìn)動(dòng)物體重的增長(zhǎng)，給不同發(fā)育階段的豬肌肉注射苷肽注射液，其對(duì)豬的抗病效應(yīng)和增重性能有顯著的提高［1］。通過(guò)對(duì)家兔、豬的急慢性毒性試驗(yàn)，證明了苷肽注射液具有提高動(dòng)物機(jī)體免疫力的作用，不對(duì)動(dòng)物機(jī)體產(chǎn)生毒性 作用［2－4］。對(duì)小鼠的致突變?cè)囼?yàn)也證明，苷肽注射液不具有致突變作用［5］。因此，本試驗(yàn)通過(guò)對(duì)孕鼠的傳統(tǒng)致畸試驗(yàn)研究，以進(jìn)一步研究苷肽注射液有無(wú)致畸作用，為合理利用該生物制劑提供了理論依據(jù)。

1 試驗(yàn)材料

苷肽注射液，由吉林省天達(dá)藥業(yè)有限公司提供，采用有效成分含量為30mg／mL作為受試藥品。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，Wistar種健康性成熟（90～100日齡）雌、雄大鼠（購(gòu)自吉林大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心）。動(dòng)物室溫度為20℃～22℃，濕度為50%～70%，健康觀察1周后進(jìn)行本試驗(yàn)。

2 試驗(yàn)方法

設(shè)高、中、低3劑量組，依次為168.0mg／kg體重；12.5mg／kg體重；2.5mg／kg體重，陰性對(duì)照組給予生理鹽水，陽(yáng)性對(duì)照組給予維生素A（13 000 μg／kg體重視黃醇當(dāng)量）。

雌、雄鼠每晚按1∶1同籠交配，次晨觀察脫落的陰栓，對(duì)同籠未發(fā)現(xiàn)陰栓的雌鼠按常規(guī)方法對(duì)陰道分泌物涂片，檢查有無(wú)精子細(xì)胞，凡查出陰栓或精子細(xì)胞的雌鼠則認(rèn)為“受孕鼠”。如果同籠，經(jīng)5d都沒(méi)能查出“受孕鼠”，則應(yīng)調(diào)換雄鼠。查出精子當(dāng)天定為孕零天，標(biāo)明日期，將已受孕的雌鼠隨機(jī)分至各劑量組，在受孕的第7～15天，高、中、低3劑量組，每天肌肉注射（左、右兩側(cè)后肢等量 ）給予受試藥品，其中高劑量組給予受試藥品原液，給予量為0.56mL／100g體重，中、低劑量組經(jīng)生理鹽水稀釋后給予受試藥品的量為0.5mL／100g體重，陰性對(duì)照組，肌肉注射（左、右兩側(cè)后肢等量 ）給予與中、低劑量組等量的生理鹽水；陽(yáng)性對(duì)照組經(jīng)口給予維生素A，給予量為1.0mL／100g體重。且各劑量組在給予受試藥品后每隔3d稱體重1次，根據(jù)體重變化調(diào)整給受試藥品量，所有孕鼠于第20天處死，剖腹取出子宮和胎鼠，稱窩重，檢查早期吸收胎、遲死胎、死胎和活胎數(shù)。活胎鼠逐個(gè)測(cè)量記錄體重、身長(zhǎng)。稱重用精密電子天平，身長(zhǎng)及囟門大小用千分卡尺測(cè)量。骨骼檢查約占每窩胎鼠的1／2，內(nèi)臟檢查約占1／2，骨骼檢查標(biāo)本用茜素紅溶液常規(guī)染色，內(nèi)臟檢查標(biāo)本用波氏液固定。

3 試驗(yàn)結(jié)果統(tǒng)計(jì)方法

孕鼠增重、窩重、著床數(shù)、胎鼠身長(zhǎng)、尾長(zhǎng)、體重、囟門、矢狀逢均采用SPSS 10.0軟件進(jìn)行方差分析，各種數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)應(yīng)用卡方檢驗(yàn)。

4 試驗(yàn)結(jié)果與分析

見表1～6。

表1 孕鼠增重、窩重、著床數(shù)比較

由表1所見，高劑量組孕鼠增重明顯高于陽(yáng)性對(duì)照組，差異極顯著（P＜0.01），陰性對(duì)照組孕鼠增重高于陽(yáng)性對(duì)照組，差異顯著（P＜0.05），高、中、低3個(gè)劑量組各指標(biāo)與陰性對(duì)照組差異不顯著（P＞0.05）。

由表2所見，高、中、低、陰性對(duì)照組活胎數(shù)明顯高于陽(yáng)性對(duì)照組，與陽(yáng)性對(duì)照組比較差異極顯著。（P＜0.01）。高、中、低3個(gè)劑量組各指標(biāo)與陰性對(duì)照組差異不顯著（P＞0.01）。

表2 活胎、吸收胎、遲死胎、死胎比較

由表3所見，高、中劑量組肋骨畸形低于陽(yáng)性對(duì)照組，與陽(yáng)性對(duì)照組差異顯著（P＜0.05）；高、中劑量組、陰性對(duì)照組胸骨畸形低于陽(yáng)性對(duì)照組，與陽(yáng)性對(duì)照組差異顯著（P＜0.05）。高、中、低3個(gè)劑量組各指標(biāo)與陰性對(duì)照組比較差異不顯著（P＞0.05）。

表3 骨骼檢查比較

表4 胎鼠囟門、矢狀縫寬

由表4所見，高、低劑量組、陰性對(duì)照組囟門寬度明顯低于陽(yáng)性對(duì)照組（P＜0.05），與陽(yáng)性對(duì)照差異極著性（P＜0.01）。中、低劑量組、陰性對(duì)照組矢狀逢寬度明顯低于陽(yáng)性對(duì)照組（P＜0.05），與陽(yáng)性對(duì)照組相比差異極顯著（P＜0.01）。高、中、低3個(gè)劑量組各指標(biāo)與陰性對(duì)照組比較差異不顯著（P＞0.05）。

表5 胎鼠身長(zhǎng)、體重比較（）

表5 胎鼠身長(zhǎng)、體重比較（）

組別 胎鼠數(shù) 體重（g） 尾長(zhǎng)（cm） 身長(zhǎng)（cm）高劑量 123 4.02±0.48＊＊ 1.410±0.132＊＊ 3.842±0.214＊＊中劑量 115 3.98±0.34＊ 1.390±0.131 3.813±0.194低劑量 112 3.93±0.38 1.370±0.112 3.809±0.228陰性對(duì)照 119 3.99±0.40＊＊ 1.397±0.093＊＊ 3.838±0.206＊＊陽(yáng)性對(duì)照118 3.87±0.41 1.364±0.105 3.778±0.203

由表5所見，高劑量組、陰性對(duì)照組胎鼠體重、尾長(zhǎng)、身長(zhǎng)均明顯大于陽(yáng)性對(duì)照組（P＜0.05），與陽(yáng)性對(duì)照組相比有高度顯著性差異（P＜0.01）；中劑量組胎鼠體重高于陽(yáng)性對(duì)照組（P＜0.05），與陽(yáng)性對(duì)照組相比有顯著性差異（P＜0.05）。高、中、低3個(gè)劑量組各指標(biāo)與陰性對(duì)照組相比無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。

表6 胎鼠內(nèi)臟、外觀畸形比較

由表6所見，高劑量組內(nèi)臟畸形率明顯低于陽(yáng)性對(duì)照組，與陽(yáng)性對(duì)照組比較差異極顯著（P＜0.01）；中、低、陰性對(duì)照組三劑量組內(nèi)臟畸形率低于陽(yáng)性對(duì)照，與陽(yáng)性對(duì)照組比較差異顯著（P＜0.05）。高、中、低3個(gè)劑量組各指標(biāo)與陰性對(duì)照組比較差異不顯著（P＞0.05）。

5 結(jié)語(yǔ)

各劑量組的孕鼠增重、窩重、著床數(shù)、活胎數(shù)、吸收胎數(shù)、遲死胎數(shù)、死胎數(shù)、骨骼檢查、胎鼠囟門、矢狀縫寬度、胎鼠身長(zhǎng)、尾長(zhǎng)、體重、胎鼠內(nèi)臟、外觀畸形比較等各項(xiàng)指標(biāo)與陰性對(duì)照組比較均差異不顯著（P＞0.05），這表明受試藥品劑量在2.5～168.0 mg／kg體重范圍內(nèi)未見母體毒性、胚胎毒性、致畸性。因此本試驗(yàn)結(jié)果表明，苷肽注射液不具有遺傳毒性和致畸作用。

［1］曲桂娟，程培英，董曉慶，等.苷肽注射液對(duì)豬生產(chǎn)性能的影響［J］.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009，37（26）：12575－12578.

［2］曲桂娟，董曉慶，葛晨霞.苷肽注射液對(duì)家兔的慢性毒性試驗(yàn)研究［J］.中國(guó)畜牧獸醫(yī)，2010，37（10）：32－34.

［3］曲桂娟，程培英，董曉慶，等.苷肽注射液對(duì)豬的慢性毒性試驗(yàn)［J］.飼料工業(yè)，2010，31（23）：21－22.

［4］董曉慶，曲桂娟，程培英，等.苷肽注射液對(duì)豬免疫器官及血液指標(biāo)的影響研究［J］.中國(guó)獸藥雜志，2010，44（1）：35－37.

［5］程培英，曲桂娟，馬紅霞，等.苷肽注射液對(duì)鼠致突變作用的研究［J］.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2007，29（3）：334－337.